简介：无

简介：摘要急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的主要病理生理改变为肺血管内皮屏障被大量破坏、肺水肿、炎性细胞浸润等，严重者可发生难治性低氧血症。细胞焦亡是由天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase）触发、经一类保守的蛋白家族成员Gasdermin D（GSDMD）蛋白介导的细胞程序性坏死，表现为细胞不断胀大直至细胞膜破裂，导致细胞内容物释放进而激活强烈的炎症反应。焦亡在脓毒症导致的ARDS中发挥关键作用。本文主要对细胞焦亡的分子机制以及焦亡与ARDS关系的相关研究进行综述。

简介：摘要目的分析KCNV2相关视锥细胞营养不良患者的基因及临床特征。方法纳入2017年8月至2019年12月在北京协和医院确诊的3个KCNV2基因相关视锥细胞营养不良家系。采集病史及眼科检查结果，包括视力、色觉、彩色眼底照相、眼底自发荧光(FAF)、光相干断层扫描(OCT)、视野和视网膜电图(ERG)。采集患者及其父母外周血5 ml并提取DNA。利用二代测序(NGS)靶向捕获技术，确诊KCNV2基因变异相关视锥细胞营养不良患者，并进行Sanger验证及家系共分离检测。结果本研究中共确定3例来自不同家系的中国汉族KCNV2基因相关视锥细胞营养不良患者，其中2例患者携带复合杂合变异，1例近亲患者携带纯合变异。共确定5种新发致病变异包括p.T121M、p.R244C、p.C199Y、p.M250R和p.L171Pfs*201。3例患者均为男性，年龄分别为25岁、16岁和2岁，均有双眼视力低下和畏光症状，2例患者存在色觉障碍和眼球震颤，呈牛眼征、金箔样反光等特征性眼底表现。FAF显示黄斑区低荧光伴或不伴周围高荧光环，OCT示黄斑区视网膜变薄，感光细胞层萎缩，年龄较大的患者萎缩范围相对较宽，视野显示中心暗点伴或不伴周边视野缺损，ERG显示视锥系统严重受累，表现为明适应反应振幅严重降低，峰时延长，视杆系统受累情况各异，但均可见暗适应特征性a波基底宽大。结论KCNV2相关视锥细胞营养不良患者具有特征性ERG表现。中国患者ERG表现及基因型与国外患者不同。

简介：摘要目的探讨Nm23-H1对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)、侵袭和转移的影响。方法MDA-MB-231接种于6孔板，采用包装对照和Nm23-H1慢病毒感染，构建对照和Nm23-H1过表达细胞系，分别为对照组和Nm23-H1组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平。采用Transwell分析两组细胞侵袭能力；采用异体移植瘤实验分析两组细胞在体内的转移能力。计量数据比较采用t检验。结果对照组细胞Nm23-H1表达水平(0.87±0.18)明显低于Nm23-H1组细胞Nm23-H1蛋白表达水平(2.93±0.25)，差异有统计学意义(t＝5.018，P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(2.41±0.31)明显高于Nm23-H1组细胞A值(1.89±0.28)，差异有统计学意义(t＝4.001，P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(102.38±11.37)个]明显高于Nm23-H1组[(78.12±6.90)个]，差异有统计学意义(t＝3.094，P<0.05)。对照组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-3蛋白表达水平(1.29±0.19)明显高于Nm23-H1组(0.69±0.11)，差异有统计学意义(t＝4.102，P<0.05)。对照组细胞在皮下接种30 d后腋下淋巴结转移数量[(15.22±3.91)个]明显高于Nm23-H1组[(8.73±2.18)个]，差异有统计学意义(t＝3.094，P<0.05)。对照组细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(1.59±0.22、1.02±0.14)明显高于Nm23-H1组(1.04±0.15、0.61±0.12)，差异有统计学意义(t＝3.891、3.409，P<0.05)。对照组细胞E-cadherin蛋白表达水平(0.79±0.11)明显高于Nm23-H1组细胞E-cadherin蛋白表达水平(1.51±0.25)，差异有统计学意义(t＝3.110，P<0.05)。结论Nm23-H1作为一个转移抑制蛋白，可显著抑制乳腺癌细胞EMT、侵袭和转移。

简介：摘要目的评估用内镜超声引导下细针抽吸术(EUS-FNA)于胰腺癌门静脉采血检测循环肿瘤细胞(CTCs)的安全性及有效性。方法该研究为一项前瞻性单中心临床研究，纳入5例胰腺癌患者，行EUS-FNA门静脉采血。以外周血CTCs为对照，采用阴性免疫磁珠联合FISH法和叶酸受体阳性CTCs检测试剂盒检测门静脉血和外周血CTCs的细胞含量。结果5例患者EUS-FNA下门静脉采血均成功。1例出现血液凝集，未能进行CTCs检测。4例患者进行检测，3例门静脉血和外周血检测到CTCs。其中门静脉血CTCs细胞含量为(10.5 ± 4.0) FU/3.7 mL，外周血CTCs含量为(11.4 ± 4.2) FU/3.7 mL，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术中术后无感染、腹腔出血和休克等并发症。结论内镜超声引导下胰腺癌门静脉血CTCs测定是一项安全可行的方法，可有助于胰腺癌早期转移的预估和治疗方案的选择。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA 1(lncRNA OSER1-AS1)对肾癌ACHN细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其对微小RNA(microRNA，miR)-612的调控作用。方法2017年1月至2020年3月，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织、癌旁组织中OSER1-AS1、miR-612的表达量；体外培养肾癌细胞ACHN，分别将OSER1-AS1小分子干扰RNA(si-OSER1-AS1)及其阴性对照(si-NC)、miR-612寡核苷酸模拟物(miR-612 mimics)及阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、si-OSER1-AS1与miR-612特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照(anti-miR-NC)、si-OSER1-AS1与miR-612特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-612)转染至ACHN细胞；采用RT-qPCR法检测细胞中OSER1-AS1、miR-612的表达量；采用噻唑蓝(MTT)、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭能力；双荧光素酶报告实验检测OSER1-AS1、miR-612的靶向关系；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21蛋白表达量。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果肾癌组织OSER1-AS1的表达水平(1.00±0.08比3.37±0.28)高于癌旁组织(t＝52.113，P<0.05)，miR-612的表达水平(1.00±0.06比0.47±0.04)低于癌旁组织(t＝47.062，P<0.05)；si-OSER1-AS1组细胞活力(0.66±0.05比0.31±0.03)与Cyclin D1(0.63±0.05比0.25±0.02)、MMP-2(0.82±0.07比0.35±0.03)、MMP-9(0.76±0.06比0.28±0.03)蛋白水平低于si-NC组(t＝18.007、21.169、18.514、21.466，P<0.05)，si-OSER1-AS1组迁移细胞数[(115.56±9.52)个比(55.99±5.59)个]、侵袭细胞数[(93.41±6.09)个比(46.05±4.35)个]低于si-NC组(t＝16.188、18.984，P<0.05)，si-OSER1-AS1组p21蛋白水平(0.15±0.02比0.57±0.05)高于si-NC组(t＝23.398，P<0.05)；miR-612组细胞活力(0.68±0.05比0.39±0.03)与Cyclin D1(0.66±0.05比0.28±0.03)、MMP-2(0.85±0.06比0.46±0.03)、MMP-9(0.78±0.05比0.34±0.02)蛋白水平低于miR-NC组(t＝14.920、19.551、17.441、24.512，P<0.05)，miR-612组迁移细胞数[(118.76±9.87)个比(64.39±4.65)个]、侵袭细胞数[(99.65±9.12)个比(53.57±3.67)个]低于miR-NC组(t＝14.950、14.062，P<0.05)，miR-612组p21蛋白水平(0.14±0.02比0.51±0.04)高于miR-NC组(t＝24.820，P<0.05)；双荧光素酶报告实验证实OSER1-AS1可靶向结合miR-612；抑制miR-612表达可明显逆转干扰OSER1-AS1对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论干扰OSER1-AS1可通过上调miR-612的表达从而抑制肾癌ACHN细胞增殖、迁移及侵袭。

简介：摘要目的开发线上交互式细胞病理读片培训方案，并评估该方案在提高内镜医师胰腺内镜超声引导下细针抽吸术（endoscopic ultrasound-guided fine-needle aspiration，EUS-FNA）细胞病理诊断能力中的价值。方法纳入2018年8月—2019年8月在南京鼓楼医院消化内科行EUS-FNA的194例胰腺实性占位患者的细胞刷片，从中共采集5 500张细胞病理图片，由高年资细胞病理医师对每张图片中的细胞类别进行标注，用于搭建线上交互式细胞病理读片培训学习和测试平台。5名无病理基础的内镜医师受邀参与本培训，比较培训前后内镜医师鉴别诊断癌和非癌的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值，评价线上交互式细胞病理读片培训方案在提高内镜医师细胞病理诊断能力中的作用。结果本研究成功搭建供内镜医师线上学习和测试的交互式细胞病理读片培训平台。培训前内镜医师诊断癌和非癌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确率分别为0.55（95%CI：0.53~0.58）、0.32（95%CI：0.30~0.35）、0.43（95%CI：0.41~0.45）、0.44（95%CI：0.41~0.47）和0.43（95%CI：0.42~0.45）。经过培训，以上指标分别为0.96（95%CI：0.95~0.97）、0.70（95%CI：0.68~0.73）、0.74（95%CI：0.72~0.76）、0.95（95%CI：0.94~0.96）和0.81（95%CI：0.80~0.83），较培训前均得到显著提升（P<0.001）。结论线上交互式细胞病理读片培训方案可提高内镜医师对胰腺细胞病理的认识水平和诊断能力，有助于内镜医师在EUS-FNA过程中实施快速现场评估，提高EUS-FNA的诊断效能。

简介：摘要目的研究miR-539-5p对雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2B阿帕鲁胺（ARN-509）敏感性及恶性表型的影响及相关机制。方法获取去势抵抗性前列腺癌、去势敏感性前列腺癌及良性前列腺组织，并选取处于对数生长期C4-2B前列腺癌细胞，传代扩增后，采用miR-539-5p质粒对C4-2B细胞系进行转染，共分为空白组，转染组（miR-539-5p质粒）及对照组（对照质粒）。qPCR检测组织及3组细胞中miR-539-5p、AR及热休克因子结合蛋白1（heat shock factor binding protein 1，HSBP1）基因的表达含量；Western blot检测3组细胞雄激素受体AR及HSBP1的蛋白表达含量；Transwell实验检测3组细胞的侵袭迁移能力；CCK-8法检测3组细胞的增殖能力及雄激素受体拮抗剂ARN-509的半抑制浓度（IC50）；平板克隆实验检测3组细胞的克隆形成能力。结果组织qPCR提示：良性前列腺组织、前列腺癌去势敏感患者肿瘤组织及前列腺癌去势抵抗患者肿瘤组织miR-539-5p的表达分别为0.29±0.04、0.17±0.02、0.07±0.01，AR的表达分别为0.13±0.02、0.28±0.04、0.79±0.11，HSBP1的表达分别为0.20±0.03、0.38±0.04、0.72±0.11。相比良性前列腺组织和前列腺癌组织，前列腺癌去势抵抗患者的组织中AR及HSBP1基因的表达含量较高，miR-539-5p表达较低（P<0.001）。细胞qPCR提示：空白组、对照组及转染组miR-539-5p表达分别为1.00±0.09、1.07±0.11、7.19±0.51，AR的表达分别为1.00±0.10、1.03±0.14、0.51±0.08，HSBP1的表达分别为1.00±0.10、0.96±0.12、0.97±0.11。转染组细胞的miR-539-5p表达显著高于对照组及空白组，AR基因表达含量明显低于对照组及空白组，HSBP1基因表达水平无显著差异。Western blot显示：空白组、对照组及转染组AR的蛋白表达分别为1.00±0.10、1.12±0.22、0.72±0.16，HSBP1的蛋白表达分别为1.00±0.10、0.94±0.18、0.48±0.11，转染组细胞的AR及HSBP1的蛋白表达明显少于对照组及空白组。Transwell实验显示：转染组侵袭及迁移细胞明显少于对照组及空白组。CCK-8法及平板克隆实验结果显示：转染组细胞的增殖能力及克隆形成数明显少于对照组及空白组。与空白组及对照组细胞相比，转染组细胞ARN-509的IC50值显著降低。结论miR-539-5p可能通过干扰HSBP1的翻译水平，抑制细胞的恶性表型及去势抵抗。