简介：摘要目的探讨游离腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复手背软组织缺损的临床效果。方法采用回顾性病例系列研究分析2018年5月至2020年3月遵义医科大学附属医院收治的12例手背软组织缺损患者临床资料，其中男7例，女5例；年龄24～56岁[(38±9)岁]。创面位于掌背侧9例，面积3 cm×4 cm～4.5 cm×13 cm。创面位于指背侧3例，累及单个手指1例，累及2个手指2例。于小腿内后侧设计腓肠内侧动脉穿支皮瓣，其中皮瓣采用单穿支5例，2个穿支5例，3个穿支2例。皮瓣切取后修复手背创面，其中采用分叶皮瓣2例，皮瓣供区直接缝合。观察皮瓣是否成活、外观、质地、Weber两点辨别觉试验。采用中华医学会手外科学会上肢功能评定试用标准评定掌指和指间关节伸屈功能。观察小腿供区并发症情况。结果患者均获随访6～20个月[(10±1)个月]。皮瓣全部成活，皮瓣外形、质地良好，皮瓣形成保护性感觉，两点辨别距离5.0～6.5 cm。掌指及指间关节伸屈功能评分：掌指关节4.1～5.0分，近指关节3.1～4.0分，远指关节2.1～3分。皮瓣供区仅残留线装瘢痕，对小腿功能无影响。结论腓肠内侧动脉穿支恒定，对供区损伤小，术后皮瓣成活率高、手功能恢复满意，是修复手背软组织缺损的较好选择。

简介：摘要目前，秃发人群日益增多，且呈年轻化趋势，秃发不仅影响外观，甚至给患者造成严重的心理压力，严重影响患者生活质量。近年来，细胞条件培养基广泛应用于创面修复、毛发再生以及其他医学领域。该文对常用细胞条件培养基促进毛发再生的研究进行综述，主要包括间充质干细胞条件培养基、角质形成细胞及其干细胞条件培养基、低代毛乳头细胞条件培养基。

简介：摘要目的探讨小鼠炎症创面组织匀浆体外模拟创面炎症微环境的可行性。方法(1)取10只8周龄C57BL/6雄性小鼠，在背部中线两侧用打孔器各取直径1.0 cm的圆形全层皮肤组织，制作正常皮肤组织匀浆上清液。形成全层皮肤缺损创面48 h后，取距创缘2 mm内创面组织，制作炎症创面组织匀浆上清液。取2种组织匀浆上清液，调整总蛋白质量浓度为1 mg/mL，酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量，样本数为6。(2)取原代人脐带间充质干细胞(hUCMSC)并培养至第3代，培养48 h后提取正常外泌体。另外取第3代hUCMSC，分别加入总蛋白质量浓度为30、50、100 μg/mL正常皮肤组织匀浆上清液和炎症创面组织匀浆上清液，培养48 h后，提取30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体。取正常外泌体、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体，透射电子显微镜下观察外泌体形态，纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体粒径，蛋白质印迹法检测CD9和CD63表达。(3)取1 d龄C57BL/6小鼠乳鼠20只，分离培养原代成纤维细胞(Fb)和第3代Fb，倒置相差显微镜下观察细胞形态。取第3代Fb，培养2 h，利用细胞爬片法结合免疫荧光法观察波形蛋白的表达。(4)取第3代Fb，按随机数字表法分为对照组，正常外泌体组，30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组，每组4孔。对照组不进行任何处理，其余7组依次加入实验(2)中制备的正常外泌体，30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体，并调整外泌体终质量浓度为10 μg/mL。培养48 h，采用细胞计数试剂盒8法检测8组细胞活力。(5)取2个批次第3代Fb，同实验(4)进行分组及处理，每组4孔，并分别调整外泌体终质量浓度为1、10 μg/mL，采用细胞划痕试验检测培养6、12、24 h细胞迁移率。(6)取2个批次第3代Fb，同实验(4)进行分组及处理，但不设置对照组，每组3孔，并调整外泌体终质量浓度为1、10 μg/mL，实时荧光定量反转录PCR法检测培养48 h转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β3、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析及Bonferroni法。结果(1)伤后48 h，小鼠炎症创面组织匀浆上清液中TNF-α含量为(116±3)pg/mL，显著高于正常皮肤组织匀浆上清液的(97±5)pg/mL，t＝3.306，P<0.05。(2)hUCMSC正常外泌体、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体、30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体均呈典型茶托样；3种hUCMSC外泌体粒径为30～150 nm，均在外泌体正常粒径范围内；3种hUCMSC外泌体CD9和CD63均呈阳性表达。(3)原代细胞轮廓清晰，呈突起的纺锤形、不规则多角形或细长条状；第3代细胞形态与原代细胞相近。培养2 h，细胞中波形蛋白呈阳性表达，细胞鉴定为Fb。(4)培养48 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞活力为(137.4±2.8)%，明显高于对照组的100%、正常外泌体组的(107.5±2.4)%、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组的(113.3±3.2)%及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组的(104.0±2.0)%、(101.9±1.5)%，P<0.01, 30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞活力明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组[(103.4±2.2)%、(102.5±1.4)%]，P<0.01。(5)外泌体终质量浓度为1 μg/mL时，培养6、12、24 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组(P<0.05)；培养12 h，30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组以及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组(P<0.05)。外泌体终质量浓度10 μg/mL时，培养6 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组(P<0.05)；30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组(P<0.05)。培养12、24 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组(P<0.05)；30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组(P<0.05)。(6)外泌体终质量浓度1 μg/mL时，7组细胞培养48 h TGF-β1、TGF-β3、α-SMA mRNA表达量组间总体比较，差异无统计学意义(F＝1.123、1.537、1.653，P>0.05)。外泌体终质量浓度为10 μg/mL时，培养48 h，7组细胞TGF-β1、α-SMA mRNA表达量组间总体比较，差异无统计学意义(F＝1.487、1.308，P>0.05)。50 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞培养48 h TGF-β3 mRNA表达量明显高于正常外泌体组、50 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及30、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组(P<0.05)。结论小鼠炎症创面组织匀浆上清液预处理对hUCMSC外泌体的总蛋白含量无影响，低浓度炎症创面组织匀浆上清液刺激所得的hUCMSC外泌体能够上调Fb的增殖和迁移能力，但炎症创面组织匀浆上清液中的炎症介质含量过低，不足以有效启动间充质干细胞抗炎及组织修复旁分泌效应。

简介：摘要目的探讨足底内侧动脉深支远端穿支皮瓣的血管解剖及逆行修复趾皮肤软组织缺损的效果。方法对1例男性成人足部标本的动脉灌注红色乳胶后进行血管解剖，观察足底内侧动脉及分支、足背动脉及其分支的分布吻合情况。选取2016年9月至2019年9月于遵义医科大学附属医院就诊的趾皮肤软组织缺损的患者12例，采用逆行足底内侧动脉深支远端穿支皮瓣进行修复，供区游离皮片移植修复。观察皮瓣成活以及并发症发生情况。结果经解剖研究可见足底内侧动脉深支是足底内侧动脉的直接延续，走行于趾短屈肌与展肌之间，沿途发出多条穿支，近端穿支穿过展肌，与足内侧动脉浅支和内踝前动脉、跗内侧动脉吻合，在第1跖趾关节近端发出3条穿支，即关节支、皮穿支和交通支，皮穿支为足底内侧动脉深支远端穿支皮瓣的主要血供来源。临床12例患者共切取皮瓣12块，面积为4.5 cm×3.0 cm ～9.0 cm×6.0 cm，3例术后皮瓣出现颜色暗紫、少许水泡，立即给予拆除蒂部缝线，外涂抗生素软膏保持湿润等处理，术后5 d皮瓣颜色逐渐好转。12块皮瓣最终均完全成活。所有患者均获2～12个月电话随访，皮瓣色泽、质地、外形良好，患足可正常行走。结论足底内侧动脉深支远端穿支皮瓣血供可靠，将其逆行修复第1跖趾关节以远趾中小面积的皮肤缺损，操作简单、创伤小、术后效果较好。

简介：摘要目的探讨改良掌背动脉皮支筋膜蒂皮瓣修复手指近、中节创面的临床效果。方法2017年1月—2018年9月，遵义医科大学附属医院收治12例手指近、中节创面患者，其中男8例、女4例，年龄35～70岁，创面面积为3.4 cm×2.4 cm～6.5 cm×4.0 cm。采用改良掌背动脉皮支筋膜蒂皮瓣修复创面，皮瓣切取面积为3.5 cm×2.5 cm～6.7 cm×4.1 cm。5例患者皮瓣供区直接间断缝合，4例患者皮瓣供区取同侧前臂内侧全厚皮片修复，3例患者皮瓣供区采用腕部带蒂皮瓣修复。记录皮瓣存活情况，随访观察供受区恢复情况，采用中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定手功能。结果12例患者皮瓣全部成活。随访3～12个月，皮瓣质地、外形恢复较佳，11例患者供区愈合；1例患者供区植皮边缘区域部分坏死，经换药后愈合。本组患者皮瓣两点辨别觉距离为5.6～9.0 mm，手功能评定为优5例、良4例、中3例。结论改良掌背动脉皮支筋膜蒂皮瓣修复手指近、中节创面血运可靠，手术操作简便、安全，疗程短，值得临床推广。

简介：摘要目的探讨联合指端动脉弓的同指单侧指固有血管神经束V-Y推进皮瓣治疗儿童指端小面积皮肤软组织缺损的临床疗效。方法自2018年1月至2020年1月我科共收治10例12指指端软组织缺损患儿。缺损面积1.0 cm×0.8 cm～2.0 cm×1.8 cm。切取同指单侧指固有血管神经束联合指端动脉弓穿支皮瓣，皮瓣设计成"V"形，切口线设计为锯齿状，保留指端动脉弓交通支血管，向远端推进修复指端或指背甲床缺损伴指骨外露创面。皮瓣近端最远至掌指关节。结果术后10例12指皮瓣全部存活，创面均Ⅰ期愈合，皮瓣存活良好。随访3～24个月，平均10个月。患指无明显屈曲挛缩畸形，各关节活动正常，皮瓣区无感觉障碍。末次随访时患指关节屈曲功能按总主动活动度系统评分：优10指，良2指。结论携带指端动脉弓的指固有血管神经束V-Y推进皮瓣修复儿童远端小面积皮肤软组织缺损安全可靠，可操作性强。

简介：无

简介：摘要目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)在体内外对小鼠全层皮肤缺损创面巨噬细胞表型的调控及对创面愈合相关炎症因子的影响。方法(1)取遵义医科大学附属医院妇产科5名足月分娩健康孕妇产后弃用的新鲜羊膜，酶消化法分离纯化培养hAMSC，取第3代细胞，经成骨、成脂诱导分化鉴定；取第4代细胞，经hAMSC表面标志物鉴定。取10只C57BL/6小鼠(均为雄性，6～8周龄，性别、鼠龄下同)，腹腔灌洗法提取小鼠腹腔巨噬细胞，用含γ干扰素的DMEM培养基培养诱导制备M1型巨噬细胞。将M1型巨噬细胞分为hAMSC＋巨噬细胞组及单纯巨噬细胞组。hAMSC＋巨噬细胞组每孔巨噬细胞加入1×104个第4代hAMSC后加入DMEM培养基2 mL，常规培养；单纯巨噬细胞组每孔巨噬细胞仅加入2 mL DMEM培养基常规培养。于培养1、7 d，酶联免疫吸附测定法检测2组细胞培养上清液中白细胞介素12(IL－12)、精氨酸酶1及IL－10含量(样本数为6)。(2)取56只C57BL/6小鼠，建立背部全层皮肤缺损创面模型，按随机数字表法分为hAMSC组和磷酸盐缓冲液(PBS)组，每组28只。hAMSC组小鼠于创周皮下注射100 μL采用PBS悬浮的含1×107个/mL hAMSC的细胞悬液，PBS组小鼠创周仅注射100 μL PBS。于注射后1、3、7、14 d，2组分别取7只小鼠，处死后行苏木精－伊红染色组织病理学观察，免疫荧光染色检测创面巨噬细胞表面标志物[CD68与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)双阳性、CD68与精氨酸酶1双阳性]表达，实时荧光定量反转录PCR检测创面IL－10、巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP－1α)、MIP－2的mRNA表达。对数据行析因设计方差分析、t检验、Bonferroni校正。结果(1)培养1 d，2组细胞培养上清液中IL－12、精氨酸酶1含量相近(t＝0.448、0.536，P>0.05)，hAMSC＋巨噬细胞组细胞培养上清液中IL－10含量明显低于单纯巨噬细胞组(t＝14.722，P<0.01)。培养7 d，hAMSC＋巨噬细胞组细胞培养上清液中IL－12含量明显低于单纯巨噬细胞组(t＝13.226，P<0.01)，精氨酸酶1和IL－10含量明显高于单纯巨噬细胞组(t＝30.172、31.406，P<0.01)。(2)注射后1 d，2组小鼠创面均有大量炎性细胞浸润；注射后3 d，2组小鼠创面炎性细胞浸润均增多，hAMSC组炎性细胞浸润较PBS组少；注射后7 d，2组小鼠创面炎性细胞浸润均减少，hAMSC组炎性细胞浸润较PBS组少；注射后14 d，2组小鼠创面均未见明显炎性细胞浸润。(3)注射后1、14 d，2组小鼠创面CD68与iNOS双阳性细胞百分比、CD68与精氨酸酶1双阳性细胞百分比相近(t1 d＝0.134、0.693，t14 d＝1.146、2.585，P>0.05)；注射后3、7 d，hAMSC组小鼠创面CD68与iNOS双阳性细胞百分比明显低于PBS组(t＝6.396、4.787，P<0.01)，CD68与精氨酸酶1双阳性细胞百分比明显高于PBS组(t＝3.928、4.473，P<0.01)。(4)注射后1 d，2组小鼠创面IL－10的mRNA表达相近(t＝2.005，P>0.05)；注射后3、7、14 d，hAMSC组小鼠创面IL－10的mRNA表达明显高于PBS组(t＝7.758、124.355、80.823，P<0.01)。注射后1、3、7、14 d，hAMSC组小鼠创面MIP－1α和MIP－2的mRNA表达(0.341±0.212、0.648±0.004、0.611±0.106、0.763±0.049，1.377±0.099、1.841±0.042、1.181±0.035、0.553±0.028)均明显低于PBS组(3.853±0.035、6.914±0.163、3.648±0.113、2.250±0.046，11.119±0.495、8.634±0.092、5.722±0.021、4.862±0.036，t＝43.198、101.904、51.845、58.231，51.074、177.501、291.752、251.614，P<0.01)。结论hAMSC具有促进小鼠全层皮肤缺损创面M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的生物学效应；可以上调抗炎及抗纤维化因子IL－10的表达，下调重要的炎症反应介导因子MIP－1α和MIP－2的表达。

简介：摘要创面愈合是多种类型细胞、细胞因子及细胞外基质相互作用的动态过程，其中上皮细胞和间充质细胞是参与创面愈合和瘢痕形成的主要细胞。相关学者分别对创面愈合和瘢痕形成过程中上皮细胞和成纤维细胞(Fb)的作用进行了大量研究，结果显示上皮细胞在创面复杂的微环境刺激下会失去其上皮特征并获得间充质细胞典型特征及迁移能力，同时伴随细胞结构和细胞行为等的复杂改变，进而通过细胞迁移覆盖创面，参与组织创伤修复过程，包括正常或纤维化修复。而Fb是创面纤维化修复的关键细胞，在创面愈合包括创面过度愈合和延迟愈合中均发挥重要作用。近年来研究者们认识到上皮细胞与Fb在创面愈合过程中的信息交流，即上皮-间充质相互作用，明显影响着这2种细胞的生物学行为，决定着真皮重塑和创面再上皮化的质量。上皮-间充质相互作用在胚胎发育期皮肤的形态发生和维持成人皮肤的结构完整中发挥重要作用。在创面愈合再上皮化过程中，Fb能够促进角质形成细胞(KC)增殖和迁移，同时KC接受来自Fb的信号以重建功能性的上皮，相关研究已成为目前创面愈合领域的研究热点。本文就近年来国内外有关上皮-间充质相互作用在创面愈合和瘢痕形成中的相关文献进行综合分析，供相关学者参考。

简介：摘要足踝部皮肤软组织损伤常常需要皮瓣进行覆盖修复，但是游离皮瓣修复手术时间长，显微技术要求较高，同时容易造成皮瓣臃肿。局部带蒂穿支皮瓣常只包含单穿支血管供血，一旦切取过长将出现皮瓣远端供血不足，甚至皮瓣坏死。笔者采用回顾性病例系列研究分析2014年3月— 2017年7月遵义医科大学附属医院收治的10例足踝部小面积软组织缺损患者临床资料，探讨采用顺行外踝上腓浅神经营养血管皮瓣的手术方法及疗效，为足踝部小面积软组织缺损治疗提供一种途径。