简介:摘要目的通过制作大鼠肾移植模型,探讨蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制剂对大鼠移植炎性反应的影响并观察与磁共振成像(MRI)的对应关系。方法将大鼠肾移植模型随机分为3组:同质移植组、异质移植组和异质移植PKC-β抑制剂组,每组10对。术后24 h行MRI检查,然后处死大鼠,取血标本用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测低氧诱导因子-1(HIF-1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA表达量,取肾脏标本用免疫组织化学检测肾组织中白细胞介素(IL)-4、IL-8、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和单核细胞迁移抑制因子(MIF)的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果MRI显示术后24 h大鼠移植肾在异质移植PKC-β抑制剂组冠状位扫描记录动脉自旋标记(ASL)及T1成像分别为[(294.19±42.13) ml/(min×100 g)、(1 951.1±82.9) ms],显著高于异质移植组[(253.24±25.18) ml/(min×100 g)、(1842.1±79.6) ms],而低于同质移植组[(331.65±49.44) ml/(min×100 g)、(2 047.6±89.3) ms],差异有统计学意义(F=42.323、95.445,P值均<0.01);血清中的HIF-1和HO-1在异质移植PKC-β抑制剂组水平[(1 245.17±305.96)、(249.72±51.01)]分别高于异质移植组[(947.34±112.65)、(111.71±41.02)]和同质移植组[(1 157.74±224.63)、(147.52±42.22)],差异有统计学意义(F=61.252、37.832,P值均<0.01);而肾组织中的IL-4、IL-8、MCP-1、MIF在异质移植PKC-β抑制剂组表达水平[(45.3±4.3)、(47.2±4.5),(37.7±3.6)、(31.2±3.0)]分别高于同质移植组[(19.4±2.6)、(19.6±2.5)、(17.4±2.1)、(16.7±2.5)],但低于异质移植组[(82.5±6.5)、(88.6±6.6)、(77.4±5.6)、(71.2±4.5)],差异有统计学意义(F=51.237、59.432、49.375、51.223,P值均<0.01)。结论PKC-β抑制剂通过减轻炎症浸润及产生保护因子来减轻肾移植后移植物损伤,与MRI检测结果呈对应关系。
简介:摘要目的对腹部切口构建急性肾缺血再灌注损伤动物模型予以优化,构建急性肾缺血再灌注损伤模型的新途径。方法大鼠取俯卧位予以固定,将腹部垫起,在背部正中偏右一厘米处切开皮肤,开口为三厘米,切开腰背筋膜肾周脂肪组织暴漏在外,因此已进入腹膜后间隙。通过拉钩支撑切口,通过钝性游离脂肪组织右肾与肾蒂漏出,在此基础上分离右肾动脉直到腹主动脉,通过棉签向腹主动脉底端游离,方可发现左肾动脉。隔绝举措无损伤动脉夹隔绝双肾动脉,滞留四十五min,松开无损伤动脉夹,查看肾灌注无异常后缝合切口。结果实验组一只Sprague-Dawley由于术中出血而死亡,其他十五只术后存活,实验组的手术成功率超过九十三个百分点,伪手术组及对照组Sprague-Dawley术后均存活。实验组serumcreatinine与BUN显著超过伪手术组及对照组,检测结果表明实验组Sprague-Dawley第一天、第四天与第七天的serumcreatinine与BUN逐渐降低,且P<0.05,即术后肾功能慢慢得到恢复。结论此次研究我们所构建的大鼠急性肾缺血再灌注模型具有较强的稳定性,可以很好的匹配于急性肾缺血再灌注损伤研究。
简介:摘要目的观察磁共振成像评估促红细胞生成素(EPO)对肾移植的治疗效果,探讨EPO供体给药和EPO受体给药作用的机制。方法建立单侧大鼠同系基因肾移植模型,采用随机数字表法随机分为假手术组、模型组、EPO供体给药组、EPO受体给药组。术后24 h各组先行磁共振成像检查,通过冠状位扫描记录动脉自旋标记(ASL)及T1、T2成像,然后处死大鼠,取血检测肾功能,取肾做病理学检查,免疫组织化学或蛋白质印迹法(Western blot)检测肾损伤分子-1(KIM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达水平。采用单因素方差分析多组间及t检验分析两组间差异情况。结果两EPO给药组与模型组比较移植肾损伤明显减轻,肾功能、肾组织病理学变化明显改善,磁共振扫描显示模型组T1与T2时间[(1 842.0±51.0)、(57.3±3.1) ms]均高于EPO供体给药组[(1 412.0±33.0)、(41.4±1.9) ms]和EPO受体给药组[(1 461.0±35.0)、(44.2±1.7) ms,F=94.433、35.546,P值均<0.01],差异均有统计学意义;KIM-1、TNF-α、MCP-1模型组表达(24.33±7.44、13.88±3.47、0.47±0.11)均高于EPO供体给药组(7.91±2.08、7.31±1.03、0.30±0.09)和EPO受体给药组(8.07±1.55、7.62±1.23、0.29±0.09,F=34.273、41.055、51.825,P值均<0.01),差异均有统计学意义。结论EPO可通过减少炎性因子生成等,减轻移植后的肾缺血再灌注损伤,无论供体给药还是受体给药,其效果相当,都发挥肾脏保护作用,说明EPO既在肾脏发挥作用也在血循环中发挥作用;而磁共振扫描结果与免疫组织化学及Western blot结果呈对应关系,证实EPO的治疗效果,磁共振成像这种无创性检查有助于临床判断药物治疗移植术后效果。