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25 个结果
  • 简介:以pBRTM/HCV-3011模板,通过PCR法扩增ns5a、LISDR(左端序列)和RISDR(右端序列),分别经XhoⅠ/EcoRⅠ、XhoⅠ/HindⅢ和EcoRⅠ/HindⅢ双酶切,连入穿梭质粒pEGFP-N3中,构建重组质粒pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR.对重组质粒进行酶切分析和序列测定.将这2种重组质粒通过电穿孔法转染HeLa细胞,然后在G418选择压力下进行有限稀释法筛选,用RT-PCR和荧光显微镜鉴定.经酶切鉴定和基因测序证实,重组穿梭质粒已插入目的片段ns5a、LISDR和RISDR.RT-PCR和荧光显微镜检测到目的基因的表达.以上结果说明成功构建了真核表达载体pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR,目的基因在HeLa细胞中得到表达,为研究HCVNS5A中是否存在抗干扰素治疗的功能蛋白提供了实验材料.

  • 标签: 丙型肝炎病毒 干扰素敏感决定区 HELA细胞系 增强型绿色荧光蛋白 丙型肝炎 真核表达载体
  • 简介:在新一期美国《科学》杂志对“2008年值得关注的科研热点”的预测中,生命科学就占了5个席位,可以预见,2008年将又是一个生命科学研究热点年。

  • 标签: 生命科学 科学研究 《科学》杂志
  • 简介:比较HitrapG蛋白Sepharose亲和色谱系统对不同动物血清或腹水的纯化效果,为抗体纯化提供依据。结果显示,G蛋白对不同动物血清IgG吸附能力不同,体现在单位体积抗体回收量明显不同,这一特点与A蛋白亲和色谱系统相似。该方法简便快速,纯化抗体纯度高,免疫活性好,色谱柱可反复使用多次

  • 标签: G蛋白 A蛋白 亲和色谱法 抗体
  • 简介:油茶被划归成木本油料特有的类别,培植的区段很广。油茶树提炼得来的油料,固有的营养属性最优。发展各地段内的油茶产业,能促动整体范畴内的林业进展,促动林业特有的经济延展。为此,有必要明辨油茶生产的注重事宜,摸索最优的产出路径。

  • 标签: 油茶生产 林业产业 发展途径
  • 简介:瑞典是诺贝尔的故乡,瑞典的生命科学研究享有优良产业及科学传统.在生物技术领域.瑞典已发展成为欧洲最具实力的国家之一。近年来瑞典成了国际瞩目的创新者.是世界上人均拥有发明专利和专利申请最多的国家之一。瑞典创新指数和知识经济的全球排名均列第一。瑞典在生物制药.信息技术、环保与节能等方面具备雄厚的科研实力.拥有卡罗琳斯卡医学院.斯德哥尔摩大学.哥得堡大学.乌普萨拉大学等10多所世界一流大学。

  • 标签: 生物技术领域 产业现状 瑞典 世界一流大学 斯德哥尔摩 科学传统
  • 简介:目的:采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻和重基因进行扩增,对获得的基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻和重可变区基因的通用方法。方法:设计22对扩增鼠Igκ轻可变区和重可变区基因的引物,对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻和重可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布的鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程的假基因,并且得到的单克隆抗体的氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻和重可变区基因的通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体的可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体的结合位点提供了实验数据。

  • 标签: 甲型H1N1流感病毒 单克隆抗体 可变区 巢式PCR 序列分析
  • 简介:2007年底,Burrill公司对2008年美国生物技术产业做了预测。作为投资者消化年末收益和第一季度的结果,尤其是整个美国市场对次级贷款危机及其对经济影响的担忧,2008年的上半年,美国的资本市场仍将是动荡的。但在这一年里,生物技术优秀企业将继续获得令人难忘的金融收益,而中型和小型的生物技术公司也将紧随其后。到2008年末,

  • 标签: 生物技术产业 美国市场 预测 生物技术公司 资本市场 投资者
  • 简介:产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人源化及最相似人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体单Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。

  • 标签: 单克隆抗体 人源化 表面再塑 分子设计
  • 简介:7月23日上午,在武汉东湖高新技术产业开发区召开的生物产业发展规划及评审会上,该区管委会副主任夏士杰表示:东湖高新区作为武汉国家生物产业基地的核心区,要在基地建设及未来生物产业发展中发挥领头作用,有前瞻性、高标准地做好规划,抢占生物产业制高点。

  • 标签: 生物产业 武汉东湖 产业基地 产业发展规划 高新技术产业开发区 评审会
  • 简介:即时检测(POCT)是临床诊断领域的新分支,与传统检测方法相比,具有操作简便,标本量小,快速得到结果等优势.我国糖尿病、心血管疾病等慢性病的患者基数大,国民自我保健意识正在不断增强,因此未来POCT市场的需求相当可观.但是由于我国POCT产业起步较晚,技术相对落后,相关法律制度不够健全,想要在国内乃至全球POCT市场占有一席之地,仍有许多问题亟待解决.

  • 标签: POCT 即时检测 社区卫生机构 家庭化检测
  • 简介:应用Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统,从经过人交联纤维蛋白特异抗原D二聚体(DD)免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合单抗体(ScFv)cDNA文库。文库cDNA克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到2.5×105个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用DD对表达的重组噬菌体单抗体文库进行三轮亲和富集获得一株特异抗DD的噬菌体单抗体(ScFvA11)。经Phage-ELISA鉴定,呈现在噬菌体表面的ScFvA11与DD结合的ELISA阳性滴度小于107tfu/ml,而与人纤维蛋白原结合的ELISA滴度大于1010tfu/ml,两者相差1000倍以上。表明ScFvA11具有较好的DD结合特异性。经序列分析,ScFvA11cDNA全长729bp,其中Vh基因354bp,编码118个氨基酸;Vl基因327bp,编码108个氨基酸;Vh与Vl之间为(Gly4Ser)315个氨基酸连接肽。

  • 标签: 单链抗体 噬菌体抗体库 纤维蛋白 D二聚体
  • 简介:目的:本实验室通过转座突变技术获得了一株高产表面活性物质的芽孢杆菌dhs-330-021,研究其对状亚历山大藻的抑制效果,及其溶藻作用方式。方法:在状亚历山大藻的培养液中添加dhs-330-021的发酵液等,间隔一定时间计数获得藻细胞的数量。结果:菌株dhs-330—021培养后期的发酵液溶藻效果好于培养前期和中期;在一定浓度范围内,dhs-330-021的发酵液对不同生长期的状亚历山大藻均有溶藻效果,其中对延滞期和稳定期效果最好;菌株的发酵液和无菌上清液的溶藻效果明显,而菌悬液溶藻效果较差。结论:菌株dhs-330-021能显著抑制状亚历山大藻的生长,其溶藻方式属于间接溶藻。

  • 标签: 链状亚历山大藻 芽孢杆菌 溶藻机理 表面活性剂
  • 简介:目的:研究柔红霉素产生菌天蓝淡红霉菌SIPI-1482中酮还原酶基因dnrU阻断后的产物(13s)-13-二氢柔红霉素及其他发酵产物的变化。方法:利用同源重组的原理,以大肠杆菌质粒pUC18为基础构建了dnrU基因交换质粒,通过在SIPI-1482染色体上的dnrU基因中插入安普霉素抗性基因来筛选dnrU的阻断突变株。结果和结论:PCR验证表明成功地阻断了dnrU基因。dnrU基因敲除后,重组菌发酵产物中(13s)-13-二氢柔红霉素消失,而其他发酵中间产物也有一定变化。

  • 标签: 天蓝淡红链霉菌 DnrU酮还原酶 同源重组 (13s)-13-二氢柔红霉素
  • 简介:用Biosym公司开发的计算机辅助分子设计系统模建了鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的三维结构。Fv是由重可变区(Vh)和轻可变区(Vl)两个结构域组成的具有抗原结合能力的最小抗体片断。先分别模建了Vh和Vl两个结构域,然后搭建出Fv片断的整体三维结构,并对模建的结构进行了分子力学和动力学优化。对结构的合理性验证显示模建结构是合理的。本研究为鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的人源化的分子设计打下了基础。

  • 标签: 计算机辅助分子设计 同源模建 抗体Fv片断
  • 简介:随着科技的迅猛发展,工业生产对机器设备零件的要求越来越高,零件的形状、构造、组合形式等也越来越复杂,对零件的精确度也提出越来越高的要求。然而,日益激烈的市场竞争促使研制、生产产品的周期也大大缩短,传统的制造工艺和技术已难以甚至无法适应产品的复杂化、多样化等特点。因此,笔者在本文中通过对我国当前数控技术与产业的现状进行分析,进而为数控技术与产业的发展提出相应的对策和建议。

  • 标签: 数控技术 数控产业 现状 发展
  • 简介:目的:建立一种灵敏、特异、快速的ELISA方法,用于猕猴血清中抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体的检测。方法:采用双抗夹心ELlSA法,用猴血清吸附的羊抗入IgG包被于96孔酶标板,加入待测样品,用HRP标记的猴血清吸附的羊抗人IgG进行检测,加底物显色,读取D450值。结果:建立了检测抗DR5单克隆抗体的ELISA方法并进行了确证,方法的线性范围为12.5-800ng/mL,定量下限为12.5ng/mL,板内和板间精密度均小于15%,准确度为-4-15%,冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立的抗DR5单克隆抗体检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于抗DR5单克隆抗体的检测。

  • 标签: 死亡受体5 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验法 药代动力学
  • 简介:特色产业对县城经济发展起着至关重要的作用.但是目前我国部分县城特色产业的发展受到许多因素的制约,导致发展现状并不理想.本文主要对永善县特色产业发展的制约因素进行分析,并提出相应的解决对策.

  • 标签: 特色产业 制约因素 对策
  • 简介:目的:探究胃炎康方5号联合西医治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法:选取在我院接受治疗的慢性萎缩性胃炎患者94例,分为对照组和实验组,对照组患者采用常规的胃三联治疗方法,实验组患者在对照组患者的治疗方法之上再加上胃炎康方5号治疗,观察分析和对比两组患者的治疗效果以及Hp根除率(幽门螺旋杆菌根除率)。结果:对照组患者治疗的总有效率为46.81%,Hp根除率为82.98%,实验组患者治疗的总有效率为80.85%,根除率为93.62%,两组结果相比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:胃炎康方5号联合西药治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效显著,值得临床推广。

  • 标签: 胃炎康方5号 慢性萎缩性胃炎 胃三联法