简介：摘要目的评估傅里叶红外光谱技术（FTIR）对临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌（CREC）同源性分析的能力。方法26株CREC为2018年从来自全国9个省、市（湖南、吉林、浙江、福建、上海、安徽、重庆、云南、河南）的样本中分离，FTIR检测菌株在900~1 200 cm-1区域的红外吸收光谱，使用欧式距离和平均连接聚类方法进行多变量分析；并对菌株进行全基因组测序（WGS）分析单核苷酸多态性（SNP）。结果FTIR将26株CREC分为14个红外光谱（IR）型，且相同IR型的菌株均属于同一序列（ST）型。相比WGS对CREC的聚类分析，FTIR的聚类分析结果一致性为92.3%（24/26）。结论FTIR对CREC同源性的区分能力具有较高准确性，且操作简便快速，具有良好的临床推广前景。

简介：摘要目的探讨脂多糖(LPS)刺激下NUFIP-1介导核糖体自噬在树突细胞(DCs)凋亡中的作用及意义。方法将培养的树突细胞系DC2.4分为空白对照组及LPS刺激6、12、24、48、72 h组(n=5)，LPS各亚组加入1 μg/mL LPS培养相应时间。采用Western blot检测各组细胞NUFIP-1及自噬相关蛋白p62和LC3B表达水平，激光共聚焦显微镜检测NUFIP-1在细胞中的表达与定位及其分别与Lyso-tracker、LC3B共定位情况。将载有沉默空载体NS及沉默慢病毒载体NUFIP-1 siRNA感染DC2.4 (n=3)，以1 μg/mL LPS刺激24 h，应用流式细胞分析术检测细胞凋亡情况，并采用Western blot检测凋亡相关蛋白包括胱天蛋白酶(cleaved-caspase-3)和Bcl-2表达水平。多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，采用LSD-t法进一步进行组间两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。结果Western blot结果提示，LPS刺激不同时间(6、12、24、48、72 h)后DC2.4中NUFIP-1蛋白表达水平呈现先升高后下降趋势，其中LPS 24 h组NUFIP-1表达水平显著高于空白对照组[空白对照组：(0.6786 ± 0.0820)；LPS 24 h组：(1.4830 ± 0.1170)，P<0.01]。同时，LPS 24 h组p62表达水平显著低于空白对照组[空白对照组：(0.9087 ± 0.1235)；LPS 24 h组：(0.3113 ± 0.5571)，P<0.01]。LPS 24 h组LC3B-I向LC3B-Ⅱ的转化显著高于空白对照组[空白对照组：(0.5542 ± 0.1248)；LPS 24 h组：(2.5310 ± 0.3119)，P<0.01]。激光共聚焦显微镜观察显示，NUFIP-1主要定位于细胞核及核周，LPS刺激后其荧光强度于6 h至24 h呈时间依赖性增强，而刺激48、72 h明显减弱。同时，NUFIP-1与Lyso-tracker及LC3B的共定位较空白对照组显著增强。采用慢病毒感染技术感染NUFIP-1 siRNA可显著下调DC2.4 NUFIP-1表达水平，与空白对照组及空载体组比较分析，差异有统计学意义[空白对照组：(0.6627 ± 0.1707)；空载体组：(0.6966 ± 0.1107)；siRNA组：(0.1428 ± 0.0296)，P<0.05]。流式细胞分析术显示，NUFIP-1 siRNA感染组在LPS刺激后较空白对照LPS 24 h组及空载体LPS 24 h组DC2.4凋亡率显著升高[空白对照LPS 24 h组：(47.91%±1.006%)；空载体LPS 24 h组：(70.26% ± 1.011%)；siRNA LPS 24 h组：(80.23% ± 2.094%)，P<0.01]。Western blot分析进一步证实，NUFIP-1 siRNA感染组相较空白对照组及空载体组在LPS刺激下DC2.4凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达显著增强[空白对照LPS 24 h组：(0.4748 ± 0.0876)；空载体LPS 24 h组：(0.2849 ± 0.0418)；siRNA LPS 24 h组：(0.9733 ± 0.0525)，P<0.01]，抗凋亡蛋白Bcl-2表达则明显下调[空白对照LPS 24 h组：(0.7810 ± 0.0490)；空载体LPS 24 h组：(0.8292 ± 0.0729)；siRNA LPS 24 h组：(0.3957 ± 0.0838)，P<0.05]。结论LPS刺激后DC2.4中NUFIP-1介导核糖体自噬明显活化，且对DC2.4凋亡具有显著保护效应。

简介：摘要目的探讨血必净注射液(简称血必净)与其组分芍药苷对脓毒症大鼠脾脏调节性T细胞(Treg)免疫功能及大鼠生存率的影响。方法(1)免疫磁珠法分离提纯3只9～12周龄SD雄性大鼠(鼠龄、品系、性别下同)脾脏CD4＋CD25＋Treg和CD4＋T细胞。按照随机数字表法(分组方法下同)将CD4＋CD25＋Treg分为空白对照组、单纯CD3/CD28组、单纯内毒素/脂多糖(LPS)组、LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组，每组6孔。单纯CD3/CD28组、单纯LPS组、LPS＋血必净组及LPS＋芍药苷组细胞采用加入1.25 μg CD3和2.5 μg CD28的含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养24 h后，单纯LPS组、LPS＋血必净组及LPS＋芍药苷组细胞加入1 μg/mL LPS 1 μL，并立即在LPS＋血必净组细胞中加入5 mg/mL血必净1 μL、在LPS＋芍药苷组细胞中加入80 μmol/L芍药苷1 μL，均继续培养72 h。空白对照组细胞加入等体积含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养96 h。采用流式细胞术检测CD4＋CD25＋Treg的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA－4)及叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达、CD4＋CD25＋Treg凋亡率，酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测CD4＋CD25＋Treg培养上清液中白细胞介素10(IL－10)水平。将CD4＋T细胞分为空白对照′组、单纯CD3/CD28′组、单纯LPS′组、LPS＋血必净′组、LPS＋芍药苷′组，每组6孔，加入前述相应组处理后CD4＋CD25＋Treg共培养72 h后，流式细胞术检测CD4＋T细胞增殖活性，ELISA法检测CD4＋T细胞培养上清液中IL－4水平。(2)将120只大鼠分成假手术组、单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组和脓毒症＋芍药苷组，每组30只。单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组和脓毒症＋芍药苷组大鼠采取盲肠结扎穿孔术构建脓毒症模型，假手术组大鼠单纯开腹模拟手术。脓毒症＋血必净组大鼠术后经尾静脉注射血必净4 mL/kg，2次/d；脓毒症＋芍药苷组大鼠术后经尾静脉注射芍药苷978 μg，2次/d。分别观察并记录术后1、2、3、4、5、6、7 d的4组大鼠生存率，并绘制Kaplan－Meier生存曲线。对数据行单因素方差分析、LSD－t检验，对生存曲线行Log－rank(Mantel－Cox)检验。结果(1)与空白对照组比较，单纯LPS组CD4＋CD25＋Treg的CTLA－4、Foxp3表达水平明显升高(t＝27.19、17.00，P<0.01)，细胞培养上清液中IL－10水平明显升高(t＝40.76，P<0.01)。与单纯LPS组比较，LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组CD4＋CD25＋Treg的CTLA－4、Foxp3表达水平明显降低(tLPS＋血必净组＝31.03、11.27，tLPS＋芍药苷组＝5.79、5.64，P<0.01)，细胞培养上清液中IL－10水平明显降低(t＝15.49、4.20，P<0.01)。与空白对照组比较，单纯LPS组CD4＋CD25＋Treg凋亡率明显下降(t＝6.02，P<0.01)；与单纯LPS组比较，LPS＋血必净组、LPS＋芍药苷组CD4＋CD25＋Treg凋亡率明显增加(t＝20.32、8.60，P<0.01)。(2)与单纯CD3/CD28′组比较，单纯LPS′组CD4＋T细胞增殖率明显降低(t＝22.47，P<0.01)，细胞培养上清液中IL－4水平明显升高(t＝3.51，P<0.01)。与单纯LPS′组比较，LPS＋血必净′组、LPS＋芍药苷′组CD4＋T细胞增殖率均明显增加(t＝16.31、11.48，P<0.01)，细胞培养上清液中IL－4水平无明显变化。(3)假手术组、单纯脓毒症组、脓毒症＋血必净组、脓毒症＋芍药苷组大鼠术后7 d生存率分别为100%(30/30)、30%(9/30)、57%(17/30)、47%(14/30)。与单纯脓毒症组比较，脓毒症＋血必净组大鼠术后7 d内生存率明显升高(χ2＝4.34，P<0.05)，脓毒症＋芍药苷组大鼠术后7 d内生存率无明显变化。结论血必净及其组分芍药苷均能逆转脓毒症介导的大鼠Treg免疫抑制功能上调及凋亡抵抗，并改善效应性T细胞增殖能力。芍药苷对脓毒症大鼠生存率的改善效应明显弱于血必净。

简介：摘要：现阶段，在社会的发展进程中，电力工程作为社会的重要构成，很大程度上提升了人们生产生活的水平，然而随着城市化进程的加快，新形势背景下的电气工程已经难以满足现阶段社会对电气工程的需要，就要求相关企业实现电气工程的自动化管理。但是鉴于自动化管理具有很强的技术性，电气工程涉及面又十分广泛，所以其自动化管理模式的构建就还存在一些难点，制约着自动化管理的落实。该文就在新形势背景下从电气工程入手，探讨其自动化管理模式的构建以及应用。