简介：摘要目的观察沉默非染色体结构维护凝缩蛋白Ⅰ复合体G亚基(NCAPG)基因对膀胱癌细胞增殖的影响。方法采用RNA干扰技术下调T24细胞中NCAPG的表达水平，采用细胞计数实验和流式细胞术分别检测细胞增殖活性，进一步采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹检测细胞周期基因的表达变化。采用单因素方差分析比较均值，统计方法为最小显著性差异法(LSD)和邓肯多重范围检验(Duncan)。结果NS-1和NS-2组的沉默效率分别为(84.6±4.4)%和(86.3±1.1)%。与NC组比较，NS-1组与NS-2组增殖速率明显减缓。相对增殖率(120 h)由(530.0±35.2)%降低至(398.9±11.0)%和(407.3±19.2)%，差异有统计学意义(NS-1组F＝71.388，P<0.05，NS-2组F＝46.435，P<0.05)。G0/G1期细胞比例由(53.7±0.6)%上升至(60.7±1.1)%和(59.8±1.6)%，差异有统计学意义(NS-1组F＝86.691，P< 0.05，NS-2组F＝34.791，P<0.05)。沉默NCAPG基因后，受试细胞内周期相关蛋白转录和翻译均明显下调。结论沉默NCAPG基因抑制人膀胱癌细胞增殖，其机制与细胞周期阻滞有关。

简介：摘要目的探讨原苏木素A调控结直肠癌细胞生物学行为及机制。方法结直肠癌SW480细胞分别用不同浓度(0、80、160、320、640和1 280 μmol/L)原苏木素A处理筛选有效抑制浓度。SW480细胞根据转染载体分成原苏木素A+Anti-miR-NC组(转染inhibitor control后1 280 μmol/L的原苏木素A处理)、原苏木素A+Anti-miR-431组(转染miR-431 inhibitor后1 280 μmol/L的原苏木素A处理)，细胞计数试剂-8法检测细胞增殖，克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，Transwell小室检测细胞迁移和侵袭，流式细胞术检测细胞凋亡差异，免疫印迹法检测细胞中E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测微小核糖核酸-431(miR-431)表达。两组间比较行t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。结果320、640和1 280 μmol/L原苏木素A处理后SW480细胞吸光度(A)值显著低于0、80、160 μmol/L(0.50±0.04、0.37±0.03、0.28±0.02、0.65±0.06、0.63±0.04和0.62±0.05，F＝120.991，P<0.01)。320、640和1 280 μmol/L原苏木素A处理后SW480细胞A值显著降低。320、640、1 280 μmol/L原苏木素A处理后的SW480细胞克隆形成数目(65.01±5.17、49.18±4.69、33.05±4.56比78.62±4.11，F＝161.813，P<0.01)及bcl-2蛋白表达(0.41±0.04、0.29±0.02、0.20±0.03比0.59±0.05，F＝189.500，P<0.01)显著低于0 μmol/L原苏木素A处理组，细胞凋亡率[(8.62±0.52)%、(14.78±1.25)%、(21.08±1.73)%比(4.15±0.16)%，F＝403.486，P<0.01]和bax蛋白表达(0.28±0.03、0.37±0.02、0.48±0.05比0.18±0.03，F＝125.298，P<0.01)显著高于0 μmol/L原苏木素A处理组。320、640、1 280 μmol/L原苏木素A处理后的SW480细胞迁移数目(172.42±14.97、130.89±12.08、105.50±10.82比224.56±31.58，F＝65.715，P<0.01)、侵袭数目(150.43±12.94、114.98±11.33、82.02±9.98比182.34±15.76，F＝105.513，P<0.01)和Vimentin蛋白表达(0.42±0.04、0.30±0.03、0.21±0.03比0.65±0.05，F＝221.479，P<0.01)显著低于0 μmol/L原苏木素A处理组。320、640、1280 μmol/L原苏木素A处理后的SW480细胞miR-431水平高于0 μmol/L原苏木素A处理组(1.56±0.10、1.92±0.12、2.45±0.18、1.00±0.12，F＝188.136，P<0.01)。原苏木素A+Anti-miR-431组SW480细胞A值(0.45±0.04比0.29±0.03)、克隆形成数目(47.04±4.11比34.25±2.78)、bcl-2蛋白表达(0.45±0.05比0.19±0.02)、细胞迁移(165.24±13.06比104.23±9.84)、侵袭数目(147.20±13.94比81.96±8.54)和Vimentin表达(0.38±0.03比0.20±0.02)高于原苏木素A+Anti-miR-NC组，细胞凋亡率[(12.05±1.23)%比(21.84±1.66)%]、细胞中E-cadherin(0.32±0.04比0.56±0.05)和bax蛋白表达(0.24±0.05比0.46±0.04)低于原苏木素A+Anti-miR-NC组，差异有统计学意义(t＝9.600、7.733、14.216、14.484、10.307、11.193、11.972、11.245、14.977，P<0.01)。结论原苏木素A可能通过上调miR-431调控SW480细胞生物学行为。