简介：摘要增生性瘢痕(HS)一般与病理性伤口愈合和慢性炎症有关，瘢痕可能会引起疼痛、瘙痒、挛缩，影响患者的生理、心理和生活质量。成纤维细胞(FB)的过度增长促使合成分泌大量胶原纤维是形成HS的主要原因。目前针对HS的治疗方法较多，如手术治疗、药物治疗、激光治疗等，但手术治疗复发的可能性较大，激素药物与抗肿瘤药物联合注射治疗也会带来严重的不良反应。近年来国内外学者对中药通过信号传导通路预防治疗瘢痕进行了较多研究。本文回顾近年文献，就中药对HS预防治疗的研究进展作一综述。

简介：摘要目的探讨微小RNA-627（miR-627）在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法采用实验研究方法。收集2019年10月—2020年1月于北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者［男2例、女4例，年龄（34±11）岁］的增生性瘢痕组织、同期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者［男3例、女3例，年龄（35±13）岁］行皮瓣移植手术后剩余的正常皮肤组织，采用实时荧光定量反转录PCR法检测miR-627的mRNA表达。取增生性瘢痕组织，培养第3~5代成纤维细胞（Fb），经鉴定后用于后续实验。取增生性瘢痕Fb，分为miR-627阴性对照组、miR-627模拟物组和miR-627抑制物组，分别转染对应的序列，转染后0（即刻）、12、24、36、48 h，用噻唑蓝法检测细胞活力；转染后24 h，用流式细胞术检测细胞凋亡情况；转染后24 h，用蛋白质印迹法检测胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）、Ⅰ型胶原和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达水平。取2批增生性瘢痕Fb，一批分为IGF-Ⅰ野生型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ野生型+miR-627模拟物组，另一批分为IGF-Ⅰ突变型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ突变型+miR-627模拟物组，分别转染对应的序列，转染后48 h，采用荧光素酶报告基因检测试剂盒分别检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达，并计算两者比值，反映IGF-Ⅰ的活性。取增生性瘢痕Fb，分为miR-627阴性对照组、单纯miR-627模拟物组和miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组，分别转染对应的序列，转染后24 h，采用蛋白质印迹法检测IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达水平。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验及χ2检验。结果增生性瘢痕组织中miR-627的mRNA表达量为0.47±0.06，显著低于正常皮肤组织中的1.12±0.23（t=15.090，P<0.01）。转染后12、24、36、48 h，miR-627模拟物组细胞活力明显低于miR-627阴性对照组（t=9.918、34.370、13.580、61.550，P<0.05或P<0.01），miR-627抑制物组细胞活力明显高于miR-627阴性对照组（t=4.722、8.616、13.330、14.000，P<0.05或P<0.01）。转染后24 h，与miR-627阴性对照组的细胞凋亡率（8.42±0.47）%相比，miR-627模拟物组的（10.89±0.35）%显著升高（t=7.301，P<0.01），miR-627抑制物组的（5.00±0.22）%显著下降（t=11.510，P<0.01）。转染后24 h，与miR-627阴性对照组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达相比，miR-627模拟物组明显下降（t=25.470、5.282、7.415，P<0.01），miR-627抑制物组明显升高（t=15.930、8.857、9.763，P<0.01）。转染后48 h，IGF-Ⅰ野生型+miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ的荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.463±0.061，明显低于IGF-Ⅰ野生型+miR-627阴性对照组的0.999±0.011（t=16.852， P<0.01）；IGF-Ⅰ突变型+miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ的荧光素酶/肾荧光素酶比值为0.934±0.021，与IGF-Ⅰ突变型+miR-627阴性对照组的0.930±0.023相近（t=1.959，P>0.05）。转染后24 h，单纯miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达量1.623±0.070、1.363±0.042、1.617±0.025均较miR-627阴性对照组的2.723±0.045、2.147±0.067、2.533±0.055明显降低（t=22.831、7.280、26.220，P<0.01），miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原、α-SMA的蛋白表达量2.477±0.102、1.760±0.046、2.387±0.049均较单纯miR-627模拟物组明显升高（t=3.830、8.286、3.436，P<0.05或P<0.01）。结论人增生性瘢痕中miR-627表达下调；miR-627可通过靶向抑制IGF-Ⅰ的表达从而抑制人增生性瘢痕Fb的增殖，促进Fb的凋亡。

简介：摘要目的探讨微小RNA-296（miR-296）在兔增生性瘢痕中的表达及对人成纤维细胞（HFb）的作用。方法采用实验研究方法。将12只雌雄不限成年新西兰长耳兔按完全随机法分为正常对照组和瘢痕组，每组6只。瘢痕组根据文献制作兔耳增生性瘢痕模型，正常对照组兔不行任何处理。于瘢痕组建模后60 d，采用苏木精-伊红染色法观察2组兔耳瘢痕/皮肤组织中成纤维细胞（Fb）生长与排列，采用实时荧光定量反转录PCR法检测2组兔耳瘢痕/皮肤组织中miR-296和转化生长因子β1（TGF-β1）的mRNA表达量，另对miR-296与TGF-β1mRNA表达量的相关性进行Pearson回归分析。取2批HFb，第1批分为TGF-β1野生型+miR-296阴性对照组和TGF-β1野生型+miR-296模拟物组，第2批分为TGF-β1突变型+miR-296阴性对照组和TGF-β1突变型+miR-296模拟物组，分别转染对应的序列。转染后48 h，采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测每组细胞TGF-β1的荧光素酶和肾荧光素酶的表达，以其比值反映基因表达水平。取2批HFb，每批细胞均分为miR-296阴性对照组和miR-296模拟物组，分别转染对应序列。第1批细胞转染后0（即刻）、12、24、36、48 h，采用噻唑蓝法检测细胞增殖情况。第2批细胞转染后24 h，采用蛋白质印迹法检测细胞中TGF-β1和Ⅰ型胶原蛋白表达情况。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、独立样本t检验。结果瘢痕组建模后60 d，瘢痕组兔耳瘢痕组织中Fb过度增生且排列紊乱，正常对照组兔耳皮肤组织中Fb生长与排列无异常；瘢痕组兔耳瘢痕组织中miR-296的mRNA表达量（0.65±0.11）显著低于正常对照组兔耳皮肤组织（1.19±0.12，t=5.175，P<0.01），瘢痕组兔耳瘢痕组织中TGF-β1的mRNA表达量（1.47±0.06）显著高于正常对照组兔耳皮肤组织（1.10±0.03，t=12.410，P<0.01）。Pearson回归分析显示，12只兔耳瘢痕/皮肤组织中miR-296和TGF-β1的mRNA表达量呈明显负相关（F=7.278，P<0.05）。转染后48 h，TGF-β1野生型+miR-296模拟物组细胞TGF-β1的基因表达明显低于TGF-β1野生型+miR-296阴性对照组（t=35.190，P<0.01），2个TGF-β1突变型组TGF-β1基因表达相近（P>0.05）。miR-296模拟物组细胞增殖能力在转染后12、24、36、48 h明显低于miR-296阴性对照组（t=3.275、11.980、10.460、17.260，P<0.05或P<0.01）。转染后24 h，miR-296阴性对照组细胞TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达量均明显高于miR-296模拟物组（t=3.758、29.390，P<0.05或P<0.01）。结论兔增生性瘢痕中miR-296表达下调，miR-296能够通过下调TGF-β1的表达抑制HFb的增殖和Ⅰ型胶原蛋白的表达。

简介：摘要目的探讨齐墩果酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长和迁移的生物学功能的影响。方法收集北部战区总医院整形外科9例患者手术切除的瘢痕疙瘩组织标本，并进行体外培养成纤维细胞。采用不同浓度的齐墩果酸处理成纤维细胞，实验分成3组：对照组加入0.9%NaCl；5 μmol/L齐墩果酸组加入5 μmol/L齐墩果酸；10 μmol/L齐墩果酸组加入10 μmol/L齐墩果酸。3组均进行噻唑蓝实验(MTT)检测细胞的增殖状况；流式细胞实验检测细胞周期；膜联蛋白V碘化丙啶(AV-PI)染色检测细胞的凋亡；Transwell实验检测齐墩果酸对细胞的迁移作用；蛋白质印迹法和Real-time PCR实验分别检测相关蛋白表达和mRNA水平。所有实验均设置3个复孔。3组间数据进行方差分析比较，两两比较使用LSD-t检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果3组MTT结果发现齐墩果酸能够抑制细胞的增殖，作用24 h时，5 μmol/L和10 μmol/L齐墩果酸组细胞增殖(吸光度A值)分别为0.66±0.02、0.46±0.02，对照组为0.78±0.00，3组间比较F＝114.4，P<0.001；5、10 μmol/L齐墩果酸组分别与对照组比较，差异有统计学意义(t＝5.94、P<0.001，t＝15.60、P<0.001)。流式细胞实验结果发现，细胞周期G1/S期的转导受到阻滞，5 μmol/L和10 μmol/L齐墩果酸组G1期细胞百分比分别为(72.17±2.04)%和(82.02±1.18)%，与对照组[(62.47±4.95)%]比较差异有统计学意义(t＝3.14、P＝0.030，t＝6.38、P<0.001)。AV-PI染色发现5 μmol/L齐墩果酸组(0.9%)和10 μmol/L齐墩果酸组(3.4%)细胞的凋亡比例比对照组(0.4%)明显增加，3组间比较F＝119.6，P<0.001，5、10 μmol/L齐墩果酸组分别与对照组比较差异有统计学意义(t＝4.39、P<0.001, t＝13.44、P<0.001)。Transwell实验发现5 μmol/L齐墩果酸组(57.13±2.65)和10 μmol/L齐墩果酸组(42.15±2.55)细胞的迁移数量比对照组(72.27±3.32)明显下调，3组间比较F＝101.3、P<0.001，5、10 μmol/L齐墩果酸组分别与对照组比较差异有统计学意义(t＝6.50、P<0.001，t＝14.41、P<0.001)。蛋白质印迹法实验发现齐墩果酸可以抑制细胞周期素D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和基质金属蛋白酶-2(MMP2)的表达：5 μmol/L齐墩果酸与对照组比较t＝8.70、P<0.001，t＝5.00、P＝0.040，t＝12.41、P<0.001，t＝10.46、P<0.001；10 μmol/L齐墩果酸与对照组比较t＝31.61、P<0.001，t＝23.17、P<0.001，t＝12.11、P<0.001，t＝44.52、P<0.001。Real-time PCR反应发现Cyclin D1、Bcl-2、Bax、MMP2的mRNA表达水平也受到了抑制，5 μmol/L齐墩果酸与对照组比较t＝5.42、P<0.001，t＝3.11、P＝0.040，t＝16.11、P<0.001，t＝11.71、P<0.001；10 μmol/L齐墩果酸与对照组比较t＝51.78、P<0.001，t＝30.89、P<0.001，t＝10.64、P<0.001，t＝17.10、P<0.001。结论齐墩果酸作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞24 h后能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖和迁移并诱导其凋亡，10 μmol/L的齐墩果酸作用强于5 μmol/L,齐墩果酸可以用于防治瘢痕疙瘩。