简介：摘要目的探讨NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3，NLRP3)对巨噬细胞吞噬创伤弧菌能力的影响和调控机制。方法转录组测序分析创伤弧菌感染J774A.1细胞吞噬相关基因的表达谱；CRISPR-Cas9基因编辑技术构建NLRP3敲除(NLRP3 KO)的J774A.1细胞；流式细胞术分析未敲除J774A.1和NLRP3 KO J774A.1细胞对创伤弧菌和pHrodo RED标记的大肠埃希菌(Escherichia coli，E.coli)修饰微球的吞噬能力；荧光定量PCR检测吞噬相关基因Fgr2b的表达情况。结果J774A.1细胞感染创伤弧菌后，吞噬功能相关基因表达谱中约有18个基因表达上调(P<0.05)；NLRP3 KO J774A.1细胞在NLRP3的第2个外显子中有5个碱基的缺失，发生移码突变，导致NLRP3表达缺陷；创伤弧菌或E.coli修饰微球体外作用后，NLRP3 KO J774A.1细胞较未敲除组吞噬能力均显著增强，差异有统计学意义；与未敲除组比较，创伤弧菌感染的NLRP3 KO J774A.1细胞中Fgr2b基因的表达显著升高，差异有统计学意义。结论NLRP3能负调控巨噬细胞对创伤弧菌的吞噬功能，其作用机制可能与调控吞噬相关基因Fgr2b的表达有关。

简介：摘要目的研究重组创伤弧菌溶细胞素膜成孔多肽(rMpf)对小鼠J774A.1巨噬细胞株的细胞毒性作用及对活性氧簇(ROS)和溶酶体的影响，并了解其作用巨噬细胞后的胞内定位情况。方法利用大肠埃希菌表达系统表达rMpf，体外作用于小鼠J774A.1巨噬细胞株。流式细胞术分析rMpf对小鼠J774A.1巨噬细胞株的细胞毒性作用及对ROS和溶酶体的影响。激光共聚焦显微镜观察其胞内定位情况。结果低浓度(4 μg/ml)rMpf作用小鼠J774A.1巨噬细胞后，其存活率、胞内ROS和溶酶体无明显变化。20和60 μg/ml rMpf作用J774A.1巨噬细胞后，细胞存活率、ROS和溶酶体均明显下降。此外，rMpf能进入J774A.1巨噬细胞并定位于细胞质和细胞核，且呈剂量依赖性。结论rMpf能进入细胞质和细胞核，并且抑制胞内ROS水平、破坏溶酶体最终导致巨噬细胞功能受损。本研究为进一步了解创伤弧菌溶细胞素及类似膜成孔毒素的细胞毒性结构域功能和分子致病机制提供了实验依据。

简介：摘要LC3相关吞噬作用(LC3-associated phagocytosis, LAP)是一种特殊的吞噬作用，存在于吞噬和自噬两条途径的交叉点。LAP过程的标志性事件是微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ型(LC3Ⅱ)被募集到单层膜结构的吞噬体表面。LAP途径依赖于含RUN域半胱氨酸丰富域苄氯素1相互作用蛋白(RUN domain and cysteine-rich domain containing, Beclin 1-interacting protein, Rubicon)及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的功能，最终导致LC3相关吞噬体(LAPosome)与溶酶体结合，来消化降解内容物。近几年越来越多研究发现，LAP在病原微生物包括真菌、细菌等感染宿主后发挥着重要作用。多数情况下LAP是宿主抵御和降解病原微生物感染的重要途径，但是部分病原微生物在宿主内可以有效逃避LAP的攻击，甚至可以利用LAPosome成为其定居和复制的场所。本研究总结了近几年LAP在宿主抵御病原微生物感染及疾病发生发展方面的最新进展。

简介：摘要调节性B细胞(regulatory B cells, Bregs)是一群具有免疫调节功能的细胞，通过抑制过度炎症反应从而调节疾病进展，是一种在免疫功能紊乱等状态下发挥重要作用的保护性细胞。本文就其来源、功能、作用机制及其在自身免疫性疾病、感染及肿瘤方面的相关研究进展作一综述。

简介：摘要目的在创伤弧菌血流感染小鼠模型中探讨TNF-α敲除对宿主肝脏和脾脏中性粒细胞的影响。方法(1)选取6～8周龄C57BL/6J品系的TNF-α敲除(TNF-α－/－)小鼠和野生型(WT)小鼠，随机分成WT未感染组、WT感染组、TNF-α－/－未感染组和TNF-α－/－感染组，每组各6只。小鼠腹腔注射2×108 CFU/200 μl的创伤弧菌CGMCC1.1758构建血流感染模型，未感染组小鼠腹腔注射等量的无菌PBS。(2)感染4 h后，分别分离肝脏免疫细胞和脾细胞，流式细胞术检测中性粒细胞百分比、数量和存活率，以及活性氧簇(ROS)和细胞吞噬功能变化，分析创伤弧菌血流感染对小鼠肝脏和脾脏中性粒细胞mTOR信号通路的影响。结果(1)与WT未感染组相比，WT感染组肝脏与脾脏中性粒细胞百分比和数量均显著增加。与WT感染组相比，TNF-α－/－感染组中仅肝脏中性粒细胞百分比和数量增加明显，而脾脏中性粒细胞差异无统计学意义。(2)与WT感染组比，TNF-α－/－感染组肝脏中性粒细胞吞噬功能增强，而脾脏中性粒细胞吞噬功能并无明显改变。(3)与WT未感染组相比，WT感染组肝脏与脾脏中性粒细胞存活率均降低，ROS水平明显上升；与WT感染组相比，TNF-α－/－感染组肝脏与脾脏中性粒细胞存活率均增加，但细胞ROS水平明显下降。(4)WT感染组肝脏与脾脏中性粒细胞中p-AKT(S473)水平均低于WT未感染组，TNF-α－/－感染组肝脏中性粒细胞中p-AKT(S473)水平低于WT感染组，脾脏中性粒细胞中p-AKT(S473)水平高于WT感染组。与WT感染组相比，WT未感染组p-4E-BP1(T37/46)水平差异无统计学意义，TNF-α－/－感染组肝脏中性粒细胞中p-4E-BP1(T37/46)水平降低而脾脏中性粒细胞中p-4E-BP1(T37/46)水平差异无统计学意义。结论TNF-α对创伤弧菌血流感染后小鼠肝脏和脾脏中性粒细胞有不同影响，主要对肝脏中性粒细胞的募集、吞噬功能改变及mTOR信号强度有重要影响。