简介：摘要目的观察慢病毒（LV）介导miR-191对体外培养的人视网膜血管内皮细胞（hREC）增生和血管生成的抑制作用。方法体外培养hREC细胞系，分为对照组、缺氧组、LV-空载体（LV-vector）组、LV-miR-191 （LV-191）组。LV-vector组、LV-191组分别转入相应的慢病毒载体。采用流式细胞仪检测细胞转染率；细胞计数试剂盒-8 （CCK-8）实验检测细胞增生能力；划痕实验和侵袭小室（Transwell）实验检测细胞迁移能力；Matrigel实验检测细胞管腔形成能力；实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-191相对表达量及其下游靶基因p21、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞分裂蛋白激酶（CDK）6、细胞周期蛋白-D1 (Cyclin D1）mRNA相对表达量。两两比较采用独立样本t检验。结果流式细胞仪检测结果显示，对照组、LV-191组细胞转染率分别为0.615%、99.400%。CCK-8、细胞划痕、Transwell细胞迁移、Matrigel实验结果显示，与对照组比较，缺氧组、LV-vector组细胞增生数量明显增多（t=6.130、4.606 ）、细胞迁移率明显增高（t=4.910、6.702 ）、微孔膜上染色的细胞数量明显增多（t=7.244、6.724 ）、细胞管腔形成能力增强（t=8.345、9.859），LV-191组细胞增生数量明显减少（t=14.710）、细胞迁移率明显降低（t=6.245 ），微孔膜上染色的细胞数量明显减少（t=5.333）、细胞管腔形成能力明显减弱（t=5.892 ），差异均有统计学意义（P≤0.01）。qPCR检测结果显示，与对照组、LV-vector组比较，LV-191组细胞中miR-191 mRNA相对表达量明显上调（t=44.110、42.680），Cyclin D1 （t=29.940、14.010）、CDK6 （t=15.200、7.645）mRNA相对表达量明显下降，差异均有统计学意义（P<0.01）；p21 mRNA相对表达量增高，但差异无统计学意义（t=2.013、2.755，P>0.05）。4组细胞中VEGF mRNA相对表达量比较，差异无统计学意义（F=0.966，P>0.05 ）。结论miR-191可通过上调p21 mRNA表达，下调CDK6、Cyclin D1 mRNA表达，抑制hREC增生、迁移及管腔形成。

简介：摘要目的观察视网膜中央静脉阻塞（CRVO）继发黄斑水肿（ME）患眼玻璃体腔注射雷珠单抗（IVR）治疗后，复发与非复发者黄斑区微血管结构差异，初步分析其与ME复发之间的相关性。方法前瞻性临床观察性研究。2020年1月至2021年12月于天津医科大学眼科医院检查确诊的CRVO继发ME（CRVO-ME）患者45例45只眼纳入研究。其中，男性22例22只眼，女性23例23只眼；年龄（61.11±10.88）岁；均为单眼发病。所有患眼均接受IVR治疗，每一个月1次，连续3个月；并于初始3次治疗后ME消退。根据治疗后6个月时是否再次出现ME将患者分为复发组、非复发组，分别为21例21只眼、24例24只眼。患眼均行最佳矫正视力（BCVA）、眼压、光相干断层扫描血管成像（OCTA）检查。采用OCTA仪对黄斑区3 mm×3 mm范围进行扫描，测量治疗前后视网膜浅层毛细血管丛（SCP）、深层毛细血管丛（DCP）、中心凹、旁中心凹的血流密度（VD）以及黄斑中心凹视网膜厚度、中心凹无血管区（FAZ）面积、FAZ周长（PERIM）、非圆度指数（AI）、FAZ范围300 μm宽度内VD（FD-300）。中心凹VD包括浅层、深层视网膜VD（SFVD、DFVD）；旁中心凹VD包括浅层、深层视网膜VD（SPFVD、DPFVD）。以初始3次治疗后为观察时间点，对比观察两组患眼各参数变化情况。复发组、非复发组间各参数比较采用两独立样本t检验。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析各参数预测ME复发的曲线下面积（AUC），确定预测ME复发的临界值。结果复发组与非复发组患者年龄（t=1.350）、眼压（t=1.929）、SFVD（t=-1.716）、DFVD（t=-1.143）、CRT（t=-1.207）、AI（t=1.387）比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；IVR治疗次数（t=5.912）、BCVA（t=5.003）、SVD（t=-4.617）、SPFVD（t=-4.110）、DVD（t=-5.503）、DPFVD（t=-4.772）、FAZ面积（t=2.172）、PERIM（t=2.606）、FD-300（t=-3.501）比较，差异有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，DVD预测CRVO-ME复发的AUC最大，为0.921；DVD预测ME复发的最佳临界值为37.65%，灵敏度、特异性分别为91.7%、85.7%。结论与非复发者比较，复发者SVD、SPFVD、DVD、DPFVD、FD-300降低，FAZ面积和PERIM增加。DVD≤37.65%是预测ME复发的最佳临界值。