简介:摘要目的探究肝细胞核因子1α(HNF1α)通过葡萄糖转运蛋白(GLUT)调控肾脏葡萄糖重吸收的机制。方法构建小鼠HNF1α表达载体,将重组质粒转染人胚肾HEK293T细胞和人肾小管上皮细胞HK2中过表达HNF1α,将HNF1α siRNA和GLUT2 siRNA转染入HEK293T细胞,采用流式细胞仪检测荧光葡萄糖类似物2-NBDG被细胞吸收的情况。采用Western印迹法检测HNF1α基因沉默后对GLUT2表达的影响。通过实时定量PCR检测HNF1α下游靶基因如GLUT2、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)、胰岛素诱导基因1(INSIG1)等的mRNA水平,通过共聚焦免疫荧光检测GLUT2在肾上皮细胞的定位情况,使用荧光素酶报告基因和Western印迹法检测HNF1α对GLUT2的转录激活能力。通过凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测HNF1α与GLUT2的结合作用。结果过表达HNF1α摄取2-NBDG的细胞比例明显高于对照组(P<0.01),HNF1α和GLUT2基因沉默后细胞对2-NBDG吸收作用减弱,HNF1α基因沉默后GLUT2表达减少。与对照组相比,过表达HNF1α使得肾脏包括GLUT2在内的有关糖转运基因表达水平上升(P<0.01)。过表达HNF1α显著增加GLUT2转录活性,干涉HNF1α可下调GLUT2转录活性。此外,HNF1α可与GLUT2的启动子直接结合。结论HNF1α通过直接结合GLUT2促进其表达,进而调节肾源细胞对葡萄糖重吸收作用。
简介:摘要目的探讨头孢类抗生索和溴己新联合盐酸氨溴索治疗老年2型糖尿病患者合并肺炎的应用效果。方法选择2016年6月-2017年11月老年2型糖尿病患者合并肺炎患者90例根据治疗方法分组。两组均给予药物和胰岛素控制血糖,在此基础上,对照组给予单一头孢类抗生索和溴己新治疗,观察组则给予头孢类抗生索和溴己新联合盐酸氨溴索治疗。比较两组老年2型糖尿病患者合并肺炎控制率;退热时间、肺部啰音消失时间、咳嗽咯痰消失时间、住院时间;治疗前后患者炎症指标、肺功能指标、生存质量特异性量表DSQL评分。结果观察组老年2型糖尿病患者合并肺炎控制率高于对照组,P<0.05;观察组退热时间、肺部啰音消失时间、咳嗽咯痰消失时间、住院时间短于对照组,P<0.05;治疗前两组炎症指标、肺功能指标、生存质量特异性量表DSQL评分相近,P>0.05;治疗后观察组炎症指标、肺功能指标、生存质量特异性量表DSQL评分优于对照组,P<0.05。结论头孢类抗生索和溴己新联合盐酸氨溴索治疗老年2型糖尿病患者合并肺炎的应用效果确切,可有效控制感染,改善肺功能和生活质量,缩短疗程,值得推广应用。
简介:摘要目的在原核系统中表达流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)头部蛋白并进行血清学分析。方法将H1N1和H3N2型流感病毒的HA头部蛋白编码基因克隆到pET-22b(+)原核表达质粒中,通过IPTG诱导,在大肠埃希菌BL21中获得含有HA头部与His-Tag的融合蛋白rH1N1-HA和rH3N2-HA。SDS-PAGE分析IPTG诱导前后的融合蛋白,验证表达的准确性,Western blot验证重组蛋白的表达。纯化重组蛋白,多剂次免疫家兔,获得针对H1N1-HA和H3N2-HA头部的多克隆抗体。同时,重组蛋白免疫BALB/c小鼠,评价其免疫原性。结果rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白在小鼠体内诱导了滴度高于40的血凝抑制抗体,可作为一种保护性抗原。rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白制备的多克隆抗体,可作为Western blot、ELISA等免疫学应用的重要材料。结论本研究制备的HA头部蛋白可作为一种保护性抗原,在小鼠体内诱导保护性抗体。HA头部制备的多克隆抗体,可用于甲型流感病毒的免疫学和血清学研究。
简介:摘要目的研究2018—2019年上海市社区肿瘤患者营养风险现状及影响因素。方法通过上海市肿瘤登记报告系统,采用随机整群抽样的方法,于2018年10月—2019年1月,从上海市静安区14个社区中采用简单随机的方法抽取4个社区(彭浦新村街道、彭浦镇、江宁路街道和曹家渡街道)为研究现场,纳入符合标准的所有恶性肿瘤和中枢神经系统良性肿瘤病例为研究对象。采用上海市加强公共卫生体系建设三年行动计划(2015—2017年)社区居民肿瘤等慢性状况生存健康管理项目问卷收集研究对象的社会人口学特征、恶性肿瘤既往史、身心评估、营养需求及认知情况,并采用营养不良通用筛查工具开展营养风险筛查。共发放问卷4 396份,剔除无效问卷9份,最终获得有效问卷3 310份,问卷合格率为99.73%。采用多因素logistic回归模型分析社区肿瘤患者营养风险发生的相关因素。结果3 310例对象年龄为(64.05±13.02)岁,男性1 467例(44.32%),营养风险发生率为12.84%(425/3 310)。多因素logistic回归分析结果显示,与男性、肿瘤部位为其他和无身体疼痛相比,女性(OR=1.53,95%CI:1.23~1.92),头颈部恶性肿瘤(OR=1.42,95%CI:1.07~1.90)、气管、支气管和肺恶性肿瘤(OR=1.93,95%CI:1.43~2.61)、肝、胆道和胰腺(OR=2.11,95%CI:1.21~3.65)、食管和胃(OR=6.04,95%CI:4.31~8.46),有身体疼痛(OR=1.39,95%CI:1.02~1.89)者营养风险发生率较高。结论上海市社区肿瘤患者营养风险发生率较高,且营养风险发生情况与性别、肿瘤部位和疼痛等因素有关。