简介：摘要目的研究lncRNA FGD5-AS1对肾癌细胞增殖、侵袭的影响及分子机制。方法2020年7月至2021年2月，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测FGD5-AS1在肾癌细胞中的表达。以表达最高的肾癌细胞为对象，分别转染小干扰siRNA-FGD5-AS1质粒（实验组）和阴性对照质粒（对照组）。qRT-PCR检测FGD5-AS1和细胞因子信号转导抑制因子6（suppressor of cytokine signaling 6，SOCS6）mRNA的表达。Western blotting检测SOCS6和NF-κB信号通路蛋白表达。二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）实验和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭。结果肾癌细胞株中FGD5-AS1表达均高于近端肾小管细胞（P＜0.01），FGD5-AS1在ACHN细胞中表达最多（P＜0.01）。对照组和实验组FGD5-AS1表达分别为（1.01±0.09）和（0.20±0.03），差异有统计学意义（t=8.46，P＜0.01）；SOCS6 mRNA的表达分别为（0.33±0.05）和（1.02±0.13），差异有统计学意义（t=5.05，P＜0.01）。与对照组相比，实验组SOCS6蛋白表达增加，NF-κB信号通路蛋白表达均明显降低，实验组ACHN细胞增殖能力降低（均P＜0.05）。对照组和实验组的侵袭细胞数分别为（80.49±10.50）个和（32.29±8.03）个，差异有统计学意义（t=3.65，P＜0.05）。结论FGD5-AS1在肾癌细胞株中表达增加，下调FGD5-AS1表达可通过正向调控SOCS6基因表达抑制肾癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-6516-5p在肾癌细胞系中的表达及调控肾癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞系和正常近端肾小管上皮细胞系中miR-6516-5p的表达。用脂质体法分别将miR-6516-5p模拟物和无意义序列(NC)瞬时转染至miR-6516-5p表达最低的肾癌细胞，即miR-6516-5p组和NC组。qRT-PCR检测转染细胞miR-6516-5p的表达。CCK-8法和Transwell迁移实验检测转染细胞的增殖和迁移。生物信息学软件和双荧光素酶基因报告实验分别预测和验证miR-6516-5p对靶基因的调控。qRT-PCR和Western blotting法分别检测转染细胞中靶基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-6516-5p在肾癌细胞系中的表达均明显低于正常近端肾小管上皮细胞(P<0.01)，786-O细胞中miR-6516-5p的表达最低(F＝27.69，P<0.01)。NC组和miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p的表达分别为1.01±0.08和9.91±1.16，与NC组比较，miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p表达明显增加(t＝7.63，P<0.01)。上调miR-6516-5p能显著抑制786-O细胞的增殖(P<0.05)。NC组和miR-6516-5p组细胞迁移数分别为(85.65±8.77)个和(28.05±6.20)个，过表达miR-6516-5p可抑制786-O细胞的迁移(t＝5.36，P<0.01)。miR-6516-5p的靶基因可能是鸟氨酸脱羧酶1(ODC1)，miR-6516-5p能显著抑制野生型ODC1-3′UTR的荧光素酶活性(t＝9.83，P<0.01)。上调miR-6516-5p可降低786-O细胞中ODC1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论miR-6516-5p在肾癌细胞系中表达降低，miR-6516-5p通过靶向ODC1抑制肾癌786-O细胞的增殖和迁移，miR-6516-5p可能成为肾癌潜在的分子靶点。

简介：摘要目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ZFPM2-AS1在膀胱癌组织和细胞株中的表达，观察下调ZFPM2-AS1对膀胱癌细胞迁移和增殖的影响并探讨其分子机制。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测51对膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株(J82、5637、BIU-87、T24)及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中ZFPM2-AS1的表达。选取表达最高的膀胱癌细胞，分别转染小干扰siRNA-ZFPM2-AS1质粒和阴性对照质粒，定义为实验组和对照组。qRT-PCR检测两组细胞ZFPM2-AS1的表达。Transwell迁移实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测两组细胞迁移能力和增殖能力。qRT-PCR检测两组细胞中上游移码突变体1(UPF1)mRNA的表达。Western blot检测两组细胞中UPF1和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路蛋白的表达。结果膀胱癌组织中ZFPM2-AS1的表达量明显高于癌旁组织(P<0.01)，膀胱癌细胞株中ZFPM2-AS1的表达量明显高于人正常膀胱上皮细胞(P<0.01)，BIU-87细胞中ZFPM2-AS1的表达量最高(P<0.01)。与对照组相比，实验组BIU-87细胞中ZFPM2-AS1表达量明显降低[(1.01±0.06) vs (0.16±0.04)，t＝12.28，P<0.01]。与对照组相比，实验组BIU-87细胞迁移能力降低(P<0.05)，从第2天开始BIU-87细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与对照组相比，实验组BIU-87细胞中UPF1 mRNA表达量明显降低[(1.00±0.02) vs (0.28±0.04)，t＝15.49，P<0.01]。Western blot结果提示，实验组BIU-87细胞中UPF1蛋白表达量降低(P<0.05)，mTOR、GRB2、IRS1和p-PI3K等mTOR信号通路蛋白表达量降低(P<0.05)。结论ZFPM2-AS1在膀胱癌组织和细胞株中高表达，下调ZFPM2-AS1可抑制BIU-87细胞的迁移能力和增殖能力，其分子机制可能与抑制UPF1基因表达有关。

简介：摘要目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ZFPM2-AS1在膀胱癌组织和细胞株中的表达，观察下调ZFPM2-AS1对膀胱癌细胞迁移和增殖的影响并探讨其分子机制。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测51对膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株(J82、5637、BIU-87、T24)及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中ZFPM2-AS1的表达。选取表达最高的膀胱癌细胞，分别转染小干扰siRNA-ZFPM2-AS1质粒和阴性对照质粒，定义为实验组和对照组。qRT-PCR检测两组细胞ZFPM2-AS1的表达。Transwell迁移实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测两组细胞迁移能力和增殖能力。qRT-PCR检测两组细胞中上游移码突变体1(UPF1)mRNA的表达。Western blot检测两组细胞中UPF1和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路蛋白的表达。结果膀胱癌组织中ZFPM2-AS1的表达量明显高于癌旁组织(P<0.01)，膀胱癌细胞株中ZFPM2-AS1的表达量明显高于人正常膀胱上皮细胞(P<0.01)，BIU-87细胞中ZFPM2-AS1的表达量最高(P<0.01)。与对照组相比，实验组BIU-87细胞中ZFPM2-AS1表达量明显降低[(1.01±0.06) vs (0.16±0.04)，t＝12.28，P<0.01]。与对照组相比，实验组BIU-87细胞迁移能力降低(P<0.05)，从第2天开始BIU-87细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与对照组相比，实验组BIU-87细胞中UPF1 mRNA表达量明显降低[(1.00±0.02) vs (0.28±0.04)，t＝15.49，P<0.01]。Western blot结果提示，实验组BIU-87细胞中UPF1蛋白表达量降低(P<0.05)，mTOR、GRB2、IRS1和p-PI3K等mTOR信号通路蛋白表达量降低(P<0.05)。结论ZFPM2-AS1在膀胱癌组织和细胞株中高表达，下调ZFPM2-AS1可抑制BIU-87细胞的迁移能力和增殖能力，其分子机制可能与抑制UPF1基因表达有关。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)COX10-AS1在肾癌组织和细胞系中的表达及其对肾癌细胞增殖和迁移的影响。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测经病理确诊为肾癌组织和癌旁组织的手术标本、肾癌细胞系(786-O、CaKi-1、A498、ACHN)和正常肾小管上皮细胞系(HK-2)中COX10-AS1的表达。以表达最低的ACHN细胞为研究对象，分为对照组和实验组，对照组细胞转染载有无意义序列的阴性对照质粒，实验组细胞转染载有COX10-AS1表达序列的质粒。qRT-PCR检测两组细胞中COX10-AS1的表达水平，MTS法和细胞划痕实验检测ACHN细胞的增殖和迁移能力。qRT-PCR检测两组细胞中MFN2 mRNA的表达水平，免疫印迹法(Western blotting)检测两组细胞中MFN2、Ras-NF-κB信号通路蛋白的表达情况。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果肾癌组织COX10-AS1表达明显低于癌旁组织(P<0.01)，肾癌细胞系COX10-AS1表达明显低于肾小管上皮细胞(P<0.05)，ACHN细胞中COX10-AS1的表达最低(P<0.01)，上述差异均具有统计学意义。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞中COX10-AS1的表达明显增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞增殖活力明显降低，细胞迁移能力明显降低，差异均具有统计学意义(P<0.01)。与对照组细胞相比，实验组ACHN细胞中MFN2 mRNA的表达明显增加(P<0.01)，MFN2蛋白表达明显增加(P<0.01)，Ras-NF-κB信号通路蛋白表达明显降低(P<0.05)，上述差异均具有统计学意义。结论COX10-AS1在肾癌组织和细胞系中表达降低，COX10-AS1可能通过促进MFN2基因的表达，抑制ACHN细胞的增殖和迁移能力。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)PEBP1P2在肾细胞癌组织中的表达及对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测51例肾细胞癌组织及肾细胞癌细胞株中PEBP1P2的表达。以PEBP1P2表达最低的A498细胞为转染对象，设转染PEBP1P2质粒的细胞为PEBP1P2组，转染阴性对照质粒的细胞为NC组。qPCR检测两组细胞PEBP1P2的表达。MTT法和Transwell迁移实验检测肾细胞癌细胞的增殖能力和迁移能力。qPCR和Western blotting法分别检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10(CARD10)基因及NF-κB通路蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用LSD-t检验。结果肾细胞癌组织中PEBP1P2的表达低于癌旁组织(t＝4.89，P<0.01)。肾细胞癌细胞中PEBP1P2的表达低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01)。PEBP1P2组和NC组A498细胞中PEBP1P2表达分别为(11.01±1.26)和(1.06±0.19)，PEBP1P2组明显高于NC组(t＝7.81，P<0.01)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(t＝3.65，P<0.05)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞中CARD10基因的表达(t＝6.83，P<0.01)，抑制NF-κB信号通路蛋白的转导。结论PEBP1P2在肾细胞癌组织表达明显降低，过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞的增殖和迁移能力，其分子机制可能是PEBP1P2通过下调CARD10基因表达抑制NF-κB信号通路转导。