简介：   摘要：目的：探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体miRNA介导TNF-α通过NF-κB信号通路对BMSCs成骨分化的影响。方法：将MC3T3-E1细胞株分对照组（正常培养的MC3T3-E1细胞株）、BMSCs-EXOS组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-EXOS共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics共同培养）、BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）及BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组（MC3T3-E1细胞株与BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor共同培养）。采用qRT-PCR方法检测各组细胞miR-326表达；茜素红染色定量分析矿化；碱性磷酸酶染色检测分化；免疫印迹检测各组细胞ALP、OPG、BMP2、TNF-α及NF-κB蛋白水平。结果：与对照组相比，BMSCs-EXOS组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-EXOS组及BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组组间比较无意义（P＞0.05），与BMSCs-miR-326-EXOS-NC- mimics组相比，BMSCs-miR-326-EXOS-mimics组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平升高，TNF-α及NF-κB蛋白水平降低（P＜0.05），BMSCs-miR-326-EXOS-NC inhibitor组无意义（P＞0.05），BMSCs-miR-326-EXOS inhibitor组miR-326 mNRA表达、茜素红染色定量、ALP活性、ALP、OPG、BMP2蛋白水平降低，TNF-α及NF-κB蛋白水平升高（P＜0.05）。结论：骨髓间充质干细胞源性外泌体miR-326可通过抑制TNF-α及NF-κB蛋白而促进BMSCs成骨分化。