简介：摘要目的研究补体旁路途径（alternative complement pathway）过度活化在恶性高血压肾硬化中的作用。方法（1）选取本院经肾穿刺活检证实为恶性高血压肾硬化患者50例为病例组，零点行肾穿刺活检的供肾者25例为正常对照组，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆及尿液中的补体旁路途径活化起始B因子、正向调节P因子、负向调节H因子及补体活化终末产物C3a、C5a水平。（2）免疫组化法检测补体活化终末产物C5b-9、C4d及凝集素途径活化产物甘露糖结合凝集素（MBL）在肾活检组织的沉积；免疫荧光双染检测C5b-9与CD34（内皮细胞标志物）在小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮的沉积。结果（1）恶性高血压肾硬化患者血浆及尿液中补体B因子、P因子、C3a及C5a均高于正常对照组（均P<0.05），而H因子则低于正常对照组（P<0.05）。（2）恶性高血压肾硬化患者血浆中补体P因子与24 h尿蛋白量呈正相关（rs=0.465，P=0.001），而补体B因子、H因子、C3a、C5a与血肌酐及24 h尿蛋白量无明显相关性。恶性高血压肾硬化患者尿B因子/尿肌酐、尿P因子/尿肌酐、尿C3a/尿肌酐与血肌酐均呈正相关（rs=0.483，P<0.001；rs=0.352，P=0.012；rs=0.319，P=0.024），尿H因子/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈负相关（rs=-0.299，P=0.035；rs=-0.342，P=0.015），尿C5a/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈正相关（rs=0.525，P<0.001；rs=0.496，P<0.001）。（3）免疫组化显示，恶性高血压肾硬化患者C5b-9沉积于小动脉壁及肾小球毛细血管壁，而正常对照组肾组织中未见沉积。恶性高血压肾硬化患者肾脏C5b-9沉积强度评分与血肌酐及24 h尿蛋白量呈正相关（rs=0.791，P<0.001；rs=0.345，P=0.014）。双重免疫荧光标记法可见C5b-9、CD34沉积于小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮。（4）恶性高血压肾硬化患者血浆中B因子与C3a（r=0.331，P=0.022）、P因子与C5b-9评分（rs=0.300，P=0.034）均呈正相关；尿液中补体旁路途径活化B因子与C3a、C5a及C5b-9均呈正相关（rs=0.311，P=0.028；rs=0.465，P=0.001；rs=0.428，P=0.002），P因子与C3a、C5a也均呈正相关（rs=0.307，P=0.030；rs=0.442，P=0.001）。恶性高血压肾硬化患者免疫组化可见C4d沉积于小动脉及肾小球，而未见凝集素途径活化产物MBL沉积。结论补体旁路途径过度活化可能参与恶性高血压肾硬化的发生。恶性高血压肾硬化严重程度与补体旁路途径的活化水平相关。

简介：摘要目的比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用，探讨最佳抗原修复法。方法选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象，其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例。分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片。按照标本来源和抗原修复方法分为6组：对照组（冰冻切片标本）、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复（高压热联合胰酶）组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复（微波热联合胰酶）组、高压热修复（高压热）组、微波热修复（微波热）组、胃蛋白酶消化（胃蛋白酶）组。分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异。结果高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致，与对照组比较，两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义（均P>0.05）。高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高，免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义（均P<0.05）。结论高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法。