简介：摘要目的探讨胃癌组织中肿瘤相关性成纤维细胞分泌胞外体中微小RNA(miR)-374a-5p的表达及其临床意义。方法新鲜胃癌组织分离肿瘤相关成纤维细胞，提取胞外体，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胞外体中miR-374a-5p的表达水平，分析miR-374a-5p的表达水平与胃癌患者临床病理特征和预后的关系。数据分析采用t检验、χ2检验，Kaplan-Meier生存曲线法及Cox比例风险模型。结果胃癌胞外体中miR-374a-5p的表达水平高于正常人(2.571±0.213比1.244±0.125，t＝7.663，P＝0.011)，其高表达与胃壁浸润深度(T1，T2/T3，T4高表达，25/45，P＝0.019)、淋巴结转移(无/有淋巴结转移高表达，19/51，P＝0.045)、肿瘤部位(近端/远端胃癌高表达，28/42，P＝0.008)、远处转移(无/有远处转移高表达，47/23，P＝0.022)、临床分期(早期/进展期高表达，9/61，P＝0.023)及生存时间(高/低表达平均生存时间，37.8个月/48.1个月，P＝ 0.001)等均相关，是影响胃癌预后独立因素(P＝0.000)。结论胃癌胞外体中miR-374a-5p表达升高可促进胃癌的发展并影响预后。

简介：摘要目的探讨肿瘤相关性成纤维细胞分泌胞外体增强胃癌干细胞化疗耐药。方法收集2019年1月新鲜胃癌组织，从中分离出新鲜胃癌组织中分离肿瘤相关成纤维细胞，收集其条件培养基，提取胞外体，分为条件培养基组、胞外体组和对照组，体外成球实验和体内成瘤实验观察加入条件培养基或胞外体条件下，5-氟尿嘧啶对胃癌干细胞成球能力、成瘤能力和肿瘤生长速度的影响。蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt信号通路的主要蛋白β-连环蛋白(β-catenin)和Wnt2。采用t检验。结果体外成球实验和体内成瘤实验显示，在加入条件培养基或胞外体条件下，5-氟尿嘧啶对胃癌干细胞成球率[(2.90±0.25)%、(1.40±0.21)%，t＝8.318，P<0.05；(3.40±0.34)%、(1.39±0.16)%，t＝3.324，P<0.05]、成瘤能力[(483.36±39.15)、(185.25±12.31) mg，t＝14.713，P<0.05；(572.62±47.39)、(188.36±13.19) mg，t＝18.412，P<0.05]和肿瘤生长速度[(622.45±51.06)、(235.32±28.25) mm3，t＝14.168，P<0.05；(702.45±65.31)、(255.39±20.47) mm3，t＝13.308，P<0.05]均明显高于对照组，差异均有统计学意义。体外实验中加入胞外体后β-catenin和Wnt2表达明显增强，而胞外体抑制剂GW4869处理后β-catenin和Wnt2明显减弱(0.61±0.07、0.28±0.06；0.58±0.05、0.24±0.03)，差异有统计学意义(t＝5.284、6.380，P<0.05)。结论肿瘤相关成纤维细胞可通过胞外体增强胃癌干细胞的耐药性，机制可能与增强Wnt信号通路有关。