简介：摘要目的将聚己内酯(PCL)薄膜与1，1′-双十八烷基-3，3，3′，3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐(DiI)标记的骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养，制备细胞补片。方法取1只清洁级SD大鼠作为实验对象，通过分离培养获得大鼠BMSCs，并进行流式细胞仪鉴定表面标志物。BMSCs培养至3代后，使用DiI染料对BMSCs标记，将DiI标记的BMSCs与PCL制成的薄膜共培养，24 h后在荧光显微镜下观察细胞生长情况，并固定进行电镜扫描，在培养的1、4、7、10 d分别用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD分析。结果BMSCs流式细胞术鉴定：CD90、CD44H强阳性，CD11b/c、CD45阴性。荧光显微镜下，可见DiI标记的BMSCs发红光，呈梭形或多边形。扫描电镜下，PCL薄膜与DiI标记的BMSCs共培养形成的细胞补片，其表面细胞数量多，细胞状态正常。CCK-8测定结果显示第1天吸光度(A)值为0.330±0.025；第4天A值为0.620±0.012，第7天A值为1.033±0.144，第10天A值为1.223±0.133。各时间点A值之间差异有统计学意义(F＝66.441，P<0.05)。结论PCL薄膜可以作为一种DiI标记示踪的支架材料，用于干细胞治疗。

简介：摘要目的观察低氧微环境对小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)与聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[P(3HB-co-4HB)]三维培养形成心肌补片的影响。方法提取mMSCs，将5代mMSCs与P(3HB-co-4HB)三维培养制作成细胞补片，随机分为常氧组和低氧组，用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定细胞增殖；扫描电子显微镜(SEM)观察补片存活、黏附、生长。加入诱导剂5氮杂胞苷，免疫荧光检测两组心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达；通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达，用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组HIF-1α蛋白的表达。采用独立样本均数t检验进行统计学分析。结果CCK-8法测定低氧组吸光度(A)值(0.349±0.038)显著大于常氧组(0.308±0.025)(t＝2.420，P<0.05)，SEM观察到低氧组P(3HB-co-4HB)材料上细胞数量更多，细胞形态正常，黏附牢固。免疫荧光显示低氧组cTnT表达比常氧组更加显著；实时定量PCR观察到低氧组的HIF-1 mRNA表达水平上调(P<0.05)；Western blot检测HIF-1α蛋白相对表达水平低氧组(0.63±0.06)显著高于常氧组(0.47±0.05)(P<0.05)。结论低氧微环境可促进mMSCs在P(3HB-co-4HB)上的黏附、存活、增殖、分化，并且形成一种更有效的心肌补片，这一效应可能与HIF-1α通路的激活有关。