简介：摘要目的探讨microRNA－31(miR－31)在高糖诱导足细胞上皮－间充质转分化(EMT)中的机制。方法将体外培养的人肾小球足细胞按不同糖浓度分为低糖组(LG)、高渗组(HM)和高糖组(HG)；按是否转染过表达miR－31(miR－31 mimics)分为miR－31过表达组(miR－31m组)、阴性对照组(miR－NC组)和脂质体组(Mock组)；按照是否转染沉默低氧诱导因子－1抑制剂(FIH－1)及沉默miR－31(miR－31 inhibitor)分为FIH－1沉默组(si－FIH－1组)、miR－31沉默组(miR－31i组)、FIH－1沉默+miR－31沉默组(si－FIH－1+miR－31i组)及阴性对照组(NC组)。采用实时聚合酶链式反应(qRT－PCR)和Western blot检测各组细胞低氧诱导因子－1抑制剂(FIH－1)、转化生长因子－β1(TGF－β1)、α－平滑肌肌动蛋白(α－SMA)的mRNA和蛋白表达水平；采用双荧光素酶靶标实验验证miR－31与FIH－1基因的靶向关系。结果与LG和HM组比较，HG组miR－31表达水平显著升高(F＝146.8，P<0.01)，FIH－1蛋白表达水平明显下降(F＝54.23，P<0.01)，而TGF－β1及α－SMA蛋白表达水平均显著升高(F＝360.6，P<0.01；F＝193.7，P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验分析结果显示，FIH－1是miR－31的靶基因。si－FIH－1与miR－31i共同转染时，可以恢复si－FIH－1或miR－31i单独转染导致的FIH－1、TGF－β1、α－SMA的mRNA及蛋白表达变化。结论miR－31靶向调控FIH－1促进足细胞EMT，抑制miR－31的表达可减轻高糖诱导的足细胞EMT。

简介：摘要目的探索Klotho抑制高糖条件下肾小管上皮细胞（HK-2）微RNA（miR）-21a-5p表达而减轻肾小管上皮细胞间质转分化的机制。方法将体外培养的HK-2分为低糖组、高糖组（30 mmol/L葡萄糖）和高渗组（30 mmol/L甘露醇）；按照高糖刺激时间分为4组：0、12、24、48 h；按照是否转染pcDNA3.1-Klotho/pcDNA3.1-Vector及转染后低或高糖刺激分为4组：低糖组、高糖组、高糖+pcDNA3.1-Vector组和高糖+pcDNA3.1-Klotho组；按照转染si-Klotho/si-Negative后是否加入二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）和低或高糖刺激分为6组：低糖+si-Klotho组、低糖+si-Negative组、低糖+si-Klotho+PDTC组、高糖+si-Klotho组、高糖+si-Negative组和高糖+si-Klotho+PDTC组。染色质免疫共沉淀（CHIP）分组：低糖+pcDNA3.1-Vector组、高糖+pcDNA3.1-Vector组和高糖+pcDNA3.1-Klotho组。采用实时聚合酶链式反应检测各组细胞miR-21a-5p水平；Western blot检测Klotho、纤连蛋白（FN）、α-平滑肌动蛋白（α-SMA）、核因子κB（NF-κB）、NF-κB 抑制因子（IκB）表达水平；CHIP检测NF-κB对miR-21a-5p启动子的直接作用。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果与低糖组比较，高糖组Klotho蛋白表达下降至60.8%（P<0.05），miR-21a-5p表达升高至3.203倍（P<0.01），FN和α-SMA表达明显升高。随着高糖刺激时间延长，Klotho蛋白表达水平逐渐降低，而miR-21a-5p表达水平逐渐升高，呈现相反的变化趋势（P<0.05）。高糖组核蛋白NF-κB和miR-21a-5p表达水平是低糖组的2.934倍和3.154倍（均P<0.01），而过表达Klotho后，NF-κB和miR-21a-5p表达水平分别下降至高糖组的50.18%和49.24%（均P<0.05）。CHIP结果显示：高糖+pcDNA3.1-Vector组与低糖+pcDNA3.1-Vector组相比，NF-κB和miR-21a-5p启动子结合显著增加至3.121倍（1.000±0.742比3.121±0.115，P<0.01）；而过表达Klotho能显著减弱高糖引起的NF-κB和miR-21a-5p启动子结合至54.21%（3.121±0.115比1.692±0.073，P<0.01）。结论Klotho可抑制高糖条件下肾小管上皮细胞NF-κB和miR-21a-5p启动子的结合，使miR-21a-5p表达减少，从而减轻肾小管上皮细胞间质转分化。

简介：摘要朗格汉斯细胞组织细胞增生症（Langerhans cell histiocytosis，LCH）是以CD1a+/CD207+髓样树突状细胞克隆增殖为特征的组织细胞性疾病。根据受累部位和范围的不同，LCH的临床表现及治疗差异均较大。本文对1例累及垂体和甲状腺的成人LCH进行临床特点分析，以探索累及垂体和甲状腺的成人LCH的临床特点，为临床诊治该类疾病提供借鉴。