简介：摘要目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞焦亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞(美国ATCC细胞库)缺氧复氧模型，采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同复氧损伤时间点PTEN的表达变化；分别采用免疫荧光实验、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染PTEN后对GC-1细胞焦亡相关蛋白NLRP3和Caspase-1表达水平的影响。组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24 h)PTEN的mRNA表达水平分别为(1.00±0.21、3.48±0.35、3.75±0.38、4.25±0.40、4.06±0.37)。与未缺氧GC-1细胞的对照组比较，随着复氧损伤时间的增加，PTEN表达明显增高，并在复氧12 h达到峰值(F＝43.21，P<0.05)。Western blot结果显示，缺氧复氧组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.52±0.04、0.41±0.04)高于对照组(0.24±0.03、0.20±0.03，t＝9.700，P<0.05；t＝7.275，P<0.05)。过表达PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.75±0.06、0.62±0.05)高于其对照组(0.53±0.04、0.42±0.03)明显(t＝5.284，P<0.05；t＝5.941，P<0.05)。沉默PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.36±0.03、0.32±0.03)低于对照组(0.52±0.04、0.41±0.03)明显(t＝-5.543，P<0.05；t＝-3.674，P<0.05)。结论PTEN在GC-1细胞中呈高表达，其可能通过改变GC-1细胞焦亡水平，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：摘要目的探讨外泌体在草酸钙晶体所致肾损伤及肾间质纤维化中的作用。方法C57小鼠30只(6～8周龄，体重24～26 g)，其中24只野生型(WT)小鼠，6只纯合子Rab27a-/-(KO)小鼠。WT小鼠随机分为空白对照(NC)组、造模1周组、造模2周组、造模4周组(WT造模组)，Rab27a-/-小鼠为KO造模组，每组6只，1.25%乙二醇灌胃，分别持续给药0、1、2、4及4周，构建肾结石小鼠动物模型。苏木精-伊红(HE)染色评估肾小管损伤，Von-kossa染色评估结石晶体形成，Masson染色评估肾间质胶原纤维沉积，免疫组织化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(Fibronectin)及外泌体标志物白细胞分化抗原63(CD63)表达，两组间比较采用t检验。结果HE染色显示，在野生型小鼠中，造模1周、造模2周及造模4周肾小管损伤逐渐加重(0.57±0.18比1.30±0.19，t＝6.248，P<0.05；1.30±0.19比2.30±0.28，t＝6.642，P<0.05)，Von-kossa染色显示，肾脏晶体形成逐渐增加(1.42±0.61比5.24±0.55，t＝10.410，P<0.05；5.24±0.55比10.01±0.94，t＝9.946，P<0.05)，差异均有统计学意义。免疫组织化学染色显示，造模1周、造模2周及造模4周CD63阳性表达面积逐渐增加(1.33±0.34比4.92±0.71，t＝10.250，P<0.05；4.92±0.71比8.55±1.04，t＝6.448，P<0.05)差异有统计学意义。WT造模组Masson染色胶原纤维沉积面积高于NC组(8.57±0.84比0.60±0.34，t＝19.660，P<0.05)，α-SMA阳性表达面积高于NC组(11.30±1.04比1.63±0.55，t＝18.430，P<0.05)，Fibronectin阳性表达面积高于NC组(12.85±0.68比2.78±0.55，t＝25.810，P<0.05)，差异均有统计学意义。WT造模组Masson染色胶原纤维沉积面积高于KO造模组(8.57±0.84比5.53±0.74，t＝6.082，P<0.05)，α-SMA阳性表达面积高于KO造模组(11.30±1.04比6.63±0.91，t＝7.553，P<0.05)，Fibronectin阳性表达面积高于KO造模组(12.85±0.68比8.80±0.93，t＝7.875，P<0.05)，差异均有统计学意义。结论肾结石形成过程中，肾小管损伤加重，外泌体分泌增加。同时，抑制外泌体分泌能减轻草酸钙晶体诱导的肾脏纤维化。

简介：摘要目的比较经尿道新型钕-钇铝石榴石(Nd：YAG)激光前列腺剜除术(SPLEP)与等离子双极前列腺剜除术(PKEP)治疗前列腺增生(BPH)的疗效及安全性。方法简单随机将2019年6月到2020年6月在武汉大学人民医院泌尿外科住院治疗的82例BPH患者分为两组，分别行SPLEP(41例)和PKEP(41例)，术后随访3个月，并记录围手术期手术时间、血红蛋白(Hb)下降、膀胱冲洗时间、留置导尿管时间、术后住院时间和术后1、3个月国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QOL)、最大尿流率(Qmax)、残余尿量(PVR)以及并发症情况。组间计量资料比较采用独立样本t检验，计数资料用χ2检验。结果SPLEP和PKEP两组手术时间分别为(70.90±25.81) min和(60.41±20.44) min，Hb下降分别为(14.61±6.47) g/L和(19.10±6.18) g/L，膀胱冲洗时间分别为(1.88±0.68) d和(2.27±0.67) d，留置导尿管时间分别为(5.93±1.03) d和(6.44±1.00) d，术后住院时间分别为(6.93±1.03) d和(7.66±1.18) d，差异均有统计学意义(t＝-2.039、3.212、2.618、2.278、2.993，P<0.05)。两组术后IPSS、QOL、Qmax、PVR较术前均有显著改善(t＝-24.783、-33.261、32.451、-16.036，P<0.05)，差异有统计学意义，两组IPSS、QOL、Qmax、PVR差异均无统计学意义(t＝-1.280、0.790、-1.731、0.175，P>0.05)。SPLEP组和PKEP组分别出现3、6例短暂性尿失禁(χ2＝1.123，P>0.05)，差异无统计学意义。SPLEP组总并发症5例低于PKEP组的7例，但差异无统计学意义(χ2＝0.390，P>0.05)。结论SPLEP与PKEP均是治疗BPH的安全、有效的手术方式，与PKEP组比较，SPLEP组虽然手术时间稍长，但止血效果更好，膀胱冲洗时间、留置尿管时间、术后住院时间更短。

简介：摘要目的探讨新型长链非编码RNA(lncRNA) XLOC_032768在顺铂诱导急性肾损伤小鼠中的作用及其机制。方法30 mg/kg顺铂腹腔注射小鼠(鼠龄范围为6～8周，体重20～25 g，购自江苏卡文斯实验动物中心)建立急性肾损伤模型，通过小鼠肾脏全转录组测序和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)筛选出新型lncRNA进行实验研究。将24只雄性C57小鼠随机分为4组：对照＋lncRNA对照组、顺铂＋lncRNA对照组、对照＋lncRNA治疗组、顺铂＋lncRNA治疗组。血清检测肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量；苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学变化评估肾小管损伤；RT-PCR检测肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达。组间两样本均数的比较采用t检验及单因素方差分析。结果全转录组测序结果显示新型lncRNA-XLOC_032768在顺铂诱导的急性肾损伤小鼠肾脏中表达显著降低，RT-PCR结果亦显示顺铂组lncRNA XLOC_032768表达量较对照组显著降低(0.99±0.01比0.41±0.05，t＝11.850，P<0.05)，差异有统计学意义。与对照＋lncRNA对照组比较，顺铂＋lncRNA对照组肌酐(26.67±2.12比93.83±3.50，t＝20.670，P<0.05)、尿素氮显著升高(20.83±1.70比52.17±2.36，t＝10.780，P<0.05)，加重肾小管损伤(0.17±0.17比2.50±0.22，t＝8.370，P<0.05)及TNF-α表达增高(0.95±0.22比3.35±0.15，t＝16.060，P<0.05)、IL-1β(0.98±0.01比2.68±1.23，t＝13.340，P<0.05)、IL-6(0.98±0.01比3.53±0.17，t＝15.300，P<0.05)，差异有统计学意义。与顺铂＋lncRNA对照组比较，顺铂＋lncRNA-XLOC_032768治疗组显著降低肌酐(65.83±2.39，t＝6.610，P<0.05)及尿素氮表达(33.00±1.83，t＝6.420，P<0.05)，改善肾小管损伤(1.33±0.21，t＝3.790，P<0.05)及降低TNF-α(1.83±0.17，t＝6.330，P<0.05)、IL-1β(2.03±0.13，t＝3.560，P<0.05)、IL-6表达(2.55±0.18，t＝4.050，P<0.05)，差异有统计学意义。结论lncRNA-XLOC_032768通过减少炎性反应保护顺铂诱导的急性肾损伤。

简介：摘要目的探究RNA结合蛋白FOX1(RBFOX1)在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)模型中对细胞氧化应激及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的影响。方法构建HK-2细胞缺氧/复氧(缺氧16 h，复氧4 h)模型，实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测RBFOX1的基因表达水平。将HK2细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+NC组、H/R+RBFOX1组；Control组细胞正常培养，H/R+NC组和H/R+RBFOX1组分别转染对照质粒及RBFOX1过表达质粒后行缺氧/复氧处理。比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性；流式细胞仪检测各组细胞中活性氧(ROS)的含量；流式细胞术检测各组细胞凋亡水平；蛋白质印迹法(Western blot)检测各组RBFOX1、Nrf2、磷酸化Nrf2(p-Nrf2)及HO-1的蛋白表达水平。多组差异比较采用单因素方差分析，两两比较采用单样本t检验。结果RT-qPCR结果显示缺氧/复氧处理后的HK-2细胞RBFOX1基因的表达量低于Control组(0.357±0.022比1.000±0.000，t＝28.979，P<0.01)。Western blot结果也显示H/R组的RBFOX1表达量低于Control组(0.515±0.038比0.734±0.023，t＝4.955，P<0.01)。H/R+RBFOX1组RBFOX1(0.942±0.074比0.515±0.038、0.629±0.080，F＝10.932，P<0.05)、HO-1(0.839±0.068比0.638±0.033、0.622±0.052，F＝5.167，P<0.05)的蛋白表达水平及p-Nrf2/Nrf2比值(0.864±0.034比0.577±0.047、0.541±0.058，F＝13.896，P<0.01)明显高于H/R组和H/R+NC组，与Control组差异无统计学意义(P>0.05)。ROS流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的活性氧水平明显低于H/R组和H/R+NC组[(5.25±0.10)%比(8.98±0.12)%、(9.76±0.21)%，F＝248.098，P<0.01]；MDA酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组的MDA含量明显低于H/R组和H/R+NC组(3.506±0.098比5.034±0.087、5.176±0.089，F＝102.103，P<0.01)；SOD酶标仪检测结果显示H/R+RBFOX1组内的SOD活性高于H/R组和H/R+NC组(0.415±0.011比0.215±0.003、0.250±0.030，F＝32.681，P<0.01)。细胞凋亡流式检测结果表明H/R+RBFOX1组的细胞凋亡水平明显低于H/R组和H/R+NC组[(22.98±0.40)%比(28.70±0.68)%、(30.70±0.68)%，F＝44.029，P<0.01]，但高于Control组[(22.98±0.40)%比(4.84±0.43)%，t＝30.734，P<0.01]。结论RBFOX1在HK-2细胞缺氧/复氧损伤模型中具有抑制细胞氧化应激的作用，这一作用与Nrf2/HO-1信号通路有关。

简介：摘要目的探讨后组肾盏的分型及临床价值。方法回顾性分析2020年4月至2021年6月武汉大学人民医院行CT尿路造影(CTU)检查的640例患者的临床资料。男320例，女320例；年龄(52.4±11.9)岁。患者两侧均有肾，501例集合系统正常，139例有轻度积水。对患者的CTU图像进行三维重建，以脊柱为标记在立体空间旋转集合系统图像，模拟俯卧体位。采取两人阅片方式，观察俯卧位肾盏的影像学形态，统计左、右侧各640个肾后组肾盏的分型。依据肾盏形态及其对手术通道建立的影响，将后组肾盏分为3个类型。壶腹型：肾盂形如壶腹，肾盂直接与杯口状肾小盏相连，没有明显的肾大盏。经典分支型：≥2个肾大盏呈分支状汇集形成肾盂。细长分支型：肾大盏呈分支状，至少有1个肾大盏轴线长度≥0.9 cm且盏颈宽度≤0.3 cm。依据后组肾小盏从属肾大盏的关系，又将经典分支型分为a、b、c 3种类型，包括7个亚型。仅来源1组肾大盏为a型，同时来源于2组肾大盏为b型，同时来源于上、中、下3组肾大盏为c型。a型包含3种亚型，仅来源于上组肾大盏为a1型，仅来源于中组肾大盏为a2型，仅来源于下组肾大盏为a3型。b型也分为3种亚型，同时来源于上、中组肾大盏为b1型，同时来源于中、下组肾大盏为b2型，同时来源于上、下组肾大盏为b3型。c型无相应亚类。结果本组640例(共1 280个肾)均有后组肾盏。后组肾盏的形态学分型中壶腹型占8.83%(113/1 280)，其中2个肾小盏占比最高(5.63%，72/1 280)；经典分支型占71.25%(912/1 280)，其中3个肾小盏占比最高(31.17%，399/1 280)；细长分支型占19.92%(255/1 280)，其中3个肾小盏占比最高(9.92%，127/1 280)。经典分支型的解剖学分型中a型占20.50%(187/912)，b型占66.45%(606/912)，c型占13.05%(119/912)。a1、a2、a3型的比例分别为4.06%(37/912)、6.14%(56/912)、10.31%(94/912)。b1、b2、b3型的比例分别为2.03%(21/912)、7.46%(68/912)、56.69%(517/912)。结论后组肾盏结构复杂，变异极大。本研究中所有患者均存在后组肾盏，后组肾盏形态学分3种类型，以经典分支型占比最高，且以3个后组肾小盏占比最高。经典分支型解剖学分型以b3型占比最高。后组肾盏分型可为PCNL从后组穿刺提供解剖学基础。

简介：摘要目的探讨瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞缺氧复氧模型，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测不同复氧损伤时间点TRPV4的表达变化；分别采用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术检测转染TRPV4对GC-1细胞增殖和凋亡的影响；采用Western blot法检测睾丸组织中转染TRPV4对GC-1细胞中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和细胞色素C(Cyt-C)表达的影响，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24、48和72 h)TRPV4的蛋白表达水平分别为0.19±0.02、0.35±0.03、0.42±0.04、0.46±0.04、0.62±0.05、0.54±0.05、0.45±0.04。缺氧复氧组TRPV4表达显著高于未缺氧GC-1细胞的对照组，并在复氧24 h达到峰值(F＝6.898，P<0.05)，差异有统计学意义；缺氧复氧组中细胞增殖水平明显低于对照组(52.32±4.58比100.00±7.63，t＝-9.280，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平高于对照组(15.60±1.72比4.08±0.87，t＝10.352，P<0.05)，差异有统计学意义；过表达TRPV4组中细胞增殖水平低于其对照组(23.65±3.98比51.35±4.67，t＝-7.820，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平高于其对照组(26.93±2.15比14.62±1.68)，t＝7.814，P<0.05)，差异有统计学意义；沉默TRPV4组中细胞增殖水平高于其对照组(72.49±6.21比53.18±5.14，t＝4.150，P<0.05)，差异有统计学意义，细胞凋亡水平低于其对照组(9.71±1.25比15.07±1.64，t＝-4.502，P<0.05)，差异有统计学意义。缺氧复氧组中Caspase-3和Cyt-C表达水平高于对照组(0.70±0.06比0.20±0.02，t＝13.693，P<0.05；0.74±0.07比0.26±0.03，t＝10.917，P<0.05)，差异有统计学意义；过表达TRPV4组中Caspase-3和Cyt-C表达水平高于其对照组(1.25±0.11比0.69±0.07，t＝7.439，P<0.05；1.38±0.14比0.72±0.07，t＝7.303，P<0.05)，差异有统计学意义；沉默TRPV4组中Caspase-3和Cyt-C表达水平低于其对照组(0.46±0.05比0.68±0.06，t＝-4.879，P<0.05；0.45±0.05比0.72±0.06，t＝-5.988，P<0.05)，差异有统计学意义。结论TRPV4在GC-1细胞中高表达，其可能通过改变GC-1细胞的增殖和凋亡能力，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：摘要目的研究miR-29a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法建立睾丸GC-1细胞缺氧复氧模型，RT-PCR检测不同复氧损伤时间点miR-29a和TRPV4的表达水平；分别采用MTT实验、流式细胞术检测转染miR-29a对GC-1细胞增殖和凋亡能力的变化；荧光素酶实验证实miR-29a和TRPV4的靶向关系，Western blot法测定转染miR-29a后细胞中TRPV4的蛋白表达水平。结果miR-29a随着复氧损伤时间的增加，其表达显著降低，而TRPV4的表达明显增加；过表达miR-29a能显著促进GC-1细胞的增殖能力，抑制细胞凋亡水平。沉默miR-29a可使GC-1细胞的增殖能力明显减弱，凋亡水平增加；荧光素酶报告实验表明TRPV4是miR-29a的下游靶基因。过表达miR-29a能明显抑制GC-1细胞的TRPV4表达，而沉默miR-29a能显著促进TRPV4表达。结论MiR-29a可以通过靶向调控TRPV4来改变GC-1细胞的增殖和凋亡能力，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：摘要目的观察大黄素对糖尿病小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)导致肾积水的保护作用。方法选择健康C57BL/6J小鼠15只随机分为3组，糖尿病小鼠+假手术(A组)，糖尿病小鼠+UUO(B组)，糖尿病小鼠+UUO+大黄素(C组)，每组5只。各组予以干预后，血清检测肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量；苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学变化；原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡水平；免疫组织化学法和蛋白质印迹法(Western blot)检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)在肾脏中的表达。组间比较采用t检验。结果A组和C组Cr及BUN指标低于B组(10.811±2.136、8.506±1.424、16.902±0.575、14.834±0.912比19.366±1.614、17.762±1.290，t＝7.146、10.770、3.216、4.145，P<0.05)。A组和C组SOD指标高于B组(185.322±5.128、158.130±7.963比128.696±9.610，t＝11.624、5.274，P<0.05)。A组和C组MDA指标低于B组(10.388±0.713、15.676±1.408比22.648±1.538，t＝16.254、7.502，P<0.05)。HE染色显示A组肾脏结构基本正常，B组肾脏结构明显损害，C组肾脏损伤程度减轻。A、B、C组凋亡指数分别为(9.220±0.829)%、(19.600±1.819)%、(15.520±0.973)%，各组差异具有统计学意义。免疫组织化学法结果显示，与A组比较，B组Caspase-3及bax表达增加、bcl-2表达下降，C组相比于B组Caspase-3及bax表达下降、bcl-2表达增高。Western blot结果显示，A组和C组Caspase-3及bax指标低于B组(0.734±0.091、0.736±0.069、1.154±0.093、1.323±0.079比1.647±0.123、1.986±0.202，t＝13.345、13.075、7.138、6.824，P<0.05)，A组和C组bcl-2指标高于B组(1.766±0.234、1.282±0.138比0.736±0.097，t＝9.086、7.234，P<0.05)。结论大黄素能通过抗氧化应激、抗凋亡作用，改善糖尿病小鼠单侧输尿管梗阻导致的肾损伤。

简介：摘要目的观察大黄素对精索静脉曲张缺氧模型精原细胞的保护作用。方法选用小鼠GC-1精原细胞，设置对照组(A组)、对照＋大黄素组(B组)、模型组(C组)、模型＋大黄素组(D组)。C组和D组加入氯化钴(CoCl2)至终质量浓度为100 μmol/L，然后培养细胞24 h构建精索静脉曲张缺氧模型。B组和C组加入大黄素至终质量浓度为40 μmol/L。采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法及流式细胞仪测定细胞凋亡水平，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)的蛋白质表达水平，采用实时定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞Caspace-3和bax的基因表达水平，组间比较采取t检验。结果CCK-8实验示C组和D组细胞存活率低于A组[(51.70±3.52)%、(77.84±5.18)%比(100.00±0.00)%，t＝23.767、7.410，P值均<0.05]，差异有统计学意义，且D组细胞存活率高于C组[(77.84±5.18)%比(51.70±3.52)%，t＝7.229，P<0.05]，差异有统计学意义。流式实验示D组凋亡细胞比例低于C组[(10.54±0.68)%比(21.23±1.01)%，t＝15.207，P<0.05]，差异有统计学意义。Western blot结果示D组Caspace-3和bax蛋白表达水平低于C组(0.713±0.020、0.819±0.022比1.134±0.025、1.271±0.019，t＝22.722、26.813，P值均<0.05)，差异有统计学意义。RT-qPCR结果示D组Caspace-3和bax表达水平低于C组(1.52±0.18、1.80±0.21比3.53±0.23、4.27±0.31，t＝11.920、11.426，P值均<0.05)，差异有统计学意义。结论大黄素通过抑制细胞凋亡对精索静脉曲张缺氧模型的精原细胞起保护作用。

简介：摘要目的探讨新型前列腺尿道悬吊术(PUL)植入物的生物相容性。方法人前列腺增生细胞系(BPH-1)分别培养于植入物第一锚钉、第二锚钉及缝线浸提液作为实验组，细胞培养于完全培养基作为对照组，培养1、3、5 d，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力，评估植入物细胞毒性；鬼笔环肽染色，评估植入物对细胞骨架的影响。BPH-1细胞与第一锚钉、第二锚钉共培养5 d，于扫描电子显微镜(SEM)下观察前列腺细胞在植入物上的黏附状态。Sprague Dawley(SD)大鼠20只(8~10周龄，体重210~250 g)，购自湖北省疾病预防控制中心，大鼠背部肌肉分别植入第一锚钉、第二锚钉及缝线，对照组行假手术仅分离肌肉，观察、监测12周大鼠临床反应及体重变化，评估植入物全身毒性。多组间比较采用单因素方差分析。结果CCK-8细胞毒性实验显示，第一锚钉组第1、3、5天时BPH-1细胞相对存活率分别为94.49%、95.91%、97.55%；第二锚钉组分别为94.76%、95.16%、98.37%；缝线组分别为95.24%、96.99%、98.74%。SEM结果显示，BPH-1细胞在第一锚钉及第二锚钉上正常黏附、生长；鬼笔环肽染色显示，第一锚钉组、第二锚钉组及缝线组细胞骨架阳性表达面积分别为(20.85±3.06)%、(21.06±2.54)%、(21.27±2.63)%与对照组[(21.40±2.21)%]比较差异无统计学意义(F＝0.041，P>0.05)，植入物对细胞骨架分布无影响。全身毒性实验结果显示，大鼠一般状态良好，无异常临床反应，对照组，第一锚钉组、第二锚钉组及缝线组术后12周体重分别为(574.2±31.1)、(567.8±41.6)、(569.2±34.0)、(571.0±31.6) g，组间差异无统计学意义(F＝0.0314，P>0.05)，植入物无大鼠全身毒性作用。结论新型PUL植入物是一种无毒性，与前列腺细胞相容性好的材料。

简介：摘要目的观察GYY4137对大鼠精索静脉曲张(VC)生精功能损伤的保护作用。方法选取健康成年雄性SD大鼠32只购自湖北省疾病预防控制中心，随机分为4组：假手术组、假手术＋GYY4137组、VC组及VC＋GYY4137组。假手术组、假手术＋GYY4137组仅分离而不结扎左肾静脉，VC组与VC＋GYY4137组结扎左肾静脉制备VC模型，VC＋GYY4137组、假手术＋GYY4137组术后每日腹腔注射GYY4137(10 mg/kg)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理改变；测定睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数；免疫组织化学及蛋白质印迹法(Western blot)检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达。两组间比较采用t检验。结果VC组可见各级生精细胞排列紊乱且广泛脱落，VC＋GYY4137组可见生精细胞排列轻度紊乱，少数腔内见脱落的生精细胞。与假手术组[(1.86±0.23) nmol/g蛋白]和假手术＋GYY4137组[(1.83±0.22) nmol/g蛋白]比较，VC组[(4.33±0.37) nmol/g蛋白]中MDA含量明显增加(t＝9.820、10.059，P<0.05)；VC＋GYY4137组[(2.38±0.27) nmol/g蛋白]与VC组比较，MDA含量显著下降(t＝-7.374，P<0.05)。VC组的SOD活性[(0.23±0.04) U/mg蛋白]与假手术组[(0.81±0.06) U/mg蛋白]和假手术＋GYY4137组[(0.82±0.07) U/mg蛋白]比较明显降低(t＝-9.757、-9.926，P<0.05)；VC组经GYY4137处理后SOD活性增加[(0.62±0.06) U/mg蛋白](t＝9.368，P<0.05)。TUNEL结果显示假手术组及假手术＋GYY4137组[(3.89±0.45)%、(3.92±0.51)%]可见较少的睾丸生精细胞凋亡，VC组凋亡细胞明显增加[(17.26±0.98)%，P<0.05]；与VC组比较，VC＋GYY4137组生精细胞凋亡明显减少[(8.24±0.65)%，P<0.05]。免疫组织化学及Western blot结果显示Caspase-3和bax表达水平在VC组(0.41±0.04、0.59±0.06)中的表达明显高于假手术组(0.11±0.02、0.19±0.03，t＝9.650、9.097，P<0.05)和假手术＋GYY4137组(0.12±0.02、0.20±0.03，t＝9.327、8.870，P<0.05)；与VC组比较，VC＋GYY4137组(0.21±0.03、0.34±0.04)中Caspase-3和bax表达水平下降(t＝-6.928、-6.005，P<0.05)。结论GYY4137可减轻氧化应激水平和抑制凋亡，从而对VC睾丸生精功能发挥保护作用。

简介：摘要目的探讨D-柠檬烯对精索静脉曲张(VC)大鼠生精功能的保护作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为4组，假手术组(A组)，假手术+D-柠檬烯组(B组)，VC组(C组)，VC+D柠檬烯组(D组)。C、D组行左肾静脉缩窄术建立VC大鼠模型，B、D组术后每日腹腔注射D-柠檬烯200 mg/kg，A、C组注射等量生理盐水，4周后取左侧睾丸检测。苏木精-伊红(HE)染色，观察睾丸组织形态变化；分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡指数；免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达水平；组间比较采用t检验。结果A、B组大鼠睾丸未见明显组织学变化，C组可见明显病理损伤，D组较C组损伤明显改善；C组SOD含量(0.23±0.03)显著低于A组(0.79±0.04)(t＝22.183，P<0.05)，D组SOD含量(0.51±0.03)高于C组(t＝13.123，P<0.05)，C组MDA含量(5.59±0.39)显著高于A组(1.30±0.12，t＝18.386，P<0.05)，D组MDA含量(3.89±0.20)低于C组(t＝6.734，P<0.05)；C组凋亡(32.43±3.88)明显高于A组(2.41±0.67，t＝17.045，P<0.05)，D组凋亡细胞(17.12±2.66)低于C组(t＝7.273，P<0.05)；免疫组织化学和Western blot结果显示，C组的bax和Caspase-3蛋白表达量明显高于A组(1.179±0.070、0.469±0.220比0.453±0.043、0.143±0.017，t＝15.157、20.431，P值均<0.05)，bcl-2蛋白表达量低于A组(0.476±0.021比1.148±0.084，t＝13.414，P<0.05)；D组的的bax和Caspase-3蛋白表达量明显少于C组(0.689±0.054、0.282±0.031比1.179±0.070、0.469±0.220，t＝9.540、8.442，P值均<0.05)，bcl-2表达水平明显高于C组(0.794±0.033比0.476±0.021，t＝14.222，P<0.05)。结论D-柠檬烯可通过抗氧化和抗凋亡作用，对精索静脉曲张大鼠生精功能起保护作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA-325(miRNA-325)在肾小管上皮细胞缺氧复氧(H/R)损伤模型中的作用及其机制。方法选取人肾小管上皮细胞HK-2，建立适当的肾小管上皮细胞H/R模型(缺氧24 h复氧2 h)。将HK-2细胞分为对照组、H/R组、H/R+抑制剂(inhibitor)组和H/R+抑制剂阴性对照(inNC)，转染miRNA-325 inhibitor和inNC后进行缺氧复氧处理，然后进行后续实验。用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。利用蛋白质印迹法(Western blot)检测HK2细胞在H/R后活化半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)等的表达水平。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HK2细胞中miRNA-325、Caspase-3和XIAP mRNA表达水平。使用双荧光素酶报告基因实验检测miRNA-325与XIAP 3’端非编码区(3’UTR)之间的关系。组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果H/R组细胞凋亡率高于对照组[(12.11±1.65)%比(3.88±0.24)%，t＝8.311，P<0.05]；H/R+Inhibitor组细胞凋亡率低于H/R组[(7.60±3.07)%比(12.11±1.65)%，t＝4.557，P<0.05]。Western blot结果显示，实验组Cleaved Caspase-3[(0.50±0.02)、(0.63±0.01)、(0.61±0.02)比(0.41±0.01)，F＝212.095，P<0.05]和bax[(0.53±0.02)、(0.63±0.01)、(0.64±0.04)比(0.41±0.02)，F＝105.138，P<0.05]蛋白表达量显著高于对照组，bcl-2[(0.57±0.02)、(0.52±0.02)、(0.49±0.01)比(0.62±0.02)，F＝89.498，P<0.05]和XIAP[(0.29±0.01)、(0.24±0.03)、(0.24±0.01)比(0.33±0.03)，F＝27.575，P<0.05]表达量显著低于对照组；H/R+Inhibitor组Cleaved Caspase-3[(0.50±0.02)比(0.61±0.02)，t＝11.437，P<0.05]和bax[(0.53±0.02)比(0.64±0.04)，t＝7.253，P<0.05]的表达低于H/R组，bcl-2[(0.57±0.02)比(0.49±0.01)，t＝9.471，P<0.05]和XIAP[(0.29±0.01)比(0.24±0.01)，t＝4.231，P<0.05]的表达量高于H/R组，差异均有统计学意义。qRT-PCR结果显示，实验组miRNA-325[(7.27±0.30)、(4.66±0.21)、(7.11±0.25)比(1.05±0.13)，F＝1453.045，P<0.05]和Caspase-3 mRNA[(1.52±0.05)、(1.26±0.06)、(1.53±0.05)比(1.00±0.01)，F＝241.375，P<0.05]表达水平显著高于对照组，而XIAP mRNA[(0.38±0.01)、(0.76±0.02)、(0.39±0.02)比(1.01±0.02)，F＝2569.583，P<0.05]表达低于对照组；H/R+Inhibitor组miRNA-325[(4.66±0.21)比(7.27±0.30)，t＝24.236，P<0.05]和Caspase-3 mRNA[(1.26±0.06)比(1.52±0.05)，t＝11.451，P<0.05]低于H/R组，而XIAP mRNA[(0.76±0.02)比(0.38±0.01)，t＝45.678，P<0.05]高于H/R组，差异均有统计学意义。荧光素酶活性检测表明共转染miRNA-325的野生型组酶活性低于对照组[(0.69±0.03)比(1.01±0.02)，t＝22.809，P<0.05]，而突变型组酶活性无明显变化[(1.04±0.11)比(0.99±0.06)，t＝0.983，P>0.05]。结论XIAP是miRNA-325的靶基因之一，抑制miRNA-325可以下调凋亡蛋白的表达，降低细胞凋亡率，从而保护肾小管上皮细胞。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-34a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)对人膀胱癌细胞增殖和凋亡作用的影响。方法收集2019年1月至2020年8月武汉大学人民医院23例膀胱癌组织以及相应的癌旁组织临床样本，采用实时荧光定量聚合酶链方法(RT-PCR)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本中miR-34a的表达水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本TRPV4的表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法，双染法流式细胞术观察细胞增殖和凋亡水平的改变。采用荧光素酶报告法测定miR-34a与TRPV4的相关性。采用Western blot法检测细胞中TRPV4的蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果miR-34a在膀胱癌旁组织中表达水平(4.38±0.42)高于膀胱癌组织(1.69±0.27)，差异有统计学意义(t＝-9.332，P<0.05)。TRPV4在膀胱癌旁组织中表达水平(0.39±0.04)低于膀胱癌组织(0.63±0.06)，差异有统计学意义(t＝15.962，P<0.05)。T24细胞中，miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(58.63±4.35)%、(72.36±6.45)%、(86.45±6.35)%]明显高于miR-34a mimics组24、48、72 h增殖率[(21.65±3.12)%、(36.82±4.51)%、(53.87±5.96)%]，差异有统计学意义(t＝-8.730、-7.821、-6.480，P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(12.23±1.56)%]明显低于miR-34a mimics组[(31.09±2.43)%]，差异有统计学意义(t＝11.313，P<0.05)。5637细胞中，miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(44.58±3.87)%、(52.14±5.23)%、(68.35±6.12)%]明显低于miR-34a inhibitors组24、48、72 h增殖率[(56.87±5.63)%、(68.78±6.87)%、(89.45±7.64)%]，差异有统计学意义(t＝3.116、3.338、3.733，P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(19.39±2.12)%]明显高于miR-34a inhibitors组[(9.94±1.05)%]，差异有统计学意义(t＝6.919，P<0.05)。生物信息学和荧光素酶报告实验验证了TRPV4是miR-34a的下游靶基因。T24细胞中，miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.61±0.05)明显高于miR-34a mimics组(0.32±0.04)，差异有统计学意义(t＝-7.844，P<0.05)。5637细胞中，miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.53±0.05)明显低于miR-34a inhibitors组(0.79±0.06)，差异有统计学意义(t＝6.919，P<0.05)。结论miR-34a通过靶向调控TRPV4的表达，从而影响膀胱癌细胞的增殖和凋亡能力。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达，以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用，以及对微小RNA-506(microRNA-506，miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。方法选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织及相应癌旁正常组织临床样本中lncRNA NEAT1的表达水平；使用在线数据库及采用荧光素酶实验验证NEAT1和miR-506以及EZH2和miR-506的靶向关系；采用噻唑蓝(MTT)法，双染法流式细胞术和细胞迁移侵袭(Transwell)实验观察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭水平的改变；采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)法分别测miR-506和EZH2蛋白的表达。组间比较采用t检验。结果lncRNA NEAT1在肾癌组织中表达水平(4.45±0.31)高于癌旁组织(2.39±0.25)，差异有统计学意义(t＝8.959，P<0.05)。荧光素酶报告实验结果表明NEAT1序列上有miR-506的结合位点，且EZH2是miR-506的下游靶基因。si-NEAT1组24、48和72 h增殖率[(24.67±3.23)%、(40.82±5.03)%、(56.87±6.12)%]明显低于si-NC组[(62.63±4.35)%、(74.18±6.55)%、(87.45±7.21)%]，差异有统计学意义(t＝-12.135、-6.997、-5.601，P<0.01)。si-NEAT1组凋亡水平[(23.20±1.92)%]显著高于si-NC组[(9.65±1.34)%]，差异有统计学意义(t＝10.024，P<0.05)。si-NEAT1组迁移和侵袭数量[(52.35±4.76)、(21.63±2.05)个]显著低于si-NC组[(91.23±7.59)、(42.68±3.98)个]，差异有统计学意义(t＝-7.517，P<0.05；t＝-8.144，P<0.05)。RT-qPCR结果显示，si-NC及si-NEAT1两组的miR-506 mRNA表达量分别为1.00±0.00、3.39±0.26，差异有统计学意义(t＝15.922，P<0.05)。si-NEAT1组EZH2蛋白表达水平(0.15±0.02)明显低于si-NC组EZH2蛋白表达水平(0.32±0.03)，差异有统计学意义(t＝-8.167，P<0.05)。结论LncRNA NEAT1在肾癌中高表达，其可能通过调控miR-506/EZH2信号途径改变肾癌786-O细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的能力。

简介：摘要目的探讨时钟基因芳烃受体核转位因子样蛋白1(Bmal1)调控沉默信息调节因子1(SIRT1)通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad蛋白2(Smad2)通路在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧后纤维化中的作用。方法将HK-2细胞随机分组：正常对照组(A组)、缺氧/复氧组(B组)；siCTRL组(C组)、siBmal1组(D组)、HR +siCTRL组(E组)、HR+ siBmal1组(F组); HR + siCTRL +二甲基亚砜(DMSO)组(G组)、HR+ siCTRL+白藜芦醇(Resveratrol)组(H组)、HR+ siBmal1 +DMSO组(I组)、HR+ siBmal1 + Resveratrol组(J组)，用小干扰RNA(siRNA)敲低Bmal1，各组给予相应干预措施，蛋白质印迹法(Western blot)分别检测细胞Bmal1、SIRT1、TGF-β1、Smad2、磷酸化Smad蛋白2(p-Smad2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、锌指转录因子1(snail1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达量。使用GraphPad Prism 8.0软件进行统计分析。结果B组Bmal1、SIRT1指标低于A组(0.310±0.039、0.248±0.037比0.668±0.161、0.416±0.049，t＝3.046、3.873，P<0.05)，而B组TGF-β1、p-Smad2指标高于A组(0.734±0.022、0.563±0.07比0.280±0.102、0.190±0.021，t＝6.115、7.062，P<0.05)；D、E组Bmal1、SIRT1指标低于C组(0.547±0.031、0.647±0.029比0.754±0.036，0.311±0.024、0.339±0.017比0.450±0.032，t＝6.335、3.289、5.861、4.688，P<0.05)，D、E组TGF-β1、p-Smad2指标高于C组(0.314±0.011、0.379±0.007比0.072±0.009，0.399±0.015、0.313±0.025比0.240±0.013，t＝15.910、20.150、7.736、3.553，P<0.05)；F组Bmal1、SIRT1指标低于D、E组(0.199±0.033比0.547±0.031、0.647±0.029，0.158±0.016比0.311±0.024、0.339±0.017，t＝10.950、14.000、6.433、7.606，P<0.05)，F组TGF-β1、p-Smad2指标高于D、E组(0.443±0.026比0.314±0.011、0.379±0.007，0.488±0.026比0.399±0.015、0.313±0.025，t＝8.472、4.233、4.304、8.488，P<0.05)；H组Bmal1、SIRT1指标高于G组(0.964±0.026、0.444±0.031比0.629±0.036、0.339±0.019，t＝11.830、4.829，P<0.05)，而H组TGF-β1、p-Smad2指标低于G组(0.235±0.022、0.213±0.016比0.386±0.027、0.297±0.011，t＝7.583、4.867，P<0.05)；I组Bmal1、SIRT1指标低于G组(0.484±0.018、0.183±0.015比0.629±0.036、0.339±0.019，t＝5.115、7.189，P<0.05)，I组TGF-β1、p-Smad2指标高于G组(0.497±0.015、0.637±0.025比0.386±0.027、0.297±0.011，t＝5.613、19.620，P<0.05)；J组Bmal1、SIRT1指标低于H组(0.579±0.030、0.278±0.019比0.964±0.026、0.444±0.031，t＝13.600、7.660，P<0.05)，J组TGF-β1、p-Smad2指标高于H组(0.323±0.012、0.463±0.015比0.235±0.022、0.213±0.016，t＝4.430、14.430，P<0.05)；J组Bmal1、SIRT1指标高于I组(0.579±0.030、0.278±0.019比0.484±0.018、0.183±0.015，t＝3.351、4.358，P<0.05)，J组TGF-β1、p-Smad2指标低于I组(0.323±0.012、0.463±0.015比0.497±0.015、0.637±0.025，t＝8.767、10.050，P<0.05)。结论时钟基因Bmal1通过调控SIRT1抑制TGF-β1/Smad2信号通路进而减轻HK-2细胞缺氧/复氧后纤维化。