简介：摘要目的探索不同长度poly(A)尾对mRNA体外表达的影响以及含poly(A)尾转录模板在大肠埃希菌中的传代稳定性。方法设计并构建含38、60、103、125 nt和60 nt+6 nt间隔序列+60 nt(简称126 nt)poly(A)尾的模板质粒，利用单酶切将其线性化并以此作为转录模板进行体外转录反应制备增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)-mRNA。将含有不同长度poly(A)尾的EGFP-mRNA转染293T细胞，流式细胞术检测EGFP表达情况。将poly(A)尾长度为125 nt和126 nt的模板质粒分别转化至大肠埃希菌TransStbl3感受态细胞以及Top10感受态细胞中，各挑取7个单克隆进行培养并提取质粒，质粒经双酶切后进行毛细管电泳检测。分别从中选取3个测序正确的单克隆于37℃条件下进行连续传代，每两代提取一次质粒，双酶切后进行毛细管电泳检测。同时将poly(A)尾长度为125 nt的两组单克隆再分别于30℃条件下进行连续传代，每两代提取一次质粒并进行双酶切鉴定和毛细管电泳检测。结果成功构建了含不同长度poly(A)尾的转录模板。流式细胞术结果显示，poly(A)尾长度为103 nt和125 nt的模板质粒荧光表达明显高于poly(A)尾长度为38 nt与60 nt的模板质粒。poly(A)尾长度为126 nt的模板质粒荧光表达显著高于其他组。poly(A)尾长度为125 nt的模板质粒转化TransStbl3感受态细胞和Top10感受态细胞后稳定序列的百分比分别为76%和91%，37℃条件下连续传代均可稳定传代至第4代，30℃条件下连续传代可分别稳定传代至第16代和第10代。poly(A)尾长度为126 nt的模板质粒转化TransStbl3感受态细胞和Top10感受态细胞后稳定序列的百分比分别为95%和48%，37℃条件下连续传代均可稳定传代至第12代。结论mRNA中poly(A)尾的长度和组成对目的蛋白的表达均有影响，在poly(A)尾中添加长度为6 nt的间隔序列以及30℃低温培养均有助于增加模板质粒的传代稳定性，为mRNA疫苗体外转录模板的设计和生产制备提供参考。

简介：摘要目的探讨综合护理在脑卒中吞咽障碍患者中的应用效果。方法将2015年6月-2017年8月在我科收治的78例脑卒中吞咽障碍患者随机分为两组，每组各39例，对照组患者按神经内科护理常规进行护理，观察组在常规护理基础上予以健康宣教、心理护理、康复训练等综合护理干预，比较两组患者干预后的效果。结果观察组患者总有效率为92.31%，高于对照组的74.36%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论综合护理干预对脑卒中吞咽障碍患者护理效果满意，有利于患者吞咽功能的恢复。

简介：

简介：摘要目的探讨振动排痰机在ICU危重患者中排痰的临床效果。方法我们随机选取了40例血氧饱和度(SpO2)低于90%的患者，分成实验组和对照组各20例。实验组应用振动排痰机排痰，对照组采用手扣法对患者进行排痰，在胸部听诊、SpO2、动脉血氧分压(PaO2)、心率、呼吸频率、咳痰或吸痰量的多少等方面进行比较。结果实验组胸部听诊、SpO2及PaO2、心率、呼吸频率明显优于对照组。结论使用振动排痰机不论扣击或振动，还是二者结合，均可刺激患者咳嗽机制，与有效的体位相结合，取得满意的效果，可在临床广泛推广应用。

简介：摘要神经内科重症监护室（NICU)的住院患者中，由于各种原因导致患者不能经口进食，临床上常需要留置胃管来给予患者必须的营养支持来配合治疗，从而改善潜在和已发生的营养不良状态，促进患者的健康。但是，长期留置胃管会导致并发症，在临床工作中，我们要加强患者鼻饲时的护理，减少并发症的发生。

简介：目的对开展国际防盲合作项目中实施项目管理方法进行探讨。方法采用回顾方法对国际防盲合作项目中项目管理方法进行分析。结果国际防盲合作项目中由于采用规范的项目管理，项目实施中无违规现象发生，从而保证防盲合作项目按时、超额完成项目目标，获得极佳项目社会影响并获得项目外方的首肯，项目将可持续发展。结论正确认识和规范国际防盲合作项目进行项目管理，有助于项目开展，合理地分配资源、推广应用项目成果，促成防盲合作项目的可持续发展，所以建立国际防盲合作项目管理体系是可行及必要的。

简介：摘要：目的：本研究旨在探讨食管癌和肺癌患者护理中对降低并发症和提高患者生存质量的效果，通过随机对照试验比较实验组和对照组的护理效果。方法：选取2023年1月至2024年6月本院收治的116例食管癌和肺癌患者，随机分为实验组和对照组，每组58例。对照组采用常规护理方法，在此基础上，实验组实施心理护理方法进行护理。观察两组患者的并发症发生率、生存质量评分等指标。结果：实验组患者的并发症发生率低于对照组，生存质量评分高于对照组。结论：食管癌和肺癌患者护理中的心理护理在降低并发症发生率，提高患者生存质量方面有较好效果。

简介：摘要目的探讨外伤性尿崩症的观察和护理；方法回顾分析32例外伤性尿崩症的临床资料；结果垂体后叶素6-12u皮下注射，3次/d，同时口服双氢克尿塞25-50mg，3次/d，2例好转。其他30例采用持续静脉滴注垂体后叶素1-3u/h，能控制尿量200ml/h以下。死亡4例，其中3例死于肺部感染，1例死于脑干功能衰竭，其余28例尿崩症均全部治愈，治愈时间15～162d，平均124d；结论通过密切观察病情，全程精心护理，能早期发现尿崩症，不断提高治愈率。

简介：摘要目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析，研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株，通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组，并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价，以评价免疫原性。结果构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环，蛋白质粒径大小约为18.79 nm，具有10个N-糖基化位点，包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型；HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后，3.75 μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15 μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义(P＝0.431 2，U＝36)，配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组，其中15 μg HA三聚体+RFH01组效价最高，为1 280。结论成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白，其与RFH01佐剂配伍能够诱导BALB/c小鼠产生针对流感病毒的体液免疫应答，为流感病毒重组亚单位疫苗的研发提供了参考。

简介：摘要目的在原核系统中表达流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)头部蛋白并进行血清学分析。方法将H1N1和H3N2型流感病毒的HA头部蛋白编码基因克隆到pET-22b(+)原核表达质粒中，通过IPTG诱导，在大肠埃希菌BL21中获得含有HA头部与His-Tag的融合蛋白rH1N1-HA和rH3N2-HA。SDS-PAGE分析IPTG诱导前后的融合蛋白，验证表达的准确性，Western blot验证重组蛋白的表达。纯化重组蛋白，多剂次免疫家兔，获得针对H1N1-HA和H3N2-HA头部的多克隆抗体。同时，重组蛋白免疫BALB/c小鼠，评价其免疫原性。结果rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白在小鼠体内诱导了滴度高于40的血凝抑制抗体，可作为一种保护性抗原。rH1N1-HA和rH3N2-HA蛋白制备的多克隆抗体，可作为Western blot、ELISA等免疫学应用的重要材料。结论本研究制备的HA头部蛋白可作为一种保护性抗原，在小鼠体内诱导保护性抗体。HA头部制备的多克隆抗体，可用于甲型流感病毒的免疫学和血清学研究。