简介：摘要目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、骨形态发生蛋白(BMP)-12基因序贯转染兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的可能性。方法2017年1月至2018年12月，原代培养兔脂肪干细胞(取自新西兰大耳兔颈背部皮下脂肪)，细胞表面抗原CD44、CD49d、CD106检测结合成骨细胞诱导分化对培养的细胞进行鉴定，脂质体介导的方法序贯转染BMP-12和bFGF基因，蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因BMP-12和bFGF蛋白的表达；实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染细胞Ⅰ型胶原和弹性蛋白RNA的表达情况。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，应用单因素方差分析比较组间差异。结果兔脂肪组织中分离出来的脂肪间充质干细胞(ADSCs) CD44、CD49d表达阳性，CD106表达呈阴性。Western blot检测筛选后的ADSCs稳定表达BMP-12(0.229±0.005)和bFGF(0.208±0.019)蛋白(F＝120.221，P<0.05)，差异有统计学意义。双基因转染的ADSCsⅠ型胶原(2.250±0.007，F＝340.103，P<0.05)和弹性蛋白(1.807±0.008，F＝107.314，P<0.05)的mRNA表达最高，差异均有统计学意义。结论pcDNA3.1＋绿色荧光蛋白(GFP)-BMP-12和pcDNA3.1＋红色荧光蛋白(RFP)-bFGF可以促进ADSCs向成纤维细胞分化，可能在组织工程技术修复韧带损伤中具有重要作用。

简介：摘要目的评估自体骨髓间质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）植入联合纤维环缝合修复腰椎间盘髓核摘除术后缺损的有效性和安全性。方法抽取前期5例手术患者自体骨髓血，应用选择性细胞留滞技术将有核细胞富集于明胶海绵颗粒进行BMSCs富集试验。2016年10月至2019年3月收治腰椎间盘突出症患者109例，男61例，女48例，年龄（43.0±9.8）岁（范围24~59岁）。均采用可动式经皮内镜下行髓核摘除术，26例单纯行摘除髓核术（摘除组），39例摘除髓核后缝合纤维环（缝合组）；44例摘除髓核后向椎间盘内植入富集自体BMSCs的明胶海绵颗粒，缝合纤维环（干细胞+缝合组）。记录围手术期情况，评价指标包括疼痛视觉模拟评分（visual analogue scale，VAS）、Oswestry功能障碍指数（Oswestry disability index，ODI）、椎间盘退变Pfirrmann分级、椎间隙高度及椎间盘突出程度，并计算改善率和丢失率。结果BMSCs富集试验结果显示有核细胞粘附倍数为6.4±0.9，目的细胞粘附倍数为4.2±0.6，体外培养后BMSCs生长良好。109例患者手术时间35~55 min，缝合组7例缝合不成功转入摘除组，干细胞+缝合组10例缝合不成功转入单纯干细胞组。切口无红肿，均一期愈合。各组术中出血量、术后引流量和住院时间的差异均无统计学意义。各组术前指标的差异均无统计学意义，术后各组VAS和ODI均较术前明显降低，未发现椎体间融合、异位骨化和感染。18例随访0.5年，91例随访（25.0±5.6）个月（范围1~3年）。末次随访时干细胞+缝合组VAS改善率为81.7%±7.9%，大于摘除组的73.0%±8.9%、缝合组的74.0%±6.9%和干细胞组的75.3%±8.4%；干细胞+缝合组ODI改善率为91.9%±8.8%，大于摘除组的86.2%±8.1%和缝合组的86.4%±5.5%。术后1年时MRI显示椎间盘退变分级摘除组较术前平均增加0.7级，缝合组平均增加0.6级，干细胞+缝合组和单纯干细胞组与术前无明显差异，Pfirrmann分级进展较摘除组和缝合组轻；各组椎间隙高度均较术前降低，干细胞+缝合组椎间隙高度丢失率为17.2%±4.3%，小于摘除组的29.3%±6.3%和缝合组的20.6%±5.7%，缝合组小于摘除组；椎间盘突出程度均较术前降低50%以上，摘除组1例显示突出，但无临床症状。结论自体BMSCs和纤维环缝合修复腰椎间盘髓核摘除术后缺损具有较好的安全性，近期效果良好，可能有助于减缓椎间盘退变。

简介：摘要目的对比个体化改良与常规方案治疗肢体长骨骨巨细胞瘤(GCTB)的临床效果，评估个体化改良方案的可行性。方法回顾性研究。纳入2005年1月—2017年12月内蒙古医科大学第二附属医院和天津医院两个骨肿瘤中心178例手术治疗的四肢长骨GCTB患者的临床资料，男95例、女83例，年龄8～75(35.7±11.7)岁。178例中，2005年1月—2011年12月70例患者设为常规组，其中男39例、女31例，年龄8～68岁，55例采用病灶内常规刮除加骨水泥、异体骨或自体骨填充，15例瘤段切除人工假体重建术；2012年1月—2017年12月108例患者设为改良组，其中男56例、女52例，年龄16～75岁，根据肿瘤发生的部位、Campanacci分级、病理骨折与否，采用95例改进的病灶内磨削术加骨水泥和或异体骨或自体骨填充，13例瘤段切除人工假体(膝关节为改进假体)重建等个体化改良方案。观察并对比两组术后并发症情况、术后复发转移情况及5年累积无复发生存率；末次随访时采用国际骨与软组织肿瘤协会(MSTS)评分标准比较术后两组患者肢体功能。结果178例患者均顺利完成手术。两组基线资料比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。所有患者术后随访24～117(56.9±26.1)个月。(1)术后有15例患者出现并发症，常规组11例(15.7%，11/70)、改良组4例(3.7%，4/108)，常规组患者并发症发生率明显高于改良组，主要发生于瘤段切除关节重建患者，差异有统计学意义(χ2＝7.939，P<0.05)。(2)178例患者中，24例(13.5%)复发。常规组和改良组术后总体复发率分别为22.9%(16/70)和7.4%(8/108)，差异有统计学意义(χ2＝8.691, P<0.05)。常规组中病灶内常规刮除术患者的复发率为27.3%(15/55)，改良组中病灶内扩大刮除术患者的复发率为7.4%(7/95)，差异有统计学意义(χ2＝11.027，P<0.05)；两组瘤段切除重建术患者分别有1例复发，差异无统计学意义(P>0.05)。患者的总复发率13.5%(24/178)，其中桡骨远端和股骨近端复发5例(5/12)。178例患者5年总体累积无复发生存率为90.8%，其中常规组78.5%、改良组91.2%，两组比较差异有统计学意义(χ2＝5.923, P<0.05)。(3)178例患者术后肢体功能MSTS评分为(28.7±2.3)分，常规组和改良组分别为(27.61±3.13)分和(29.33±1.29)分，两组差异有统计学意义(t＝4.365, P<0.01)。两组患者中病灶内刮除的术后MSTS评分均较瘤段切除关节重建术高，差异均有统计学意义(t＝5.620、2.177，P值均<0.05)。结论采用个体化改良方案治疗后GCTB复发率较低，且患者肢体功能佳，瘤段切除联合改良假体重建可以改善肢体功能、降低术后并发症。