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  • 简介:近年来,系列重要医学致病真菌全基因数据陆续被公布,使人类对这些致病菌认识提高到全新水平。本文在回溯医学真菌基因学和基因测序技术发展历程、综述其发展现状及应用基础,再分别介绍重要医学真菌全基因测序进展。

  • 标签: 真菌 全基因组测序 念珠菌 隐球菌 曲霉 青霉
  • 简介:目的DNA是进行分子生物学研究重要基础。在本研究中,我们建立了2种简单快速抽提基因DNA方法并可用作PCR扩增模板。通过比较4种不同DNA抽提方法以确定哪种更适合进行下基因分析。方法这4种方法是:玻璃珠法,酶法,3%SDS法和氯化苄法。玻璃珠法是用玻璃珠在混漩器剧烈振荡破碎细胞壁;3%SDS法是将细胞在含10mmol/LDTT3%SDS溶液中加热,然后用5mmol/LKAc和异丙醇抽提,DNA产量通过A260测定。结果3%SDS溶解法、经典酶法、玻璃珠法和氯化苄法DNA产量分别为0.4154±0.0367、0.8484±0.0756、1.2636±0.2040、0.4070±0.0339(g/L×10^8CFU/mL)。结论玻璃珠法是最敏感、重复性好、简单、费用合理抽提方法。

  • 标签: 新生隐球菌 DNA抽提 方法
  • 简介:目的制备并鉴定抗曲霉不同抗原单克隆抗体。方法采用烟曲霉细胞壁抗原成分、分泌抗原和灭活分生孢子,分别免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,免疫荧光法鉴定单克隆抗体与曲霉属和念珠菌属抗原交叉反应。结果获得29株稳定分泌抗曲霉单抗杂交瘤细胞株,其中用烟曲霉细胞壁抗原成分免疫获得11株,用分泌抗原免疫获得13株,用孢子免疫获得5株;Ig亚类鉴定,11个克隆株IgG1亚类,3个克隆株IgG3,15个克隆株IgM。免疫荧光法鉴定29株单抗特异性识别烟曲霉细胞壁抗原,与其他曲霉抗原有交叉反应。结论29株单克隆抗体,对于建立侵袭性曲霉感染早期诊断方法、筛选曲霉保护性抗体以及研究抗体保护机制奠定了实验基础

  • 标签: 曲霉抗原 单克隆抗体 交叉反应
  • 简介:目的应用转录技术,对UVA照射后白念珠菌菌丝及生物膜进行基因表达分析.方法体外构建白念珠菌(ATCC90028)生物膜,采用UVA-LED抗菌设备(复旦大学光电所制,波长365nm,强度13mW/cm2,频率100Hz),照射白念珠菌生物膜5min、10min、15min,对照不光照.用转录技术分析UVA实验对照之间差异表达基因,进行GO、KEGG遗传差异富集分析.结果UVA光照相对于对照有大量差异表达基因,核糖体合成RIO2基因、氨基糖和核苷糖代谢相关基因MCR1、CBR1、内质网蛋白加工途径相关基因SHP1显著上调;RNA降解途径相关基因MPP6和细胞内吞作用相关基因CHMP6显著下调.结论UVA直接或间接调节白念珠菌菌丝及生物膜相关生理代谢途径,参与诱发细胞凋亡过程.

  • 标签: 白念珠菌 UVA RNA-seq测序 差异表达基因
  • 简介:LBD基因家族是植物所特有的类转录因子,在植物生长发育过程中起到非常重要作用。本研究利用生物信息学方法,从萝卜基因中鉴定出分布于9条染色体59个LBD基因。该家族成员结构比较简单,内含子数均不超过3个。萝卜LBD基因可分为大类,分别包含50个和9个成员。它们在染色体分布不均匀,1号染色体基因数目最多,有18个,而7号和8号染色体分别仅有1个LBD基因。对它们在不同组织和发育时期表达模式研究发现,该基因家族具有时空表达特异性,预测其参与萝卜不同发育过程。本研究萝卜LBD基因家族功能分析奠定了基础

  • 标签: 萝卜 LBD基因家族 系统进化 基因表达
  • 简介:InDel在基因分布密度仅次于SNP,可作为动植物群体遗传分析、分子辅助育种等研究领域有效分子标记。花生是世界范围内重要油料作物之。目前,花生栽培种全基因已经公布,为准确挖掘花生基因信息提供了重要参考。本研究通过169份花生核心种质GBS(Genotyping-by-sequencing)测序和比对,共获得大小分布在1~14bp范围内10401个InDels。染色体Arahy.16分布InDels最多,达741个;而在染色体Arahy.08分布最少,有263个。参考基因注释信息,仅有1167个InDels分布在功能基因相关区域。经GO注释,InDel分子功能主要包括催化活性(catalyticactivity)和结合(binding);生物过程主要涉及代谢过程(metabolicprocess)、单组织过程(single-organismprocess)和细胞过程(cellularprocess)。经KEGG通路分析发现,InDels所在基因区域功能主要与代谢相关。本研究开发出全基因水平InDel标记,并做了相应功能分类和注释,步分子验证和利用提供丰富基因资源。

  • 标签: InDels检测 InDels分布 功能分析
  • 简介:研究采用高通量测序技术对淀粉积累高峰期锥栗种仁进行转录测序分析,对得到Unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析,并进步通过实时定量PCR方法分析了7个与淀粉和蔗糖代谢相关酶基因在锥栗种仁发育过程中表达特征。结果显示:denovo组装后共获得53629条Unigene序列,序列平均长度746bp;通过与其他核酸、蛋白质数据库Blast搜索比对,共26739条Unigene序列获得基因注释,占All-Unigene49.86%;与COG数据库比对后将其注释14413条Unigene序列划分成25类;GO功能注释33926条Unigene基因共分成细胞组分、分子功能和生物过程3大类58个分支;与KEGG数据库比对结果注释5277条Unigene序列划分为116条代谢通路;7个与淀粉和蔗糖代谢相关酶基因表达量变化趋势中,CH.29636(淀粉合成酶,SS),CH.11971(淀粉分支酶,SBE)个基因随着种仁发育呈现逐渐上升趋势,而其余5个基因(CH.31302、CH.33690、CH.19238、CH.30128、CH.13088)表达量随着种仁发育呈先上升后下降趋势,该结果与锥栗种仁发育期淀粉和蔗糖变化规律致。这些信息锥栗果实品质形成相关功能基因研究提供了重要依据。

  • 标签: 锥栗 RNA-SEQ 种仁 实时荧光定量PCR 淀粉 蔗糖
  • 简介:目的了解HIV感染者口咽及鼻腔内真菌分离阳性。方法用无菌拭子采集口咽腔溃疡、白斑、口角炎等和咽颊区黏膜分泌物,鼻腔取下鼻甲黏膜或中鼻道黏膜分泌物,直接接种于1mL沙堡弱液体培养基中。取该离心沉淀物作真菌直接镜检,并接种于科玛嘉念珠菌显色培养基置37℃培养48h后鉴定。如丝状真菌,转种于察氏琼脂。25℃培养1周后根据菌落形态结合镜下结构鉴定菌种。结果94HIV感染者在口咽腔中真菌培养阳性62(66%),分离出65株真菌,在鼻腔中真菌培养阳性48(51%),分离出57株真菌。结论HIV感染者免疫功能低下,易继发真菌机会性感染,口咽及鼻腔真菌高寄居是HIV侵袭性真菌感染先兆症状,真菌菌种以白念珠菌比例最高,口咽及鼻腔分别61%和33%。

  • 标签: HIV 口咽 鼻腔 真菌感染
  • 简介:以我国14种重要十字花科蔬菜材料,利用流式细胞术测定基因含量。其中青苤蓝、乌塌菜、雪里蕻、芥蓝基因含量属首次报道。本试验数据与国外文献提供相关数据对比,发现青萝卜、结球甘蓝、青花菜和根用芥菜基因含量与已报道数值基本吻合,而大白菜、花椰菜基因含量值与报道数据存在差异。造成同物种基因含量值差异原因可能是品种不同,也可能与生长环境或测定时参考标准选用等因素不同有关。

  • 标签: 十字花科蔬菜 流式细胞术 基因组含量 遗传变异
  • 简介:2018622-25日,在农业农村部种子管理局组织安排下,"第三次全国农作物种质资源普查与收集行动"(以下"行动")首席科学家、中国工程院原副院长、《植物遗传资源学报》主编刘旭院士,农业农村部种子管理局副局长周云龙,中国农科院作科所资源中心主任李立会等行6人调研前往汉中和安康地区,对陕西省“行动”工作进行调研督导。

  • 标签: 种质资源 管理局 陕西省 普查工作 调研 种子
  • 简介:真菌感染病例逐年增加,除了患者长期使用广谱抗生素、免疫抑制剂以及肿瘤、艾滋病等致人免疫力低下是发生真菌感染重要发病因素外,现在人们对中性粒细胞减少导致真菌感染研究也越来越多,很多资料已将中性粒细胞减少作为真菌感染主要因素,尤其是在血液病患者、肿瘤患者治疗过程中,应注意其粒细胞变化,避免因此造成真菌感染。为了解住院患者在粒细胞减少情况下发生真菌感染情况及其真菌种类,本研究对2002~20043发生真菌感染病例进行调查,结果报告如下。

  • 标签: 粒细胞减少 真菌感染 基础疾病
  • 简介:水稻白叶枯病是世界性水稻病害,严重威胁水稻高产和稳产。为了挖掘水稻抗白叶枯病新基因,本研究个野生稻基因导入系W6023进行了白叶枯病多菌系接种鉴定及抗谱分析,发现W6023具有广谱抗病性。用强致病菌PXO99诱导W6023及其感病轮回亲本IR24后进行转录测序,分别获得105644962和91022599条序列,通过GO注释及KEGG富集分析,发现差异表达基因主要富集在次生代谢产物生物合成、植物激素信号转导及糖代谢途径等方面。在这些差异表达基因中,发现203个基因表达有显著差异,其中在W6023中上调表达基因有114个(56.2%),下调表达有89个(43.8%),而且35.9%分布在第11染色体。生物信息学分析发现在203个差异表达基因中有16个属于类抗病基因,如NBS-LRR等;14个直接或间接与水稻体内过氧化物代谢相关,如编码过氧化物酶和金属硫蛋白等;6个编码抗病相关转录因子,如WRKY和NAC等;18个信号传导相关基因,编码钙调素结合蛋白和萜类合成酶等。随机选择6个W6023中上调表达和3个IR24中上调表达基因进行RT-PCR及qRT-PCR分析,结果与转录测序结果致,表明本研究获得转录测序数据结果是可靠,以后更深入挖掘W6023抗病基因及分子机理研究提供了基础

  • 标签: 水稻 抗病基因 白叶枯病 转录组测序 差异表达基因
  • 简介:股癣是种世界范围内广泛发生真菌感染性疾病。为人体最常见浅部真菌病之。其病原菌构成与分布存在地区与环境差异。掌握它发病情况及病原菌分布特点对科学预防和治疗该病具有指导意义。我们对2005来本科就诊股癣患者进行观察,现将结果报道如下。

  • 标签: 股癣 病原菌 发病情况
  • 简介:目的总结免疫功能正常患者隐球菌脑膜脑炎护理经验。方法回顾性分析我单位近20a来收治免疫功能正常隐球菌性脑膜炎患者临床资料,分析对应护理策略与方法。结果收治109患者均有病原学依据,所有患者都存在头痛呕吐等症状,37患者脑膜刺激征阳性,对这些危重患者需要进行特殊颅高压护理;所有患者均有真菌学诊断指标。性霉素B、氟康唑、5氟胞嘧啶和伏立康唑仍然是主要治疗药物,每种药物副作用需要护理重视。腰穿后鞘内注射抗真菌药物,包括腰椎置管在内各种脑脊液引流与分流治疗是提高治疗效果有效手段,需要给予熟练护理配合和术后观察。结论发生于免疫功能正常患者隐球菌性脑膜炎均具有危重中枢症状,药物治疗和各种操作治疗都具有不同副作用和不良反应,需要采取对应护理方案,以更好地提高疗效。

  • 标签: 隐球菌 脑膜炎 免疫正常 护理
  • 简介:在对长尖叶蔷薇和大花香水月季转录测序基础,利用生物信息学方法,从其转录数据中共获得23条MLOunigenes并对其进行了分析。结果显示它们之间氨基酸数量、碱基数、分子量差异较小,多数疏水性蛋白,平均亲水系数-0.157-0.190,富含亮氨酸和丝氨酸。亚细胞定位主要分布于质膜中,包含5-9个跨膜结构;二级结构主要由α-螺旋组成。其中,等电点小于7仅有1条,2条蛋白具有信号肽。这23条MLO蛋白具有15个长度在15-50个氨基酸保守基序。它们系统进化关系分析结果揭示了MLO基因在长尖叶蔷薇与大花香水月季具有较高同源性和保守性。将这23条unigenes与来自于月季和拟南芥MLO基因进行聚类分析,确定了6条可能参与抗白粉病候选基因,对这6条候选基因进步分析发现仅有2条unigenes符合MLO型白粉病基因典型结构特征。最后,通过qRT-PCR试验验证,结果表明:这2条候选基因相对表达量,在受到白粉病菌侵染后呈积极上调趋势。上述研究结果表明这2条候选基因很可能参与了寄主—白粉病菌互作过程。

  • 标签: 长尖叶蔷薇 大花香水月季 MLO基因 抗白粉病 生物信息学 QRT-PCR
  • 简介:目的了解趾型足癣患者和健康志愿者趾细菌菌种分布特征。方法对37临床和真菌镜检确诊型足癣患者进行细菌培养,然后给予1%联苯苄唑霜1次/d外用治疗4周,在治疗后第1、2、4周分别对趾再进行细菌培养。33健康志愿者作为对照结果健康志愿者趾细菌培养葡萄球菌属占92.5%,其中表皮葡萄球菌占32.5%,未分离到金黄色葡萄球菌。趾型足癣患者细菌培养葡萄球菌属占74.4%,其中金黄色葡萄球菌占27.9%,表皮葡萄球菌仅占2.3%,还分离到化脓性链球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌等。经过4外用联苯苄唑霜治疗,金黄色葡萄球菌消失,表皮葡萄球菌又成为优势菌(37.5%)。结论趾型足癣患者金黄色葡萄球菌分离明显高,此乃足癣继发细菌感染主要致病菌,因此积极治疗足癣对预防足癣合并症有非常重要意义。

  • 标签: 趾间型足癣 细菌 联苯苄唑
  • 简介:目的通过对生活在同家庭患有体癣患者、家庭成员和所养宠物进行观察和分析,探讨人畜共癣病常见致病菌种以及治疗方案。方法收集20053~20091就诊于我院因接触宠物而致病体癣患者,对其宠物带菌情况进行调查,确诊后给予外用特比萘芬乳膏或联苯苄唑凝胶,未愈者给予口服伊曲康唑治疗。结果共收集15患者,真菌培养结果显示8石膏样小孢子菌,4须癣毛癣菌,3犬小孢子菌。患者皮损真菌培养结果和所养宠物皮损真菌培养结果致。按上述方法对患者及其宠物进行治疗,所有患者和10只(3只被丢弃)宠物全部治愈。结论15人畜共体癣中,石膏样小孢子菌感染所致比例最高,其次是须癣毛癣菌和犬小孢子菌,外用特比萘芬乳膏或联苯苄唑凝胶以及口服伊曲康唑胶囊可以有效治疗此类人畜共皮肤癣菌病。

  • 标签: 体癣 人畜共患 石膏样小孢子菌 须癣毛癣菌 犬小孢子菌
  • 简介:目的探讨伏立康唑与卡泊芬净治疗严重烧伤后真菌感染临床治疗效果,临床用药提供参考.方法收集本院20126~20166严重烧伤并发真菌感染患者共62,利用随机数字表法分为.对患者给予同等剂量氟康唑静脉注射治疗基础,对照30使用卡泊芬净进行治疗,观察32使用伏立康唑进行治疗;分析62患者临床感染特征,并比较种药物治疗效果及其不良反应.结果临床感染症状主要包括体温高、脉搏异常、咽喉肿痛、咳嗽咯痰、精神异常、肺部阴影并存在啰音等;感染部位以创面感染为主;引发感染真菌以白念珠菌与热带念珠菌为主,分别为55.93%和20.33%.观察对照治愈分别为84.38%和86.67%,差异无统计学意义(P〉0.05);且种药物不良反应发生都较低.结论对严重烧伤后合并真菌感染患者,采用卡泊芬净与伏立康唑进行治疗,其临床效果显著且不良反应少,值得进步推广使用.

  • 标签: 严重烧伤 真菌感染 卡泊芬净 伏立康唑
  • 简介:目的观察和评价1%卢立康唑乳膏治疗足癣有效性和安全性。方法采用随机、单盲、阳性药物对照研究,将入选患者按照试验设计随机分成2,实验外用1%卢立康唑乳膏,每日1次,共2周,对照外用1%特比萘芬乳膏,每日1次,共2周。开始用药后第2周评价临床和真菌学疗效。结果86真菌镜检阳性患者随机分成2,每组43,最后59患者进入疗效分析。用药2周时,卢立康唑、特比萘芬临床有效率分别为96.97%和96.15%(P〉0.05),真菌清除分别为81.82%和80.77%(P〉0.05),差异无统计学意义。结论1%卢立康唑乳膏外用治疗足癣安全有效。

  • 标签: 卢立康唑 特比萘芬 足癣 临床方案 随机对照试验