简介：摘要心肌梗死也称为缺血性心脏病，是心血管疾病死亡的主要原因之一，并且随着社会人口的老龄化，其发病率不断增加。有研究表明，血管再生可以有效的促进血液向远端缺血组织流动,且运动可以诱导外周循环血管生成，而内皮祖细胞（ Endothelial Progenitor Cells，EPCs）的数量和活性是血管新生的关键因素。但是，运动康复训练对康复期心肌梗死患者循环血EPCs的影响及其临床预后价值如何却并不十分明确，本文回顾整理了近几年的相关文献资料，进行综述。

简介：摘要目的探讨双氢睾酮（DHT）对人外周血早期内皮祖细胞（PB-EPCs）增殖、迁移功能的影响及RhoA/ROCK信号通路在其中的作用。方法取健康成人外周血分离、培养出早期EPCs并鉴定。分别以不同浓度DHT(1、10、100 nmol/L)干预，得出最佳浓度和最佳作用时间后用于后续干预实验。分组：对照组、DHT、RhoA抑制剂C3 exoenzyme+DHT组、ROCK抑制剂Y-27632+DHT组。检测各组EPCs的增殖、迁移能力。ELISA法检测各组细胞上清液液中VEGF蛋白含量。结果DHT在一定范围内呈浓度-时间依赖性促进EPCs增值、迁移功能，分别在浓度为10 nmol/L和24 h达到最大作用效果。与单纯10 nmol/L的DHT刺激组相比，C3 exoenzyme[(0.22±0.02) vs (0.26±0.05),P>0.05]和Y-27632[(0.21±0.04) vs (0.26±0.05), P>0.05]能够减弱DHT诱导的EPCs增殖，但差异无统计学意义。DHT对EPCs迁移能力的促进作用可被C3 exoenzyme[(35.26±4.27) vs (46.92±5.46), P<0.05]和Y-27632[(33.61±5.33) vs (46.92±5.46), P<0.01]抑制。DHT对EPCs分泌VEGF能力的促进作用可被C3 exoenzyme[(116.75±7.42) vs (156.80±21.74), P<0.05]和Y-27632[(121.73±5.33) vs (156.80 ±21.74), P<0.01]抑制。结论DHT呈一定的浓度-时间依赖性促进EPCs的增殖、迁移以及VEGF的表达，其中RhoA/ROCK信号通路参与调控了此过程。

简介：摘要目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)介导人内皮祖细胞外泌体(EPC-Exos)对高糖受损人内皮细胞生物学功能的影响。方法体外分离和培养人脐带血内皮祖细胞(EPCs)；将鉴定成功的EPCs用100 mg/L的AS-Ⅳ液处理，培养24 h后，采用超速离心法结合超滤法提取EPCs分泌的外泌体即EPC-Exos，采用特异性标志物CD9、CD63、CD81鉴定EPC-Exos，透射电镜观察EPC-Exos的形态特征。同时体外分离、培养并鉴定人内皮细胞，将鉴定成功的内皮细胞用30 mmol/L的葡萄糖预处理120 h后，随机分为实验组(用EPC-Exos干预)和对照组(用PBS干预)，同时设置正常组(无糖培养基培养的内皮细胞)。三组细胞培养24 h后，通过CCK-8细胞增殖检测试剂盒、细胞划痕试验、黏附能力测定试验及Matrigel体外成血管试验观察经AS-Ⅳ干预的EPC-Exos对高糖受损内皮细胞增殖、黏附、迁移和成管功能的影响。结果与正常组比较，对照组人内皮细胞增殖、迁移、黏附及成管能力显著降低(t＝24.35、6.80、10.65、9.62，P<0.05)。与对照组比较，实验组人内皮细胞增殖、黏附、迁移及成管能力显著增强(t＝30.68、5.99、5.40、8.25，P<0.05)。结论高糖受损状态下的人内皮细胞生物学功能严重受损；通过黄芪甲苷介导的EPC-Exos可显著改善高糖受损人内皮细胞的生物学功能，具有调节糖尿病损伤内皮血管新生的潜能。

简介：摘要目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)介导人内皮祖细胞外泌体(EPC-Exos)对高糖受损人内皮细胞生物学功能的影响。方法体外分离和培养人脐带血内皮祖细胞(EPCs)；将鉴定成功的EPCs用100 mg/L的AS-Ⅳ液处理，培养24 h后，采用超速离心法结合超滤法提取EPCs分泌的外泌体即EPC-Exos，采用特异性标志物CD9、CD63、CD81鉴定EPC-Exos，透射电镜观察EPC-Exos的形态特征。同时体外分离、培养并鉴定人内皮细胞，将鉴定成功的内皮细胞用30 mmol/L的葡萄糖预处理120 h后，随机分为实验组(用EPC-Exos干预)和对照组(用PBS干预)，同时设置正常组(无糖培养基培养的内皮细胞)。三组细胞培养24 h后，通过CCK-8细胞增殖检测试剂盒、细胞划痕试验、黏附能力测定试验及Matrigel体外成血管试验观察经AS-Ⅳ干预的EPC-Exos对高糖受损内皮细胞增殖、黏附、迁移和成管功能的影响。结果与正常组比较，对照组人内皮细胞增殖、迁移、黏附及成管能力显著降低(t＝24.35、6.80、10.65、9.62，P<0.05)。与对照组比较，实验组人内皮细胞增殖、黏附、迁移及成管能力显著增强(t＝30.68、5.99、5.40、8.25，P<0.05)。结论高糖受损状态下的人内皮细胞生物学功能严重受损；通过黄芪甲苷介导的EPC-Exos可显著改善高糖受损人内皮细胞的生物学功能，具有调节糖尿病损伤内皮血管新生的潜能。

简介：摘要目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)/内皮祖细胞(EPC)作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨(ECM-TEB)修复大鼠股骨缺损的效果。方法分离培养骨髓来源的MSC和EPC并进行功能鉴定，种植上架于纳米晶胶原基人工骨颗粒，培养14 d后冻干，获得MSC/EPC ECM-TEB和MSC ECM-TEB。扫描电镜观察MSC和EPC在支架表面的生长形态。分别提取MSC ECM-TEB蛋白浸提液(对照组)和MSC/EPC ECM-TEB蛋白浸提液(实验组)，加入EPC培养系统中进行迁移、划痕修复、管腔形成检测；另加入MSC培养系统中进行茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)染色检测，观察两组细胞募集、血管生成和成骨分化情况。选取12只SD大鼠，建立股骨缺损模型，按照随机数字表法分为：(1)假手术组：仅在缺损处进行清创处理；(2)MSC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC ECM-TEB；(3)MSC/EPC ECM-TEB组：在缺损处植入MSC/EPC ECM-TEB，每组4只大鼠。2个月后行Micro-CT检查和缺损区Masson三色染色观察骨缺损修复情况。冻干后低温保存3个月，采取同位素相对标记与绝对定量技术(iTRAQ)标记蛋白质谱检测MSC ECM-TEB和MSC/EPC ECM-TEB在成血管方面的差异，并采用基因本体论/京都基因与基因组百科全书技术(GO/KEGG)功能富集方法分析其原因。结果MSC和EPC在支架表面生长、增殖良好，形成光滑的细胞层状结构。实验组在细胞迁移数、划痕修复比例和管腔形成长度分别为(121.6±8.3)个、(61.5±5.9)%、(11.3±0.6)mm，较对照组显著增多[(85.0±6.7)个、(39.3±3.6)%、(5.9±0.4)mm](P均<0.01)。茜素红染色和ALP染色结果显示，实验组钙结节矿化面积比例显著增加[(38.8±3.3)%∶(49.9±3.0)%、(38.8±2.4)%∶(45.3±3.3)%] (P均<0.05)。Micro-CT和Masson染色结果表明，MSC/EPC ECM-TEB组骨缺损修复良好，MSC ECM-TEB组仅形成少量新骨，假手术组几乎没有新骨形成；骨体积分数、骨小梁数量和骨小梁厚度差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白质谱分析结果表明，与MSC ECM-TEB组相比，MSC/EPC ECM-TEB组中有83个血管生成相关的因子显著上调(差异倍数>2，P<0.05)；GO/KEGG功能富集分析显示，与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在"血管发育"等生物过程存在明显差异(P<0.01)，"血管平滑肌收缩通路"等显著增强(P<0.01)。结论与MSC ECM-TEB相比，MSC/EPC ECM-TEB在细胞募集、血管生成和新骨生成方面显著增强，是一种更佳的可用于创伤性骨缺损修复的组织工程骨构建策略。

简介：摘要目的探讨妊娠对RA患者内皮祖细胞（EPC）的影响及机制。方法将2016年1月至2018年6月来本院就诊的RA初治患者纳入本项研究，按照有无妊娠，将患者分为单纯RA组和RA合并妊娠组，均为女性患者，每组各30例；免疫组织化学染色检测滑膜组织内淋巴细胞共同抗原（LCA）+淋巴细胞和CD68+巨噬细胞的数目；流式细胞术检测EPC和内皮细胞的比例；ELISA检测EPC上清中血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子（SDF）-1、IL-6和IL-10的浓度。2组之间比较采用t检验，多组间比较用单因素方差分析。结果免疫组织化学结果显示RA合并妊娠组关节滑膜内CD68+巨噬细胞和LCA+淋巴细胞的数目低于单纯RA组；ELISA的结果显示单纯RA组外周血可溶性人HLA-G的浓度为（8.9±1.7）pg/ml，RA合并妊娠组的浓度为（396.7±89.6）pg/ml，2组差异有统计学意义（t=4.329，P<0.01）；流式细胞学检测结果显示单纯RA组患者淋巴细胞中EPC的比例为（0.13±0.03）%，RA合并妊娠组的比例为（0.76±0.09）%，2组差异有统计学意义（t=6.671，P<0.01）；相关性分析结果显示2组患者外周血中EPC比例与可溶性HLA-G浓度呈正相关（r=0.886 1，P<0.01）；体外的实验结果显示HLA-G能够促进单纯RA患者EPC旁分泌和分化功能的恢复。结论妊娠能够提高RA患者体内EPC的数量和生物学功能，HLA-G在这个过程中可能发挥着重要作用。

简介：摘要目的分析术前循环肿瘤细胞(CTC)和循环肿瘤血管内皮细胞(CTEC)检测在胃癌辅助诊断中的作用及其与胃癌患者临床病理特征的关系。方法本研究纳入2018年11月至2020年6月就诊于上海市第一人民医院普外科并经病理确诊的62例胃癌患者(胃癌组)和11例胃部良性疾病患者(对照组)，采用差相富集技术(SE)与免疫荧光染色-染色体荧光原位杂交(i·FISH)整合成的SE-i·FISH技术检测患者的CTC和CTEC，分析CTC和CTEC与胃癌患者临床病理特征的关系。结果胃癌组CTC数目高于对照组，差异有统计学意义(t＝2.693, P＝0.009)；胃癌组CTEC数目高于对照组，差异有统计学意义(t＝2.015，P＝0.048)。ROC曲线显示，当cut-off值定为9个细胞/6 ml血时，CTC在胃癌诊断中的灵敏度为84%，特异性为82%(AUC＝0.876，95% CI，0.792～0.963，P<0.01)；当cut-off值定为6个细胞/6 ml血时，CTEC在胃癌诊断中的灵敏度为50%,特异性为100%(AUC＝0.727，95% CI，0.603～0.851，P＝0.02)。CTC阳性与胃癌患者的肿瘤部位(χ2＝4.292，P＝0.038)、TNM分期(CTC≥10时χ2＝4.848，P＝0.028; CTC≥11时χ2＝6.234，P＝0.013)有关，CTEC阳性与胃癌患者的血清CA19-9(χ2＝4.858，P＝0.028)和血清CA724(χ2＝4.108，P＝0.043 )有关，差异均有统计学意义。结论SE-i·FISH技术在胃癌CTC和CTEC检测中具有较高的灵敏度和特异性，对于胃癌的辅助诊断和早期检测具有重要意义。

简介：摘要目的探讨静脉注射免疫球蛋白（Intravenous immunoglobulin，IVIG）不敏感型川崎病中循环内皮细胞（Circulating endothelial cells，CECs）、内皮细胞微粒（Endothelial microparticles，EMPs）检测的临床意义。方法选取小儿川崎病患者55例为研究对象，分别在急性期、亚急性期和恢复期检测外周静脉血中CECs、EMPs及IL-6、TNF-α的水平，同时在疾病各个时期行心脏彩超检查，动态监测冠状动脉病变（Coronary artery lesions，CALs）情况。根据研究对象对IVIG敏感程度，选取IVIG不敏感型川崎病9例为观察组，随机选取18例IVIG敏感型川崎病为对照组，其中观察组根据病程中出现CALs与否分为CALs组5例、NCALs组4例，总结临床资料并统计分析。结果（1）观察组急性期、亚急性期CECs、EMPs水平高于同期对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；恢复期观察组与对照组CECs、EMPs水平差异无统计学意义（P>0.05）。（2）观察组在亚急性期CECs、EMPs、IL-6、TNF-α水平略低于急性期，但差异无统计学意义（P>0.05）；其急性期及亚急性期以上指标明显高于恢复期，差异有统计学意义（P<0.05）。（3）采用Spearman相关系数分析，观察组CECs与IL-6、TNF-α呈正相关（r＝0.691，P<0.01；r＝0.584，P<0.01）；观察组EMPs与IL-6、TNF-α呈正相关（r＝0.714，P<0.01；r＝0.799，P<0.01）。（4）观察组中CALs组急性期及亚急性期CECs、EMPs、IL-6、TNF-α水平均高于同期NCALs组，差异有统计学意义（P<0.05）；恢复期两组指标差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论IVIG不敏感型川崎病患者CECs、EMPs水平变化与全身中小血管炎密切相关，考虑外周静脉血CECs、EMPs检测可能有助于对川崎病患者出现IVIG不敏感的早期预测，有助于对IVIG不敏感型川崎病患者疗效评估及出现冠状动脉病变的早期判断。

简介：摘要内皮祖细胞(EPCs)是具有血管生成潜能的祖细胞，其主要功能一方面是通过旁分泌促血管生成因子及神经保护因子而发挥作用，另外一方面是具有向血管内皮细胞分化的能力，并将自身整合到新形成的毛细血管中，因而在血管修复和神经保护中发挥重要作用。EPCs的表面标志物和功能研究是EPCs研究的基础。目前一系列临床试验、动物实验和离体细胞学研究表明，EPCs的自体移植或与其他细胞联合移植可促进视网膜血管修复，改善视网膜功能且安全性较好。糖尿病视网膜病变(DR)被定义为由全身代谢异常引起的视网膜神经血管单位(NVU)受损的难治性视网膜疾病，EPCs数目改变及功能受损参与DR的发生和发展，眼科医师应该关注基于EPCs的疗法对DR的治疗意义。目前DR的治疗策略包括EPCs移植、EPCs与其他细胞联合移植以及内源性EPCs的调节，EPCs独特的生物学特性为其在修复NVU损伤及DR防治方面提供许多可能性。本文从EPCs的起源、生理病理状态、功能、治疗策略、临床应用5个方面展开，介绍EPCs在DR中的最新研究进展，同时对EPCs治疗存在的问题和技术瓶颈进行讨论。

简介：摘要血管新生是创面修复的核心步骤，血管内皮祖细胞(EPC)在其中发挥着极其重要的作用。新近研究显示，血管EPC源性外泌体(EPC-Exo)能保护血管，促进血管内皮细胞增殖、迁移及对血管内皮细胞具有抗炎、抗氧化及抗凋亡等作用。本文就近年来血管EPC-Exo在血管新生的作用机制及创面修复领域的潜在应用研究方面进行综述。

简介：摘要目的探讨黄芪甲苷对人内皮祖细胞(EPC)分泌外泌体及外泌体中微小RNA-126(miRNA-126)表达的影响。方法取湖南中医药大学第一附属医院妇产科2019年出生的1名足月健康新生儿脐带血，采用密度梯度离心法分离单个核细胞并培养7 d，其间行形态学观察；取第3代细胞，采用CD31免疫磁珠分选法和双荧光染色法鉴定。将鉴定成功的EPC按照随机数字表法分为黄芪甲苷组和磷酸盐缓冲液(PBS)组。黄芪甲苷组细胞加入终质量浓度100 mg/L的黄芪甲苷培养24 h，PBS组细胞加入等体积的PBS培养24 h。培养结束后收集2组细胞培养上清液中的外泌体，采用蛋白质印迹法检测外泌体特征性标志物CD9、CD63和CD81表达，于透射电子显微镜下观察EPC外泌体(EPC-Exo)形态，采用纳米颗粒跟踪分析技术检测EPC-Exo的粒径，采用二辛丁酸法测定EPC-Exo的浓度(样本数为3)，采用反转录PCR法测定EPC-Exo中与血管新生相关miRNA-126-3p和miRNA-126-5p的表达(样本数为3)。对数据行独立样本t检验。结果(1)培养第4天，细胞开始贴壁生长，圆形、梭形、条形等多形态同时出现；继续培养至第7天时，细胞边缘清晰，呈铺路石样排列，中央细胞呈圆形，周边细胞呈梭形。(2)CD31免疫磁珠分选法显示细胞膜染绿色，细胞核染蓝色；双荧光染色法显示细胞呈橙黄色。经以上鉴定，细胞被证实为EPC。(3)培养24 h，2组EPC-Exo的CD9、CD63和CD81表达均呈阳性，证实本实验已成功提取EPC-Exo。(4)培养24 h，2组EPC-Exo均呈圆形膜囊泡，形态无明显差异。(5)培养24 h，黄芪甲苷组中98.7%的EPC-Exo粒径为84.7～143.1 nm，PBS组中98.0%的EPC-Exo粒径为88.7～123.5 nm。(6)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo的质量浓度为(310±5)μg/mL，明显高于PBS组的(257±5)μg/mL，t＝13.369，P<0.01。(7)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo中miRNA-126-3p(t＝16.062，P<0.01)和miRNA-126-5p(t＝3.252，P<0.05)均明显多于PBS组。结论黄芪甲苷可改善人EPC分泌外泌体的功能，且所分泌的外泌体负载miRNA-126。

简介：摘要目的探讨循环血内皮细胞微粒(EMPs)与晚期肺癌疾病进展(PD)的关系及其对疗效的预测价值。方法收集2018年10月至2019年5月解放军总医院第一医学中心肿瘤科常规治疗的88例晚期肺癌患者资料，检测治疗前血常规、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤标志物以及CD105＋EMPs的表达情况。采用流式细胞仪检测CD105＋EMPs数目，采用多因素logistic回归分析晚期肺癌进展的预测指标。结果88例晚期肺癌患者中，客观反应组60例，PD组28例。两组患者的性别、年龄、基础疾病史、肿瘤分期、肿瘤类型、治疗方案等差异均无统计学意义(均P>0.05)，两组患者细胞角蛋白19片段、神经元特异性烯醇化酶、LDH、总微粒(MPs)、CD105＋EMPs的差异均有统计学意义(均P<0.05)。logistic多因素回归分析结果显示，CD105＋EMPs≥70 events/μl(OR＝3.623，95%CI为1.345～9.761，P＝0.011)和LDH(OR＝1.008，95%CI为1.001～1.015，P＝0.032)能够预测晚期肺癌的进展。根据多因素回归分析结果建立预测晚期肺癌进展模型，受试者工作特征曲线示，曲线下面积为0.729(95%CI为0.620～0.837，P＝0.001)，敏感度为32.1%，特异度为91.6%，阳性预测值为64.2%，阴性预测值为74.3%。结论CD105＋EMPs与晚期肺癌进展相关，CD105＋EMPs联合LDH能够预测晚期肺癌的疗效。

简介：摘要目的探讨过表达线粒体融合蛋白2(Mfn2)对阿霉素(Dox)诱导下血管内皮祖细胞(EPCs)衰老及凋亡的影响。方法抽取SD雄性大鼠外周动脉血，分离培养EPCs，进一步分为，正常EPCs组、空载体组、Mfn2过表达组，经0.2 μmol/L和2.0 μmol/L Dox诱导，通过激光共聚焦显微镜观察线粒体分裂情况；通过β-半乳糖苷酶活性检测、原位末端标记法(TUNEL)染色，检测细胞衰老和凋亡情况；蛋白印迹法检测细胞衰老标志蛋白多肿瘤抑制基因1(p16INK4A)的表达；实时荧光定量聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及血管性血友病因子(vWF)的表达。多组间均数比较采用单因素方差分析。结果在0.2 μmol/L和2.0 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(5.83±1.71)%、(6.72±0.57)%]线粒体分裂的细胞比例低于正常EPCs组[(19.16±0.82)%、(68.56±5.31)%]和空载体组[(17.53±2.86)%、(66.54±2.86)%，F＝40.403、302.725，P<0.05]，差异均有统计学意义；在0.2 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(15.0±0.33)%]β-半乳糖苷酶活性升高的细胞比例低于正常EPCs组[(35.0±0.61)%]和空载体组[(36.0±1.23)%，F＝637.291，P<0.05]，差异均有统计学意义；在2 μmol/L Dox处理下，Mfn2过表达组[(11.90±0.50)%]TUNEL+细胞的比例低于正常EPCs组[(34.50±0.80)%]和空载体组[(35.20±1.60)%，F＝458.327，P<0.05]，差异均有统计学意义；在0.2 μmol/L Dox处理条件下，Mfn2过表达组eNOS mRNA(0.65±0.02)和vWF mRNA(0.65±0.01)的相对表达高于正常EPCs组(0.43±0.03、0.50±0.02)以及空载体组(0.34±0.02、0.48±0.02，F＝134.643、71.646，P<0.05)，差异均有统计学意义；在2.0 μmol/L Dox处理条件下，Mfn2过表达组eNOS mRNA(0.71±0.02)和vWF mRNA(0.66±0.03)的表达高于正常EPCs组(0.33±0.02、0.28±0.02)以及空载体组(0.38±0.03、0.35±0.01，F＝225.712、262.934，P<0.05)，差异均有统计学意义。结论过表达Mfn2可以抑制线粒体分裂，拮抗Dox诱导下EPCs的衰老及凋亡，恢复EPCs的功能。

简介：摘要目的评价内皮祖细胞源性外泌体对氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤的影响。方法培养HT22小鼠海马神经元，采用随机数字表法分为3组(n＝30)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和氧糖剥夺-复氧复糖+内皮祖细胞源性外泌体组(OGD/R+EXO组)。C组细胞正常培养，OGD/R组采用无糖无血清DMEM培养基在94%N2-1%O2-5%CO2混合气体培养6 h进行氧糖剥夺，随后更换正常培养基进行复氧复糖24 h。OGD/R+EXO组于氧糖剥夺-复氧复糖造模前24 h在培养基中加入20 μg/ml内皮祖细胞源性外泌体。采用免疫荧光染色法鉴定内皮祖细胞，Western blot法、透射电镜、纳米颗粒追踪分析法鉴定外泌体。采用CCK-8法检测神经元活力，ELISA法测定MDA含量和SOD活性，TUNEL染色法检测神经元凋亡率，Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果培养细胞为内皮祖细胞，成功提取内皮祖细胞源性外泌体。与C组相比，OGD/R组和OGD/R+EXO组神经元活力降低，MDA含量升高，SOD活性降低，神经元凋亡率升高，Bax表达上调，Bcl-2表达下调，cleaved-caspase-3/caspase-3比值升高(P<0.05)；与OGD/R组相比，OGD/R+EXO组神经元活力升高，MDA含量降低，SOD活性升高，神经元凋亡率降低，Bax表达下调，Bcl-2表达上调，cleaved-caspase-3/caspase-3比值降低(P<0.05)。结论内皮祖细胞源性外泌体可减轻氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤，与抑制氧化应激和神经元凋亡有关。

简介：摘要目的探讨缺血性心脏病(IHD)患者经体外心脏震波治疗(CSWT)后心功能改善与基质细胞衍生因子1(SDF-1)表达、内皮祖细胞(EPCs)增殖的相关性，进而揭示CSWT改善IHD患者心功能的机制。方法前瞻性收集2018年4月至2019年12月在昆明医科大学第一附属医院诊治的IHD患者20例，行内科标准治疗及CSWT，1个月内完成9次CSWT。治疗前，采用超声心动图左室整体纵向应变(GLS)和单光子发射计算机断层扫描(SPECT)行99Tcm-甲氧基异丁基异腈心肌灌注显像(MPI)识别存活心肌，定位缺血节段；治疗中，实时心电、血压和血氧饱和度监测；并于治疗前、治疗后1和6个月，抽取外周静脉血检测SDF-1和EPCs。患者于治疗后1和6个月随访，内容包括GLS和MPI评价局部心肌收缩功能和血流灌注，记录纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级、加拿大心血管学会(CCS)心绞痛分级、西雅图心绞痛量表(SAQ)、明尼苏达心力衰竭生活质量量表(MLHFQ)评分、36条简明健康状况调查表(SF-36)评分、6 min步行距离(6MWD)和硝酸甘油用量，观察SDF-1、EPCs指标变化，分析患者心功能改善情况与SDF-1、EPCs的相关性。结果20例IHD患者共43个缺血治疗节段接受了9次CSWT，血流动力学稳定，无任何不良事件发生。与治疗前比较，治疗后1和6个月的NYHA心功能分级、CCS心绞痛分级、MLHFQ评分和硝酸酯类用量均降低，SAQ评分、SF-36评分和6MWD均提高(均为P<0.05)；治疗节段GLS绝对值增加，MPI局部灌注改善(均为P<0.05)；SDF-1和EPCs指标呈增高趋势(均为P<0.05)。相关分析显示，SDF-1(r＝-0.56，P＝0.00)和EPCs(r＝-0.26，P＝0.04)均与NYHA心功能分级呈负相关，SDF-1与EPCs无相关性(r＝0.06，P＝0.62)。结论CSWT通过促进IHD患者血管内皮细胞增生而提高心肌灌注、改善心功能，SDF-1与EPCs升高与心功能改善呈正相关。

简介：摘要目的探讨血细胞分析仪快速检测外周血造血干细胞/祖细胞（hematopoietic stem/progenitor cell，HPC）的临床应用价值。方法方法学验证和回顾性分析。收集2015年1月至2018年12月期间来福建医科大学附属协和医院就诊的4例为初治急性髓系白血病患者外周血、1名健康供者外周血干细胞采集物5倍稀释液，用于方法学验证；23例自体造血干细胞移植患者、22例异基因外周血造血干细胞移植健康供者的外周静脉血和外周血干细胞采集物5倍稀释液，用于一致性回顾分析。线性试验取已知CD34+细胞含量的外周血、血细胞分离机收集的外周血造血干细胞/祖细胞液各1份，做接近预期上限的高值样本（H），一份低值样本即生理盐水（L），倍比稀释，检测HPC，结果回归分析。一致性试验标本126份，EDTA-K2抗凝静脉血78份，外周血干细胞采集物48份。同时采集的静脉血，一管血常规和HPC检测，另一管流式细胞术（FCM）检测CD34+细胞。干细胞采集物用灭菌生理盐水5倍稀释后分两管，一管全血细胞计数和HPC计数，另一管FCM检测CD34+细胞。对两种仪器检测结果作比对分析及偏差评估。评价血细胞分析仪对外周血造血干细胞/祖细胞检测的本底计数、携带污染率、精密度、线性范围和与流式细胞术的一致性。结果本底计数结果为0×109个/L、携带污染率为0.1%符合血细胞分析仪质量要求，重现性不精密度是4.7%~18.8%，HPC线性范围是0~ 27.201×109个/L、采集液5倍稀释后线性范围是0~ 0.878×109个/L。血细胞分析仪与FCM分别检测126份样本的结果作比对分析，相关系数r2=0.960 1。当WBC>10×109个/L时，两种仪器检测结果具有良好的一致性，斜率位于0.95~1.05之间，医学决定水平处估计的预期偏差<30%。结论血细胞分析仪检测HPC与FCM比对，具有良好的相关性；当WBC>10×109个/L时，与FCM不仅具有较好的一致性，而且预期偏差符合临床要求；其检测HPC标本无需预处理。

简介：无

简介：摘要目的研究不同剂量电离辐射对小鼠造血干/祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells, HSPCs)内线粒体功能的影响。方法将48只C57BL/6小鼠按随机数表法分为对照组(0 Gy组)、全身60Co单次照射1.0 Gy组和4.5 Gy组，每组16只，照射后12、24 h检测HSPCs线粒体活性氧(ROS)水平、膜电位、线粒体数量及线粒体压力等。c-Kit+细胞体外接受60Co单次15 Gy照射，24 h后检测线粒体功能。结果建立小鼠造血系统辐射损伤模型，发现小鼠受不同剂量γ射线照射后24 h内外周血白细胞(t＝12.41、18.31、16.48、14.16、19.08、20.25，P<0.05)、红细胞(t＝4.81、6.62，P<0.05)及血小板(t＝4.33、6.68，P<0.05)均明显减少，骨髓细胞集落形成能力下降(t＝16.27、55.66、17.06、43.75，P<0.05)，HSPCs数量降低(t＝5.16、11.55，P<0.05)，且呈现时间和剂量相关效应；1 Gy照射后，HSPCs中ROS水平差异无统计学意义(P>0.05)，线粒体膜电位降低(t＝8.82、9.24，P<0.05)、线粒体数量减少，且在照射后24 h，HSPCs线粒体功能、线粒体基础代谢指数增强(t＝ 7.36、3.68、4.58、3.15、3.15，P<0.05)。4.5 Gy照射后可引起HSPCs中ROS上升(t＝4.63、4.12，P<0.05)，线粒体数量降低，线粒体膜电位降低(t＝12.29、10.46，P<0.05)，最大呼吸能力和呼吸储备能力降低(t＝ 7.81、5.78、6.70、5.83，P<0.05)，12 h基础呼吸和氧化磷酸化ATP产能低(t＝8.48、3.80，P<0.05)，24 h质子泄漏高(t＝6.57，P<0.05)，耦合效率低(t＝11.43，P<0.05)。c-Kit+细胞经15 Gy照射后24 h，ROS水平显著上升(t＝11.30，P<0.05)，线粒体膜电位降低(t＝34.92，P<0.05)，最大呼吸和呼吸储备能力提高(t＝4.25、3.44，P<0.05)。结论建立了HSPCs中系统评估线粒体功能方法，明确了电离辐射对HSPCs线粒体功能的影响，为深入揭示电离辐射致HSPCs线粒体损伤机制奠定基础。

简介：摘要目的应用3种不同方法分离兔耳软骨来源干/祖细胞(CSPCs)，对比3种方法的可靠性。方法2019年1月至2019年12月选取4个月龄健康日本大耳白兔(由中国医学科学院整形外科医院实验动物中心提供)取耳软骨，酶消化法得到软骨细胞，简单随机分为以下4组，纤维连接蛋白黏附＋低密度筛选法(FN＋LD组)，单纯纤连蛋白黏附法(FN组)，低密度筛选法(LD组)，未经筛选的软骨细胞(CC组)。利用流式细胞术检测间充质干细胞标志物CD44和CD90的表达，比较细胞自我更新和多向分化能力的差异。两样本组间比较应用t检验，多组间比较采用方差分析。结果3种筛选方法获得的CSPCs均高表达CD44和CD90；FN＋LD组与FN组CD44表达率均高于LD组[(98.13±0.25)%比(95.40±0.43)%，t＝3.521，P<0.01；(97.77±1.33)%比(95.40±0.43)%，t＝4.148，P<0.05]；FN＋LD组CD90表达高于LD组[(95.47±0.66)%比(92.07±1.20)%，t＝9.087，P<0.01]，差异均有统计学意义。与CC组比较，FN＋LD、FN、LD组克隆形成率升高[(15.80±2.68)%比(4.80±0.75)%，t＝8.751，P<0.01；(20.80±1.64)%比(4.80±0.75)%，t＝19.400，P<0.01；(8.40±2.61)%比(4.80±0.75)%，t＝2.939，P<0.05]；FN＋LD组克隆形成率高于LD组[(15.80±2.68)%比(8.40±2.61)%，t＝4.422，P<0.01]，低于FN组[(15.80±2.68)%比(20.80±1.64)%，t＝3.553，P<0.01]，差异均有统计学意义。成骨与成脂能力FN＋LD、FN、LD组均显著高于CC组(66.84±1.72比59.42±2.20，t＝5.939，P<0.01；69.46±1.95比59.42±2.20，t＝7.630，P<0.01；63.34±1.44比59.42±2.20，t＝3.330，P<0.01与26.34±0.57比13.40±0.84，t＝26.080，P<0.01；26.41±1.12比13.40±0.84，t＝20.820，P<0.01；26.58±0.76比13.40±0.84，t＝26.080，P<0.01)，差异均有统计学意义；FN＋LD组成骨能力高于LD组(66.84±1.72比63.34±1.44，t＝3.493，P<0.01)，低于FN组(66.84±1.72比69.46±1.95，t＝2.257，P<0.05)，差异有统计学意义；3组间成脂能力差异无统计学意义(26.34±0.57比26.41±1.12比26.58±0.76，F＝0.107，P>0.05)。结论纤维连接蛋白黏附＋低密度筛选法、单纯纤连蛋白黏附法和低密度筛选法均能获得CSPCs，其表面标记、自我更新和分化能力差异与筛选方法有关。

简介：无