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  • 简介:目的了解鲫成体透明原因,探讨该性状应用特性,为透明鲫作为水生实验动物材料系统开发提供基础。方法对透明鲫进行繁殖,并观察其后代性状,了解透明性状遗传规律;体视镜观察透明鲫色素细胞种类分布,并与鲫比较;组织切片和压片确认微孢子虫对透明鲫感染,并观察感染症状变化。结果鲫透明性状可以遗传,大部分后代表现为通体透明,心、肝、肾、肠、鳔、鳃、脊椎等组织器官肉眼清晰可见。正常鲫比较,透明鲫主要色素细胞为黄色素细胞,并未发现虹彩色素细胞,黑色素细胞数量也大为减少。微孢子虫对鱼体感染过程可直观观察,病原扩散和空间分布能实时获得,具普通鱼类无法比拟应用优势。结论虹彩色素细胞缺失鲫透明突变结构基础。由于透明鲫内部器官可直接观测,无需依靠解剖或复杂仪器系统,同一动物身上可能获得系列动态试验数据,或可作为模型材料广泛应用于生命科学不同领域。

  • 标签: 透明鲫 虹彩色素细胞 感染 水生动物模型
  • 简介:模态融合分子影像技术整合了多种分子影像技术优势,已成为当前分子影像领域研究热点和发展趋势。新近报道七甲川菁(heptamethinecyanine)染料类具有肿瘤靶向性近红外荧光(near-infraredfluorescence,NIRF)制剂。该染料独特光学特征使其肿瘤分子影像、靶向治疗和药物传递系统方面具有广阔应用前景。纳米材料包裹该类染料可用于NIRF/MRI双模成像,标记核素后可实现NIRF/PET双模成像,共轭结合化疗药物后,可实现抗肿瘤药物靶向传递,多个七甲川菁染料复合物已被用作多模态成像,成为光热、光动力学和组合治疗肿瘤新策略。

  • 标签: 近红外荧光 多模态成像 肿瘤模型 分子影像
  • 简介:囊卵巢综合征(PCOS)涉及系统生殖、代谢障碍疾病,临床表现有高雄激素血症、排卵障碍、高胰岛素血症和高LH血症以及肥胖、不孕等,卵巢呈囊样改变。因其病因病理复杂,生化改变、临床表现多样,为临床研究带来定困难。因此,利用动物模型进行相关研究显得尤为必要。近年来所采用PCOS动物模型造模方法主要有雄激素造模法、胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素造模法、雌激素造模法、孕激素联合人绒毛膜促性腺激素造模法和芳香化酶抑制剂造模法等。本文对上述造模方法及相关研究进展进行了综述,并探讨了中药、针灸对模型动物干预作用。

  • 标签: 多囊卵巢综合征 动物模型 中医药干预
  • 简介:目的通过剑尾鱼属内鱼类杂交,观察黑色素瘤在其杂交后代形成情况.方法白体剑尾鱼(♀)黑体剑尾鱼(♂)杂交,子代(F1)和子二代(F2)分别自交,观察其后代外部特征变化和黑色素瘤形成情况;对黑色素瘤进行组织病理观察.结果剑尾鱼杂交种F2代开始出现性状分离,F3中有较高黑色素瘤发生率,为20.5%.HE染色和Lillie黑色素染色证实增生组织为黑色素瘤.结论通过不同剑尾鱼杂交和自交,后代有黑色素瘤形成,可望进行黑色素瘤模型构建.

  • 标签: 剑尾鱼 杂交种 黑色素瘤 组织病理学 形成 动物模型
  • 简介:目的观察猴免疫缺陷病毒(SIV)感染后,病毒特异性免疫复合物(IC)不同时间、不同组织沉着情况,初步研究其AIDS系统病变联系.方法对8只不同时间感染SIV恒河猴及1只未感染SIV猴进行尸检以获取系统组织标本,进行连续切片和IgG、C3、SIVp27免疫荧光染色,并对结果进行比较分析.结果IgG、C3、p27多个猴、多种组织相同位置出现相同模式荧光表达,证明存在IC沉着;其中脑血管周(8/8),心肌间微血管(6/8)、和淋巴结副皮质(6/8)及生发中心(5/8)阳性率最高部位,肾小球及肾间质、肠黏膜固有层也有较多IC沉着,且感染中、晚期IC出现比例更高.结论SIV感染后出现广泛SIV-IC沉积,且随病情进展而加重;IC可能SIV导致AIDS系统病变主要形式.针对此过程进行研究,可帮助了解AIDS并发系统器官病变机制及研究新治疗方法.

  • 标签: SIV 免疫复合物 淋巴结 神经系统自身免疫疾病
  • 简介:目的探索小鼠基因组39微卫星PCR条件,评价微卫星小鼠遗传检测中运用.方法采用梯度法探索39微卫星PCR条件;选择本中心不同来源及引种时间C57BL/6、BALB/c、DBA/2J、CBA/N、FVB/NJ、ICR共6品系(8组)小鼠,每组采用10只个体鼠尾,提取DNA并混合成DNA池,用39微卫星扩增后电泳观察、比较种系纯度.结果小鼠微卫星PCR条件差异较大,Mg2+浓度多数1.5mmol/L左右,退火温度多数59℃左右.6品系小鼠39微卫星位点中,C57BL/6、BALB/c、DBA/2J都是纯合;其余品系有1~3杂合位点.BALB/cD5Mitl68、D8Mit320、D13Mit262三位点,DBA/2JD14Mit205位点数据库记录有差异.结论本研究为小鼠39微卫星提供了候选PCR条件,并对6品系小鼠微卫星概貌及微卫星运用价值进行了探讨.

  • 标签: 小鼠 微卫星 检测 PCR条件
  • 简介:目的应用植入式生理信号遥测系统和全身体积描记法肺功能检测技术系统,观察清醒大鼠昼夜节律变化,并用索茶碱进行性能验证,为今后该技术系统用于药物安全药理学评价提供依据。方法SD大鼠8只,雌雄各半,采用外科术将植入子植入大鼠腹腔建立遥测系统,并结合肺功能检测技术,术后14d观察清醒大鼠24h生理参数及昼夜节律变化,包括心率(HR)、血压、心电图Q波到血压舒张点时间差(QA间期)、呼吸、活动、体温和肺功能等指标,分为正常对照组、索茶碱40和80mg/kg组(雾化吸入),观察给药后上述参数变化情况。结果术后14d清醒大鼠生理指标具有明显昼夜节律变化。正常对照组比较,索茶碱40mg/kg组大鼠HR、潮气量(TV)、每分钟通气量(MV)、50%呼气流量(EF50)、吸气流量峰值(PIF)和呼吸流量峰值(PEF)均明显增加(P〈0.01),呼吸频率、QA间期和增强呼气间歇(PENH)均明显降低(P〈0.05,P〈0.01),但对血压、活动和体温变化不明显;索茶碱80mg/kg组大鼠HR、血压、TV、MV、EF50、PIF和PEF均明显增加(P〈0.01),呼吸频率、QA间期和PENH均明显降低(P〈0.01),但对活动和体温变化不明显。结论本技术系统对大鼠生理昼夜节律无明显影响,并可灵敏监测到心血管呼吸系统相关变化,可用于清醒大鼠心血管呼吸系统安全药理学研究。

  • 标签: 遥测系统 肺功能 清醒大鼠 安全药理学 多索茶碱
  • 简介:目的:筛选豚鼠基因组多态性微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析和初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增,以期获得多态性分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304,设计引物125对,最终获得多态性位点1,暂未发现多态性特异性位点17;用数据库筛选法共获得微卫星序列292,设计并合成相应引物178对,最终发现多态性位点25,暂未发现多态性特异性位点28。结论本实验获得26多态性微卫星标记,45潜在候选标记,为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作应用奠定了基础。

  • 标签: 豚鼠 微卫星 多态性标记 筛选
  • 简介:目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强病毒株,将新合成SHIV-XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力.方法实验前采集猴血清并进行血清学检查和PCR检测.选出13只无SIV,STLV-1,SRV/D和B病毒感染猴.第批实验,将SHIV前病毒DNA质粒经肌肉注射到猴体内,每只500μg;SHIV病毒液,经静脉注射到猴体内,每只2ml.病毒质粒和病毒液各接种2只猴.当第批猴体检出病毒后,10ml感染猴全血,抗凝后静脉注射到第二批猴体内,当第二批猴检出病毒后再将10ml感染猴全血静脉注射到第三批猴体内,连续传代4次.每批实验均定期采集血液标本,分别用肝素和EDTA抗凝,进行病毒分离;病毒基因PCR检测;CD4,CD8测定;病毒抗体检测.结果SHIV-XJ02170病毒和SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒猴体内传代中均能分离出病毒;从传代猴血浆和外周血单核细胞(PBMC)中检出了病毒DNA和RNA基因;CD4,CD8测定结果显示有暂时性倒置现象,后变为正常倒置正常交替出现;传代猴血清中检测出特异性HIV病毒抗体.结论SHIV-XJ02170病毒SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒,均能在恒河猴体内复制.

  • 标签: 体内 复制 病毒DNA 外周血单核细胞 PCR检测 静脉注射
  • 简介:目的鉴于目前对斑马鱼视锥细胞视蛋白运输机制并不明确,且缺乏相应抗体,本实验拟构建种可以视锥细胞中特异表达荧光转基因斑马鱼.方法利用编码紫外敏感型视蛋白基因(sws1)启动子,构建了紫外敏感型视锥细胞中特异表达红色荧光蛋白tdTomato转基因斑马鱼.同时,将tdTomato荧光蛋白非洲爪蟾rhodopsin蛋白末端44氨基酸相融合,将该融合蛋白定位于紫外敏感型视锥细胞外节段,进而可模拟内源性视蛋白定位.结果共筛选出三种不同品系转基因斑马鱼,经过免疫组化分析,确定其中种转基因品系正确目标品系.结论该转基因斑马鱼构建将会为进步研究视锥细胞中视蛋白运输机制提供帮助.

  • 标签: 斑马鱼 视锥细胞 紫外敏感型 SWS1 转基因 sws1
  • 简介:目的从DNA水平分析比较两地区东方田鼠分子遗传特征,探讨以RAPD标记鉴别两地区东方田鼠。方法筛选6条10bp随机引物对洞庭湖和青铜峡地区东方田鼠基因组进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析,并对这两地区东方田鼠基因组DNA进行了比较。结果①两地区东方田鼠所有受试个体中共有的片段数为20条,这是两地区东方田鼠共性所在;②两地区东方田鼠各有其特异性扩增片段;③引物S17和S80可作为鉴别两地区东方田鼠特异性引物;④不同地区东方田鼠其不同个体之间共享度较低,且存在较大差异;两地区东方田鼠遗传背景均呈非均性。结论运用RAPD方法可以作为鉴别不同地区东方田鼠基因多态性标记。

  • 标签: 东方田鼠 鉴别 地区 基因多态性 基因组 特异性引物
  • 简介:为了研究禽流感H5N1病毒各个器官增殖和病理变化,在生物安全实验室,我们将禽流感H5N1病毒通过尾静脉接种BALB/C小鼠。结果小鼠不经过适应情况下,直接感染发病,甚至死亡。观察7天内,感染小鼠临床症状主要表现呼吸急促,体温、体重下降。尸检表现肺出血,心外膜坏死以及肝脏坏死。组织病理检查表现心、肝、肺等器官病变。肺病变伴有纤维化弥漫性肺泡损伤;心肌外膜大量淋巴细胞浸润、坏死;肝细胞大量坏死,淋巴细胞浸润。心、肝坏死病变在H5N1禽流感病毒相关研究中未见报道。经过对各个组织器官病毒载量检测,未发现病毒各个病变组织中复制。免疫组化检测,各个组织中也未检出阳性细胞反应。因此,我们认为H5N1禽流感病毒感染小鼠引起多个器官组织损伤,甚至死亡,不是病毒器官复制,而可能病毒感染小鼠,产生炎症细胞因子高度表达,损伤多个器官组织所致。

  • 标签: 禽流感H5N1病毒 BALB/C小鼠 尾静脉接种 多器官病变
  • 简介:目的观察D-半乳糖(D-gal)致亚急性衰老大鼠尿液排泄方面的特点并探讨其多尿症状机制。方法初筛合格SD大鼠颈背部皮下注射浓度为5%D-gal生理盐水溶液125mg/(kg·d)连续8周。观察动物造模期间和停止造模后两周内24h总尿量及水负荷后排尿情况变化;通过测定模型动物尿中K^+、Na^+、CL^-浓度,血中ALD、ADH、ANP浓度及肾脏病理形态学观察,探讨模型动物24h总尿量增加机制。结果与正常对照组相比较,模型组动物24h总尿量明显增加;水负荷后6h内排尿潜伏期明显缩短,排尿次数明显增多,但总尿量没有明显差异;模型动物尿中Na^+、CL^-浓度明显升高,K+浓度明显降低;血浆ALD、ADH含量显著降低,ANP含量显著增加,肾脏出现系列硬化特征。结论D-gal致亚急性衰老大鼠出现总尿量增加和排尿次数增多情况可能与其ADH、ALD、ANP合成分泌异常及肾脏病理形态学改变有关。

  • 标签: D-gal致亚急性衰老大鼠 多尿 机制
  • 简介:目的比较了不同遗传背景小鼠对禽流感H5N1亚型病毒致病敏感性,为H5N1禽流感模型制作和机理研究提供依据。方法近交系BALB/c、C57BL/6和封闭群ICR、NIHSwiss和KMSwiss共五不同品系小鼠。每个品系实验动物30只,分接毒组20只,空白对照组10只,每组雌雄各半。病毒株为A/Goose/Guangdong/NH/2003(H5N1),经测定TCID50为10-4.875/mL。接毒组通过鼻腔接种0.1mL病毒液,对照组接种正常鸡胚尿囊液。小鼠接毒后连续观察14d,观察记录临床症状、体温、体重变化,对实验期间死亡和实验14d结束后仍然存活小鼠均进行组织器官病理取材,进行RT-PCR病毒分离检测、HE染色及H5N1抗原特异性免疫组化染色。结果①临床症状:H5N1禽流感病毒能感染五品系小鼠,引起呼吸急促等症状和过性体重、体温下降。②死亡情况:小鼠接毒后第1天即出现死亡,死亡高峰期集中接毒后第3~6天。五品系小鼠死亡率存在差异,BALB/c为70%,ICR为50%,NIHSwiss为40%,C57BL/6为25%,KMSwiss为10%;③病毒分离:各组接毒小鼠死亡后均进行了病毒分离,死亡小鼠肺脏均分离到病毒,其他脏器未分离到病毒。④病理变化:实验期间五品系死亡小鼠肺脏病理改变相近。大体观:死亡小鼠肺部淤血,呈暗红色,体积增大,局部肺组织实变。镜下观:死亡小鼠共同病理改变为间质性肺炎,具体表现为肺泡腔及间质出血、炎性细胞浸润;间质增生,肺泡隔增宽;肺泡腔中见纤维素性渗出,透明膜形成。⑤免疫组化结果:死亡小鼠气管上皮细胞和肺巨噬细胞可观察到H5N1禽流感病毒阳性表达。结论小鼠作为H5N1禽流感病毒模型具有普适性,不同品系小鼠感染鹅源H5N1禽流感病毒临床症状、病程和病理变化与人禽流感病例相似。不同品系小鼠死亡比例有明显差别,可以根据不同实验目的,选择不同品系小鼠制作H

  • 标签: H5N1禽流感病毒 动物模型 小鼠
  • 简介:目的比较Zmu-1:DHPDHP两品系豚鼠眼球相关生物学特性,并初步探索Zmu-1:DHP豚鼠自发性近视产生视网膜相关机制。方法通过对Zmu-1:DHP近交系豚鼠和DHP豚鼠屈光度、角膜曲率眼轴长度测定,进行两品系眼球相关生物学特性比较,并对筛选出自发性近视Zmu-1:DHP豚鼠和DHP豚鼠进行视网膜组织结构观察和视网膜信号因子mRNA表达测定。结果3周龄时,Zmu-1:DHP豚鼠近视率90.21%,DHP豚鼠近视率18.00%;4~12周,随周龄增长,Zmu-1:DHP豚鼠左右眼近视度数眼轴长度大于DHP豚鼠,角膜曲率小于DHP豚鼠,两者比较差异有显著性(P<0.01)。视网膜组织结构观察显示,Zmu-1:DHP豚鼠较DHP豚鼠视网膜外核层薄,细胞体积小,分布数目少,脉络膜萎缩变薄,色素上皮细胞层未见明显色素颗粒,而DHP豚鼠色素上皮细胞层内分布有大量棕黄色色素颗粒。PCR结果显示,Zmu-1:DHP豚鼠酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase,TH)表达降低(P<0.01),酪氨酸激酶(tyrosinekinases,TK)表达增强(P<0.01),诱导型NO合成酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)、神经型NO合成酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastcellgrowthfactor,bFGF)和转化生长因子β(transforminggrowthfactorβ,TGFβ)表达增强(P<0.05),视黄醛脱氢酶(retinaldehydrogenase,RALDH)和醛脱氢酶(aldehydedehydrogenase,ALDH)虽然表达增强,但差异无显著性。结论Zmu-1:DHP豚鼠自发性近视高发,为轴性近视,其分子机制视网膜近视信号因子调控有关。

  • 标签: 豚鼠 屈光度 视网膜 近视因子
  • 简介:目的对中国实验小型猪中内源性反转录病毒存在mRNA表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒携带情况.方法根据已发表PERV序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)存在表达;同时,根据目前通用env基因分型方法合成了三对用于分型检测引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞DNA和RNA样品进行了检测.结果在6被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA表达,且所表达PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA形式表达,这结果为我国特有小型猪开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.

  • 标签: 内源性逆转录病毒 中国实验小型猪 聚合酶链反应
  • 简介:目的研究PCOS易感基因Hmga2子宫内膜容受性和蜕膜化中表达调节。方法通过早期妊娠、延期着床激活、人工蜕膜化、卵巢类固醇激素处理等实验,利用qPCR、Westernblot技术,阐述Hmga2子宫内膜容受性中作用。结果Hmga2随着妊娠表达量逐渐增加,着床点非着床点相比表达量显著升高,胚胎激活组比延迟着床表达量显著增高,人工诱导蜕膜化非蜕膜化比较表达显著升高,Hmga2表达雌激素和孕激素呈正相关,体内受雌孕激素调节。结论表明Hmga2表达小鼠早期妊娠胚胎着床过程密切相关,参与子宫内膜蜕膜化过程,受活化胚泡和类固醇激素影响。

  • 标签: 多囊卵巢综合征 高迁移率族蛋白A2 蜕膜化 胚胎 小鼠
  • 简介:目的:开发种新培养人胚胎干细胞(hESCs)包被基质,使hESCs培养更加简便。方法用甲醇固定小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作为包被基质,人胚胎干细胞系X-01该基质上生长,每隔5~6d传代次,培养10代后,对人胚胎干细胞特性进行检测,包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因表达和分化能力。结果hESCs基质上生长良好,经10次传代后仍能保持典型hESCs克隆形态。碱性磷酸酶染色阳性,免疫荧光染色Oct4、SSEA4、Tra-1-60为阳性,体外分化可形成拟胚体。结论此种固定基质可以大量制备,长期保存,并可以长期维持hESCs未分化状态,为人胚胎干细胞体外扩增探索出了途径。

  • 标签: 人胚胎干细胞 小鼠胚胎成纤维细胞 甲醇固定 基质 MEF蛋白质复合物
  • 简介:目的建立人结肠癌药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌药耐受性动物模型,利用VCR和CTX肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-timePCR和West-ernblotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因和蛋白表达。结果肿瘤抑制实验结果显示,MDR和敏感型结肠癌模型肿瘤生长速度差异不显著,MDR结肠癌动物模型对于VCR和CTX耐药性均有较大程度提高;表达分析结果显示,人结肠癌MDR动物模型P-gp/MDR1表达水平有较大提高,而MRP1表达没有显著变化。结论人结肠癌药耐受性动物模型具有较好的多药耐受性,其药耐受性表型主要是由于P-gp/MDR1过量表达所导致。

  • 标签: 结肠癌动物模型 多药耐药性 长春新碱
  • 简介:步法体外扩增结合Southem杂交检测M53鼠肺支原体标准株,设计对特异寡核苷酸引物及探针,合成、纯化、建立了特异、敏感、快速检测手段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示鼠肺支原体M53株基因组DNA710bp特异谱带。对50只SD大鼠进行检测,结果PCR方法检出率高于分离培养法,扩增产物行Southemblot杂交验证,采用碱性磷酸酶标记寡核苷酸探针,可膜上特异靶DNA序列杂交,而阴性对照无杂交信号。特异性实验检出10pgDNA。充分说明步法PEN,具有高度、特异、灵敏、快速等优势,适应与大、小鼠监测中应用。

  • 标签: 支原体 鼠肺 SD大鼠 检出率 体外扩增 分离培养法