简介:摘要目的研究miR-520b在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达,探讨其在TSCC侵袭转移过程中的作用及分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测TSCC组织及细胞系中miR-520b的表达;沉默或过表达TSCC细胞株SCC-9和UM1中miR-520b的表达后,实时荧光定量PCR检测细胞上皮-间质转化(EMT)相关基因表达;Transwell小室验证细胞侵袭转移能力改变;TOP/FO双荧光素酶报告基因系统、实时荧光定量PCR、Western blot等检测miR-520b表达对Wnt/β-catenin信号通路的影响;生物信息学、Western blot及双荧光素酶实验验证miR-520b调控Wnt/β-catenin信号通路的潜在靶基因Dickkopf 1(DKK1)。使用SPSS 21.0软件进行统计学分析,样本均数间比较采用Student′s t检验。结果与正常相邻组织(2.59±1.43)相比,miR-520b相对表达量在TSCC组织中显著上调(5.28 ± 1.63),差异有统计学意义(t = 16.04,P = 0.0005),并且与患者中更具侵袭性的TSCC表型正相关(5.81 ± 0.74 vs. 3.08 ± 0.89,t = 12.11,P = 0.0011);过表达miR-520b促进TSCC细胞侵袭转移(SCC-9:110.8 ± 17.8 vs. 74.7 ± 9.8,tSCC-9 = 32.58,PSCC-9 = 0.0011;UM1:178.8 ± 39.7 vs. 90.3 ± 22.5,tUM1 = 99.67,PUM1 = 0.0002),低表达则相反(SCC-9:74.7 ± 9.8 vs. 30.9 ± 7.8,tSCC-9 = -31.47,PSCC-9 = 0.0024;UM1:90.3 ± 22.5 vs. 35.7 ± 10.6,tUM1 = -37.89,PUM1 = 0.0019);此外,过表达miR-520b可靶向抑制DKK1,进而激活Wnt/β-catenin信号通路,促进TSCC细胞上皮-间质转化。结论MiR-520b在TSCC中高表达,可能通过抑制DKK1增强Wnt/β-catenin信号通路,促进TSCC侵袭转移。