简介：摘要目的探讨基于磁共振T2驰豫时间图(T2 mapping)技术的急性心肌梗死心肌水肿定量检测的临床意义。方法选择温州市人民医院2018年7月至2019年2月诊断为急性心肌梗死在介入治疗后行心脏核磁共振成像检查的患者20例(观察组)，另选择健康志愿者20例为对照组。收集观察组患者图像资料，并对图像资料进行后处理，通过图像信息测算并记录梗死心肌及其对侧正常心肌的T2值、水肿面积和微循环障碍区域，对梗死心肌及其对侧正常心肌T2值进行比较，比较两组心脏核磁共振、心功能、血清学指标及心力衰竭相关产物。结果观察组患者通过自身梗死心肌与正常心肌进行对照，远侧梗死心肌的T2值为(90.14±6.51)ms，大于正常心肌区域的(60.71±5.15)ms，两者差异有统计学意义(t＝8.49，P<0.05)。观察组远侧梗死心肌微血管阻塞(MVO)数为17例，对照组为0例，两组差异有统计学意义(χ2＝41.45，P<0.05)。观察组左心室舒张末期容积[(88.5±16.2)mL]高于对照组[(72.4±15.1)mL]，差异有统计学意义(t＝12.51，P<0.05)。观察组射血分数为(54.1±11.2)%，低于对照组的(71.2±7.9)%(t＝18.71，P<0.05)；观察组T2值为(69.4±6.4)ms，高于对照组的(55.2±11.4)ms(t＝11.98，P<0.05)。观察组心肌延迟显像(LGE)血管梗阻程度为13%，对照组为0%，差异有统计学意义(Z＝27.62，P<0.05)。T2 mapping显示心肌梗死灵敏度、阳性预测值均较高，但其特异度相对较低。结论定量T2 mapping在急性心肌梗死后心肌水肿的评估中具有较高的临床价值，通过T2 mapping可对急性心肌梗死患者进行病变范围分析。

简介：摘要等温扩增技术是在恒温条件下进行扩增的一类新型核酸扩增技术。基于该技术建立的方法操作简便，且具有较高的灵敏度与特异性，在临床与科研等方面展现了较好的应用前景。本文就环介导等温扩增、交叉引物扩增、链替代扩增、依赖核酸序列的等温扩增和滚环扩增等技术的原理、特点及应用进行了综述。

简介：摘要目的评价快速重组酶介导的等温扩增技术(RAA)在采供血机构沙门菌生物学监测中的应用。方法加热快速裂解肠炎沙门菌标准菌株提取DNA，采用沙门菌RAA荧光型检测试剂在小型Genchek荧光检测仪内37 ℃条件下识别并扩增沙门菌的特异基因片段，20 min内实时读取荧光检测值，根据扩增曲线判定结果。评估RAA法的检测灵敏度，同时采用RAA法检测13个标准菌株和5个实验室分离的沙门菌株验证其特异性。采集51份样本，分别接种肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌标准菌株，以及无沙门菌污染的空白对照，营养琼脂平板培养48 h计数菌落数，同时采用国标GB 4789.4—2016的方法和RAA法进行沙门菌检测。结果RAA法在37 ℃ 20 min的条件下对肠炎沙门菌的最低检出限为1.9×102 CFU/mL，和非沙门菌无交叉反应。使用中消毒液和血液运输箱内壁沙门菌生物学的检测结果与国标法相同，Kappa值均为1。结论RAA技术可快速、灵敏、特异性地检测沙门菌，可应用于采供血机构沙门菌的生物学监测。

简介：摘要目的建立实时荧光环介导等温扩增（Real-time Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP）技术检测皮肤癣的方法，实现皮肤癣菌病的快速实验室诊断。方法通过在NCBI官网查找下载皮肤癣菌中毛癣菌属、小孢子菌属和表皮癣菌属临床分离率较高的菌种rRNA序列（18S rRNA, ITS1, 5.8S rRNA, ITS2和28S rRNA），运用DNASTAR Lasergene软件进行分析比对，寻找出毛癣菌属内高度保守的靶序列，且该段靶序列要与其他属存在差异，运用Primer Explorer V5设计LAMP引物。提取须癣毛癣菌NBRC6202基因组DNA作为模板筛选引物以及建立LAMP检测毛癣菌属的反应体系，以红色毛癣菌ATCC28188基因组DNA作为模板测试其敏感性和稳定性，以毛癣菌属以外的其他真菌、细菌基因组DNA验证LAMP反应体系的特异性。结果筛选的4套引物里，primer2的扩增效果较好，可在22 min检测出须癣毛癣菌，且可以特异地检测出红色毛癣菌、指间毛癣菌、疣状毛癣菌、许兰毛癣菌、紫色毛癣菌。本研究建立的毛癣菌属RT-LAMP检测方法的最低检测限为1 pg/μL；在10 000 pg/μL、100 pg/μL和1 pg/μL三个浓度的分别10次重复检测实验中平均CT值和CV%分别为9.24±0.30，3.29%、10.57±0.54，5.12%、15.95±0.52，3.24%。结论实验建立的毛癣菌属LAMP检测方法在特异性、敏感性和稳定性三方面均表现出优越的性能，能快速准确地检测出毛癣菌属常见菌种，具有良好的临床应用前景。

简介：摘要伴随医学进步，操作简单、反应快速且无设备和专业技术人员依赖的即时检测（POCT）有望实现对患者进行连续监测、诊断、管理和筛查，是体外诊断行业的重要发展方向。结合新技术原理，在提高灵敏度、特异性的前提下进一步实现定性至精确定量的转变是POCT发展的必然。在POCT平台开发过程中，具有高效扩增特性及简单、快速且低成本特点的环介导等温扩增（LAMP）技术扮演着越来越重要的角色。本文概述了LAMP技术作用机制及基于LAMP技术开发POCT平台的研究进展和临床应用，总结了目前基于LAMP技术的POCT平台存在的不足及未来发展方向。

简介：摘要目的建立基于SYBR Green I颜色判定的检测新型冠状病毒（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）ORF1ab基因的逆转录环介导等温扩增方法（reverse transcription loop-mediated isothermal amplification，RT-LAMP），为诊断SARS-CoV-2提供简便、快速和准确可靠的工具。方法基于GenBank中SARS-CoV-2 ORF1ab基因序列保守区设计引物，经引物筛选和RT-LAMP反应体系优化后进行灵敏度和特异性评价，并与实时荧光定量RT-PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）方法进行比较。结果基于颜色判定的RT-LAMP方法可在65℃45 min内完成SARS-CoV-2的快速检测，检测限为3 copies/reaction，与qRT-PCR的敏感度一致。RT-LAMP检测人冠状病毒OC43、人冠状病毒NL63和乙型流感病毒核酸样本结果为阴性，具有较好的特异性。经SARS-CoV-2临床样本验证，RT-LAMP与qRT-PCR的检测符合率达100%。结论基于颜色判定的RT-LAMP方法灵敏度高、特异性强，适用于SARS-CoV-2的快速可视化检测，具有应用于SARS-CoV-2样本的初筛及基层卫生医疗机构和现场推广的潜力。

简介：摘要目的运用逆转录解旋酶等温扩增（RT-tHDA）和侧流层析技术，建立新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测新方法。方法收集2020年1至4月东部战区总医院基础医学实验室共143份2019-nCoV PCR阴性核酸标本和20份PCR阳性核酸标本。针对2019-nCoV N基因和E基因保守区序列各设计5对引物，扩增产物进行凝胶电泳分析，筛选出RT-tHDA最佳引物。分别扩增高浓度（5×105 拷贝/ml）、低浓度（5×102拷贝/ml）模拟标本，利用侧流层析试纸条（LFD）检测RT-tHDA扩增产物，使结果可视化。优化显色和扩增时间，建立tHDA-LFD最佳反应体系。该方法检测各低、中、高3种浓度的模拟标本15次，以阳性符合率来评估方法学精密度。制备模拟标本评价方法学检测限。分别检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、冠状病毒229E，评价tHDA-LFD法的交叉反应性。采用tHDA-LFD法检测本实验室收集保存的163份标本，进行临床诊断效能评价。结果采用一步法RT-tHDA结合LFD，建立扩增时间为60 min的2019-nCoV核酸检测方法。该方法检测3种浓度的模拟标本，阳性符合率为100%，精密度和重复性较好，且与其他6种呼吸道病原体均未出现交叉反应。该方法检测N基因、E基因的最低检测限均为5×102 拷贝/ml。诊断效能评价结果显示，该法敏感度为95.00%（19/20），特异度为100.00%（143/143），阳性预测值为100.00%（19/19），阴性预测值为99.31%（143/144）。和金标准qPCR法相比，两种方法的Kappa值为0.971（P<0.000 1），一致性较好。结论本研究成功建立了基于tHDA-LFD法的2019-nCoV可视化检测方法。

简介：摘要感染仍是婴幼儿致病的重要原因。因年龄小、免疫功能不健全，儿童感染具有"急"、"重"、"致病原复杂"等特征，往往会造成严重后果，其快速、准确诊断尤为重要。然而，现有病原检测手段仍较为局限，存在检测效率低、周期长、受制于实验条件及人员等缺点，较难普及。以环介导等温扩增技术为基础的病原学检测手段效率高、反应成本低廉、操作简单，在儿童病原的快速、准确、低成本检测中具有巨大应用潜力，特别适合在基层医疗单位进行推广。环介导等温扩增技术与纸基微流控芯片、智能自动化系统、数字化系统等技术结合后，无疑将为儿童临床病原学诊断带来重大革新。

简介：摘要目的建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增（reverse transcription recombinase-aided amplification，RT-RAA）技术检测寨卡病毒（Zika virus，ZIKV）的方法，以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法通过基因组序列比对，选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针，并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性，通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增，检测系列稀释的ZIKV重组质粒，其95%检测限可达到15拷贝/反应，特异性强，与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应，且重复性好。结论本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法，具有反应迅速，无需精密仪器，操作简单等优点，适合于应急快速检测。

简介：摘要目的基于重组酶介导的扩增技术(recombinase aided amplification，RAA)和CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)-Cas13a(CRISPR-associated protein 13a)检测，建立一种快速、灵敏且特异的重要境外输入性病毒检测方法。方法以流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)、黄热病毒(Yellow fever virus，YEV)、西尼罗病毒(West Nile virus，WNV)、中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus，MERS-CoV)、埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)、登革病毒(Dengue virus，DENV)、裂谷热病毒(Rift Valley fever virus，RVFV)、寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)为检测对象，设计特异性RAA扩增引物和CRISPR RNA(crRNA)，建立RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测反应，评价方法的灵敏度和特异性，使用登革热疑似临床样本进行检测，并与荧光RT-PCR技术进行比较，同时检测其余7种病毒临床模拟样本。结果RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测方法能在39 ℃条件下，40~52 min内检测出8种输入性传染病病原体，灵敏度达到1~10拷贝/μl，并且这8种病原体之间无交叉反应，临床样本均可100%检测出。结论建立的RAA扩增结合CRISPR-Cas13a蛋白检测方法能够灵敏、特异且快速地检测出8种境外输入性传染病病原体。

简介：摘要目的基于逆转录重组酶介导的恒温扩增（reverse transcriptional recombinase aided amplification，RT-RAA）技术，建立一种快速，灵敏，简便的SARS-CoV-2棘突蛋白（S）H146Y突变检测方法。方法针对SARS-CoV-2棘突蛋白H146Y突变区域设计RT-RAA特异性引物和荧光探针，使用优化的RT-RAA方法进行恒温扩增检测，评价方法的灵敏度和特异性，并与二代测序技术进行比较。结果基于荧光信号的RT-RAA方法能在39 ℃，30 min完成检测，SARS-CoV-2 S蛋白H146（S-H146）野生株和Y146（S-Y146）突变株检测限均为10 copies/μL，能够依据荧光值明显区分S-H146毒株与S-Y146毒株的重组质粒或临床样本，且和五种常见呼吸道感染病毒无交叉反应，与二代测序技术方法一致性高。结论建立的RT-RAA荧光检测方法具有灵敏度高，特异性强，适用于SARS-CoV-2 S蛋白H146Y突变株的快速检测，为基层医疗机构提供了新的鉴定方法。

简介：摘要目的使用合成磁共振成像(synthetic MRI)技术测量和分析大脑的整体体积值和弛豫值，研究帕金森病(Parkinson's disease，PD)患者与正常对照者间的相关数值的差别。材料与方法纳入28例帕金森病患者[年龄：(67±11)岁；男性17人，女性11人]和28名正常对照者[年龄：(68±9)岁；男性12人，女性16人]。所有受试者均在3.0 T MRI上进行合成磁共振成像序列(MAGnetic resonance imaging compilation，MAGiC)扫描。使用SyMRI 8.0后处理软件对合成磁共振成像原始数据进行进一步后处理，以生成脑分割体积值和弛豫值。结果包括白质体积(white matter volume，WMV)、灰质体积(gray matter volume，GMV)、脑脊液体积(cerebral spinal fluid volume，CSFV)、髓鞘体积(myelin volume，MYV)、脑实质体积(brain parenchymal volume，BPV)、颅内体积(intracranial volume，ICV)、白质分数(white matter fraction，WMF=WMV/BPV)、灰质分数(gray matter fraction，GMF=GM/BPV)、髓鞘分数(myelin fraction，MYF=MYV/BPV)、脑脊液分数(cerebral spinal fluid fraction，CSFF=CSF/ICV)；T1、T2弛豫值和质子密度(proton density，PrD)，在部分容积超过95%对应组织(白质、灰质或脑脊液)的体素内取平均值。使用独立样本t检验来评估两组之间的年龄、体积值、体积分数和弛豫值的差异。用卡方检验评估两组之间的性别差异。结果两组之间的年龄(P=0.587)和性别(P=0.181)无统计学差异。体积值和分数方面，帕金森病患者WMV (515.514±71.213 vs. 461.800±64.816，P=0.005)、WMF (43.621±3.788 vs. 40.660±2.844，P=0.002)、MYV (162.257±24.928 vs. 144.611±22.575，P=0.008)和MYF (13.707±1.284 vs. 12.711±1.094，P=0.003)明显高于正常对照组；GMF (52.868±3.234 vs. 56.011±2.550，P＜0.001)明显低于正常对照组，两组间GMV、BPV、ICV、CSFV和CSFF无明显统计学差异。弛豫值方面，帕金森病患者的灰质T1 (1604.872±56.038 vs. 1570.553±55.992，P=0.026)、灰质T2 (95.215±3.667 vs. 91.489±5.805，P=0.006)明显高于正常对照组；白质T1 (749.786±21.935 vs. 761.379±20.651，P=0.047)和脑脊液PrD (101.149±1.327 vs. 101.842±0.972，P=0.030)明显低于正常对照组，两组间脑脊液T1、白质T2、脑脊液T2和白质PrD无明显统计学差异。结论合成磁共振成像可以同时获得体积测量值和弛豫值，可以区分帕金森病患者与正常人，给临床诊断方面提供更多定量指标。

简介：摘要目的通过与传统定量方法进行对比，验证合成MRI对纵向弛豫时间(longitudinal relaxation time，T1)、横向弛豫时间(transverse relaxation time，T2)定量计算的准确性及可重复性。材料与方法针对3.0 T MRI设备，使用灰质、白质、脑脊液模体分别进行合成MRI序列和传统定量成像扫描，共进行四次重复采集。对传统定量图像，通过拟合计算方法得到相应的T1、T2值；对合成MRI图像，使用专用后处理软件计算T1、T2值。对两种方法得到的定量值进行差值计算和重复测量方差分析。结果合成MRI和传统定量方法计算的T1值之间差异无统计学意义(F=0.113，P=0.7537)，并且四次测量之间差异无统计学意义(F=0.613，P=0.4968)；同样地，两种方法计算的T2值之间差异无统计学意义(F=0.001，P=0.9737)，四次测量之间差异无统计学意义(F=1.162，P=0.3498)。结论合成MRI对T1、T2弛豫定量测定结果准确，可应用于临床中的定量研究。

简介：摘要在数控加工技术当中，当下对于其仿真系统的研究较为热门。随着研究的不断深入，当下对过去存在的扩充性差，维护问题蒋多的情况有所缓解。当前其主要技术面向于对仿真系统当中的重用性及扩充性方面，帮助数控加工技术对不同对象进行仿真，为此本文将对数控机床的功能及结构进行该处，并为此建立相应模型，模型种类包括仿真系统模型对象及仿真模型。

简介：摘要随着我国经济的发展，人们越来越重视自身的健康，因此我国对整治大气污染的力度逐渐加大，挥发性有机物（volatileorganiccompoundsVOCs）开始进入人们的视野。本文着重研究印刷生产过程VOCs影响因素，不同于以往着重对挥发性有机物进行收集或燃烧处理，而是在此基础上遵循全过程控制原则，若是全面实施，将给我国凹版印刷企业及环境带来颇大的益处。

简介：摘要在桥梁施工工作中，安全是最重要的，安全胜于一切。只有高度重视安全，才能够保障桥梁施工工作的顺利开展与完成，才能够更好地保障工程的质量，也才能更好地实现经济效益和社会效益。但是实际施工过程中，由于人为和环境等多方面的影响，这也会留有一些施工的安全隐患，本文重点探讨了桥梁施工中所存在的安全隐患问题，最后提出了桥梁施工安全管理的重要性。

简介：摘要机械制造行业是当前我国工业领域中的重要行业，机械制造行业的发展，对于我国经济社会发展和人民生活都有着直接影响，尤其是随着近年来随着人们生活水平的不断提高，机械制造行业的发展也在不断加快，很多新兴工艺和技术得到了应用，为机械制造行业在新时期的发展提供了助力。只是加工工艺在更多的同时，机械制造过程中的工艺选择就会出现问题，在生产的过程中，加工工艺的应用质量也会受到影响，影响到加工产品的质量。所以本就对机械制造行业中的工艺过程可靠性进行研究探究，探究提高机械制造工艺过程可靠性的有效策略。

简介：摘要环境问题作为当今全世界都时刻关注的焦点，其严重程度可见一斑。中国在经济迅速增长的30多年后，环境问题日益凸显。在新时代我国经济发展逐渐进入新常态的背景下环境污染问题此起彼伏，环境应急防控工作已经迫在眉睫。针对这一问题，我国政府给予高度重视，不断颁布相关强化措施，对环境风险进行严格掌控。即便如此，我国近年来仍然出现了很多环境污染事故，环境应急管理工作强度大、难度高。所以，有必要建立环境风险防控、紧急应对、环境保护一体化的环境管理机制。

简介：摘要男性生精过程是一个多步骤、被精密调控的生理过程。单链非编码小RNA分子microRNA(简称miRNA)作为一种基因调控的重要方式，通过抑制和阻碍翻译过程来调节转录后基因沉默，参与各种生理过程。目前已有多项研究证实miRNA介导的转录后基因表达调控与男性精子发生过程存在密切相关性。因此，探讨miRNA在生精过程中的作用及其表达水平变化，有助于进一步了解男性生精的分子机制，寻找针对男性不育有效的生物标志物和治疗策略。本文将从miRNA直接参与或间接影响精子发生2个方面进行综述，总结miRNA在生精过程中的重要作用。

简介：摘要目的总结北京大学临床研究所临床研究项目管理经验，提出应用REDCap(Research Electronic Data Capture)数据管理系统提高随访过程管理水平。方法分析临床研究随访过程管理现状，提出应用REDCap随访管理的方法。结果REDCap通过"直接管理"和"系统管理"的数据管理方式能提高临床研究随访质量和管理水平，在此期间也能更好地保护受试者的隐私和权益。结论REDCap在源头上保证了随访过程的数据质量，并能及时跟踪和规范地进行随访管理，其可作为临床研究随访管理的辅助工具进行推广。