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  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miR)-143靶向激酶对胆囊癌细胞增殖和转移的影响及其分子机制。方法选取2018年6月到2020年6月我院行胆囊癌手术切除的94例胆囊癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析组织中miR-143表达水平;采用荧光定量PCR分析正常胆囊上皮细胞株、胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD细胞miR-143表达水平;将体外培养的GBC-SD细胞分为对照组(以携带空载的慢病毒感染)和miR-143组(以携带miR-143的慢病毒感染),采用荧光定量PCR分析miR-143表达水平;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;将两组细胞尾静脉注射建立胆囊癌血行转移模型,检测两组细胞在小鼠肺内形成肿瘤的能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-143的靶基因;采用试剂盒检测两组细胞胞内乳酸水平;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白及肿瘤转移蛋白表达水平;计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-143表达水平(1.04±0.13)明显高于胆囊癌组织(0.51±0.11),差异有统计学意义(t=3.891,P<0.05)。正常胆囊细胞株HGBEC miR-143表达水平(1.25±0.14)明显高于胆囊癌细胞SGC-996和GBC-SD(0.60±0.11、0.67±0.13),差异有统计学意义(t=3.317、3.157,P<0.05)。对照组吸光度(A)值(1.93±0.17)明显高于miR-143组(1.27±0.14),差异有统计学意义(t=3.193,P<0.05)。对照组细胞肺内成瘤数量[(16.39±3.18)个]明显高于miR-143组[(8.84±2.16)个],差异有统计学意义(t=4.107,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶显示HK-Ⅱ是miR-143的靶基因。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(1.29±0.11)明显高于miR-143组(0.87±0.10),差异有统计学意义(t=3.108,P<0.05)。对照组细胞HK-Ⅱ表达水平(2.09±0.16)明显高于miR-143组(1.48±0.12),差异有统计学意义(t=2.816,P<0.05)。对照组细胞胞内乳酸水平[(1.95±0.17) mmol/L]明显高于miR-143组[(1.03±0.21) mmol/L],差异有统计学意义(t=4.996,P<0.05)。结论miR-143通过靶向调控胆囊癌细胞HK-Ⅱ表达水平,影响肿瘤细胞糖酵解水平,进而调节胆囊癌细胞增殖和转移等过程。

  • 标签: 微小RNA 胆囊癌 己糖激酶 增殖 转移