简介：摘要目的观察胰岛素对烧伤后乳鼠心肌细胞的保护作用。方法原代培养出生2 d SD乳鼠心肌细胞，并分为假伤组（Sham组）、烧伤组、胰岛素组和胰岛素活化抑制剂LY294002预处理组（LY组）。制备清洁级3月龄SD大鼠烧伤血清〔30%总体表面积（TBSA）Ⅲ度烫伤大鼠，术后6 h取腹主动脉血清〕诱导的SD乳鼠心肌细胞损伤模型；胰岛素组在细胞培养基中同时加入10%烧伤大鼠血清和10 U/L胰岛素；LY组先加入50 μmol/L的LY294002后30 min，再加入烧伤血清和胰岛素。Sham组仅给予10%假伤大鼠血清（假伤大鼠仅置于37 ℃温水中）。各组细胞继续培养12 h后，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定心肌细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和肌酸激酶（CK）含量；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测心肌细胞肌钙蛋白T（cTnT）蛋白表达；采用Hoechst 33258染色法检测心肌细胞凋亡情况。结果与Sham组比较，经烧伤血清诱导后，心肌细胞发生炎症反应及损伤，表现为TNF-α、IL-6、CK含量升高〔TNF-α（ng/L）：273±48比21±6，IL-6（ng/L）：416±83比44±11，CK（U/L）：1.44±0.24比0.14±0.08，均P<0.01〕，cTnT蛋白表达下调（cTnT/β-actin：0.12±0.04比0.86±0.34，P<0.01），凋亡细胞增多〔（19.1±5.6）%比（5.2±1.3）%，P<0.01〕；胰岛素能够明显减轻烧伤血清诱导的心肌细胞损伤，TNF-α、IL-6和CK含量均较烧伤组明显降低〔TNF-α（ng/L）：105±37比273±48，IL-6（ng/L）：176±77比416±83，CK（U/L）：0.82±0.26比1.44±0.24，均P<0.05〕，且cTnT蛋白表达明显上调（cTnT/β-actin：0.41±0.16比0.12±0.04，P<0.05），凋亡细胞明显减少〔（10.7±3.2）%比（19.1±5.6）%，P<0.05〕；而胰岛素活化抑制剂LY294002能够明显抑制胰岛素对损伤心肌的保护作用。结论在烧伤血清诱导的乳鼠心肌细胞损伤模型中，胰岛素可能通过抗炎、抗损伤和抑制凋亡等发挥细胞保护作用。