简介：摘要目的评价脊髓P2Y1嘌呤受体(P2Y1R)在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏形成中的作用及其与脊髓NMDA受体(NR)1和NR2B功能的关系。方法鞘内置管成功的健康成年雄性SD大鼠48只，10~12周龄，体重250~280 g，采用随机数字表法分为6组(n＝8)：对照组(C组)、P2Y1R拮抗剂MRS2179组(M组)、瑞芬太尼组(R组)、瑞芬太尼+MRS2179组(R+M组)、切口痛+瑞芬太尼组(I+R组)和切口痛+瑞芬太尼+MRS2179组(I+R+M组)。C组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg-1·min-1 60 min；M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg-1·min-1 60 min；R组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min；R+M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min；I+R组鞘内注射生理盐水10 μl，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min，瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型；I+R+M组鞘内注射MRS2179 0.6 nmol/kg，10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1 60 min，瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型。分别于输注瑞芬太尼或生理盐水前24 h、输注停止后2、6、24和48 h时测定机械缩足反应阈(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)和冷板抬足次数。最后一次痛阈测定结束后处死大鼠，取脊髓L4-6节段，采用Western blot法检测脊髓P2Y1R、磷酸化NR1(p-NR1)、NR1、磷酸化NR2B(p-NR2B)和NR2B表达，并计算p-NR1/NR1比值及p-NR2B/NR2B比值，采用RT-PCR法检测P2Y1R、NR1和NR2B的mRNA表达。结果与C组比较，R组MWT降低，TWL缩短，冷板抬足次数增加，脊髓P2Y1R及其mRNA、NR1及其mRNA、p-NR1、NR2B及其mRNA、p-NR2B表达上调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值升高(P<0.01)。与R组比较，R+M组MWT增加，TWL延长，冷板抬足次数减少，脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.05或0.01)；与I+R组比较，I+R+M组MWT增加，TWL延长，冷板抬足次数减少，脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调，p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.01)。结论脊髓P2Y1R可增强NR1和NR2B功能，该作用可能参与了瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的形成。

简介：摘要目的评价脊髓背角富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)在瑞芬太尼诱发切口痛小鼠痛觉过敏形成中的作用。方法健康雄性C57BL/6J小鼠48只，8～10周龄，体重18～22 g，采用随机数字表法分为6组(n＝8)：对照组(C组)、切口痛组(I组)、瑞芬太尼组(R组)、切口痛＋瑞芬太尼组(I＋R组) 、切口痛＋瑞芬太尼组＋阴性对照siRNA组(I＋R＋N组)和切口痛＋瑞芬太尼＋ SPARCL1-siRNA组(I＋R＋S组)。I＋R＋N组和I＋R＋S组分别鞘内注射1×108 IFU/ml阴性对照siRNA和SPARCL1-siRNA 10 μl，C组、I组、R组、I＋R组鞘内注射生理盐水10 μl，6组均注射1次/d，连续3 d。待稳定转染后，C组和I组尾静脉注射生理盐水0.1 ml，R组、I＋R组、I＋R＋N组和I＋R＋S组尾静脉注射瑞芬太尼10 μg/kg(用生理盐水稀释至0.1 ml)，6组均连续注射4次，间隔15 min。I组、I＋R组、I＋R＋N组和I＋R＋S组于第1次尾静脉给药后制备切口痛模型。分别于输注生理盐水或瑞芬太尼前24 h(T0)、 输注停止后3、6、24和48 h(T1-4)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热甩尾潜伏期(TWL)。于T4时测定痛阈后处死小鼠，取L4-6节段脊髓背角组织，分别采用Western blot法和qRT-PCR法检测SPARCL1及其mRNA的表达水平。结果与C组比较，I＋R组和I＋R＋N组T1-4时MWT降低，TWL缩短，I组、R组和I＋R＋S组T2-4时MWT降低，TWL缩短，R组、I＋R组、I＋R＋C组脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达上调(P<0.05或0.01)；与I组或R组比较，I＋R组MWT降低，TWL缩短，脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达上调(P<0.01)；与I＋R组比较，I＋R＋S组T1-4时MWT增加，TWL延长，脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达下调(P<0.05或0.01)，I＋R＋C组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论SPARCL1活性增强参与了瑞芬太尼诱发切口痛小鼠痛觉过敏的形成。