简介：摘要目的观察骨膜微环境下，脂肪脱细胞基质(DAM)在体内向成脂或成骨方向分化的情况。方法2020年6—12月，将人体吸脂术获取的脂肪组织在全军整形外科研究所制备为DAM，选取6只4～6周雄性SD大鼠，按照同等初始体积植入到大鼠顶骨骨膜下。术后84 d取材，通过大体观察、组织学染色、免疫荧光染色观察DAM支架材料成脂和成骨分化情况；非标记定量蛋白质谱检测DAM中成骨相关蛋白。结果大体观察显示，DAM支架材料周围血管化丰富。HE和Masson染色观察到DAM脂肪再生和血管化现象，同时OCN免疫荧光染色证实，DAM少部分向成骨方向分化。质谱筛选出了成骨分化相关蛋白。结论骨膜微环境下，DAM主要向脂肪组织方向分化，但少部分具有向成骨方向分化的潜能，可能与DAM中含有部分成骨相关蛋白有关。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-Exo)通过调控Notch信号通路促进移植脂肪血管化的机制。方法获取1例2020年8月在空军军医大学第一附属医院整形外科行腹部脂肪抽吸术的30岁健康女性的废弃脂肪，处理后将脂肪颗粒分别移植于12只Balb/c裸鼠背部皮下左、右两侧，每侧注射0.5 ml，建立脂肪移植模型。左侧设为外泌体组，每周以50 μg的BMSC-Exo溶于100 μl PBS溶液中，移植后即刻在脂肪周围多点局部注射，然后每周注射1次，连续4次；右侧设为对照组，于同一时间注射同等剂量的PBS溶液。观测项目：(1)分别在术后4、8周获取2组脂肪移植物组织，用电子天平称其湿重并计算保留率。(2)术后8周，通过HE染色、免疫荧光检测脂肪移植物中脂滴包被蛋白A(Perilipin A)阳性细胞，观察2组脂肪细胞的结构和完整性；(3)术后8周，免疫组织化学法检测脂肪移植物中CD31阳性细胞、计算微血管密度，检测Notch1、Notch4阳性细胞、计算阳性细胞面积比例；(4)术后8周，实时荧光定量PCR检测脂肪移植物中Notch1、Notch4、VEGF mRNA相对表达量。应用Graphad Prism 8.0分析数据，组间比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)术后4、8周，对照组脂肪湿重保留率分别为(41.15±9.68)%和(34.30±6.45)%，外泌体组分别为(61.77±10.98)%和(55.93±5.89)%，均高于对照组(P<0.05)。(2)术后8周，外泌体组较对照组中脂肪细胞结构完整性更好，具有较多的新生毛细血管；外泌体组中有较多的完整Perilipin A阳性脂肪细胞，而对照组中则较少。(3)对照组微血管密度为(4.67±0.57)个，显著小于外泌体组的(13.00±2.00)个(P<0.05)；对照组每视野下Notch1和Notch4阳性细胞面积比例均低于外泌体组[(0.53±0.28)% vs.(1.67±0.11)%，(0.11±0.06)% vs.(1.20±0.24)%，P<0.05]；(4)外泌体组Notch1、Notch4、VEGF mRNA相对表达量分别为1.53±0.20、1.50±0.26、2.56±0.55，均比对照组(1.00+0.00)明显上调(P<0.05)。结论BMSC-Exo可能通过上调VEGF mRNA的表达水平激活Notch信号通路，从而促进移植脂肪血管新生，提高移植脂肪保留率。