简介：摘要目的研究探讨miR-9是否在调控糖原合成酶激酶（GSK）-3β表达，影响Wnt/β-catenin通路活性和OA发病中起作用。方法采集50例我院接受OA全膝关节置换术的患者软骨组织和外伤性截肢后的正常软骨组织，比较miR-9、GSK-3β的表达。双荧光素酶基因报告试验验证miR-9与GSK-3β之间是否存在靶向调控关系。建立OA大鼠模型，ELISA法检测关节腔液中Hyp含量，试剂盒检测caspase-3活性，检测软骨组织中miR-9、GSK-3β的表达差异。将OA模型大鼠分成3组：假手术组（Sham组）、OA+antagomiR-NC组、OA+antagomiR-9组，EILSA检测关节腔液中Hyp含量，试剂盒检测caspase-3活性，流式检测细胞软骨组织中细胞凋亡，qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-9、GSK-3β、β-catenin、COL2A1的表达量。2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，再以Bonferroni法进行2组间的比较。结果miR-9表达量对照组为（1.09±0.25），OA组为（2.86±0.25）（t=24.30，P<0.01）。GSK-3β mRNA表达量对照组为（0.99±0.11），OA组为（0.53±0.10）（t=15.40，P<0.01），miR-9与GSK-3β之间存在靶向调控作用关系。大鼠软骨组织中miR-9的表达量Sham组为（1.00±0.21），OA组为（2.61±0.36）（t=9.462，P<0.01）。大鼠软骨组织中GSK-3β mRNA的表达量Sham组为（1.00±0.18），OA组为（0.52±0.09）（t=5.842，P<0.01）。大鼠关节腔液中Hyp含量Sham组为（10±3） ng/ml，OA组为（50±8） ng/ml（t=11.015，P<0.01）。大鼠软骨组织中caspase-3活性Sham组为（1.00±0.19），OA组为（2.43±0.36）（t=8.605，P<0.01）。大鼠软骨组织中miR-9的表达量OA+antagomiR-NC组为（2.86±0.31），OA+antagomiR-9组为（1.67±0.19）（F=105.2，P<0.01）。大鼠软骨组织中GSK-3β mRNA的表达量OA+antagomiR-NC组为（0.41±0.09），OA+antagomiR-9组为（0.81±0.09）（F=49.32，P<0.01）。大鼠关节腔液中Hyp含量OA+antagomiR-NC组为（52.3±6.8） ng/ml，OA+antagomiR-9组为（30.3±3.4） ng/ml （F=119.7，P<0.01）。大鼠软骨组织中caspase-3活性OA+antagomiR-NC组为（2.22±0.23），OA+antagomiR-NC组为（1.43±0.14）（F=72.55，P<0.01）。与OA+antagomiR-NC组相比，OA+miR-antagomiR-9组大鼠软骨组织中β-catenin、GSK-3β、COL2A1蛋白的表达升高，细胞凋亡减少。结论miR-9的表达升高在降低GSK-3β表达，增强Wnt/β-catenin通路活性，促进软骨基质降解、破坏和OA发病中起作用，抑制miR-9表达则可起到减轻OA的保护作用。