简介：摘要目的探讨血清血红素加氧酶-1（heme oxygenase 1，HO-1）、脂氧素A4（lipoxin A4，LXA4）水平与糖尿病肾病的相关性，以及HO-1、LXA4诊断糖尿病肾病的价值。方法选择2016年1月至2020年1月昆明医科大学附属延安医院内分泌科收治的185例2型糖尿病患者作为观察对象，进行前瞻性队列研究。其中96例合并糖尿病肾病（肾病组），89例未合并糖尿病肾病（无肾病组）。根据慢性肾脏病分期将肾病组分为1-2期组（31例）、3-4期组（40例）、5期组（25例）三个亚组。另选择82例检健康志愿者为对照组。检测血清HO-1、LXA4、氧化应激、炎性因子、糖代谢以及肾功能指标。Pearson分析HO-1、LXA4与氧化应激、炎性因子、糖代谢以及肾功能指标相关性，二元Logistic回归分析糖尿病肾病的因素。受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）分析HO-1、LXA4诊断糖尿病肾病的价值。结果肾病组血清HO-1［（0.60 ± 0.20）μg/L］、LXA4［（435.12 ± 22.42）ng/L］低于无肾病组［（0.72 ± 0.23）μg/L、（498.21 ± 29.48）ng/L］（t = 29.351、t = 24.135，P均<0.05），5期组血清HO-1、LXA4水平低于3-4期组和1-2期组（P<0.05），3-4期组血清HO-1、LXA4水平低于1-2期组（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示HO-1与总抗氧化能力（total anti-oxidation capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide distamuse，SOD）、肾小球滤过率估算值（estimated glomerular filtration rate，eGFR）呈正相关（r值分别为0.516、0.602、0.617，P均<0.05），与丙二醛、稳态模型胰岛素抵抗（Homeostasis model assessment Insulin resistance，HOMA-IR）、尿微量白蛋白/尿肌酐比值（urinary albumin-creatinine ratio，UACR）呈负相关（r=-0.553、r=-0.468、r=-0.611，P均<0.05），LXA4与T-AOC、SOD、eGFR呈正相关（r=0.559、r=0.597、r=0.637，P均<0.05），与丙二醛、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、HOMA-IR、UACR 呈负相关（r值分别为-0.498、-0.623、-0.725，P均<0.05）。二元Logistic回归分析结果，显示丙二醛（OR=1.587、95%CI 1.402~1.603，P=0.016）、TGF-β1（OR=1.679、95%CI 1.642~1.739，P=0.012）、HOMA-IR（OR=1.699、95%CI 1.534~1.739，P=0.009）是糖尿病肾病的危险因素（P<0.05），HO-1（OR=0.506、95%CI 0.423~0.653，P<0.001）、LXA4（OR=0.492、95%CI 0.409~0.535，P<0.001）是糖尿病肾病的保护因素（P<0.001），校正丙二醛、TGF-β1、HOMA-IR后，HO-1（OR=0.485，95%CI：0.402~0.564，P<0.001）、LXA4（OR=0.416，95%CI：0.386~0.475，P<0.001）仍与糖尿病肾病有关。ROC分析结果显示HO-1、LXA4诊断糖尿病肾病的曲线下面积（area under curve，AUC）分别为0.820（95%CI：0.760~0.880，P<0.001）、0.763（95%CI：0.691~0.836，P<0.001），灵敏度和特异度分别为71.88%、80.90%，75.00%、84.27%。结论血清LXA4、HO-1水平降低与糖尿病肾病密切相关，可作为糖尿病肾病诊断的生物学指标。

简介：摘要目的RNA结合基序蛋白10(RBM10)突变体(N392S)的鉴定及探究其对肺腺癌细胞功能的影响。方法收集天津医科大学肿瘤医院生物样本库108例肺腺癌(LUAD)组织样本，进行RBM10外显子的sanger测序。将野生型RBM10及RBM10突变体(N392S)通过慢病毒感染的方法分别转入肺癌细胞，转入空载体的细胞作为对照。采用细胞增殖实验(MTT)、平板克隆实验、划痕实验和侵袭实验分析RBM10突变体对肺癌细胞增殖和迁移能力的影响，通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测含有和不含第9外显子的NUMB转录本核糖核酸(RNA)水平的变化分析RBM10突变体对NUMB第9外显子的剪切调控作用。组间数据比较采用t检验。结果在LUAD组织样本中检测到一种新的RBM10错义突变(N392S)；与空载体对照细胞比较，表达野生型RBM10的A549-RBM10-Wild和H358-RBM10-Wild细胞增殖明显变慢(1.28±0.01比1.43±0.03，t＝7.866，P<0.01；1.27±0.03比1.70±0.05，t＝11.840，P<0.01)，而表达突变体RBM10(N392S)的A549-RBM10-Mut和H358-RBM10-Mut细胞增殖能力高于表达野生型RBM10细胞系(1.49±0.13比1.28±0.01，t＝2.851，P<0.05；1.62±0.10比1.27±0.03，t＝5.823，P<0.01)；在平板克隆实验中，表达RBM10突变体的A549和H358细胞克隆形成率高于表达野生型RBM10的A549和H358细胞克隆形成率(53.00±3.61比28.60±4.34，t＝9.675，P<0.01；42.40±3.98比18.60±4.34，t＝9.047，P<0.01)；细胞划痕实验显示，野生型RBM10较对照组抑制肺腺癌细胞的迁移(56.28±13.49比100.00±10.27，t＝4.465，P<0.01)，而突变体较野生型则失去抑制细胞迁移的能力(138.94±20.18比56.28±13.49，t＝5.898，P<0.01)；Transwell实验证实，野生型RBM10较对照组抑制肺腺癌细胞的迁移(158.00±36.81比497.25±38.20，t＝15.093，P<0.01)，突变体较野生型RBM10失去抑制肺腺癌细胞迁移的能力(474.00±48.63比158.00±36.81，t＝12.424，P<0.01)；分析RBM10对NUMB第9外显子的剪切调控作用，随着野生型RBM10质粒浓度的递增，野生型RBM10促进NUMB第9外显子(NUMB-EXON 9)的跳读使得NUMB短剪接转录本水平的增加，而随着RBM10(N392S)质粒浓度的递增，NUMB短剪接转录本水平没有变化。结论RBM10突变体(N392S)丧失了野生型RBM10抑制LUAD细胞增殖与迁移的功能，并可能通过调控NUMB蛋白剪切影响LUAD细胞功能。

简介：摘要目的研究应用胚胎外胚层发育(EED226)抑制组蛋白甲基化过度修饰是否具有抗癌活性并研究相关分子机制。方法体外培养肝癌细胞株BEL-7402和SMMC7721，用不同浓度的EED226处理肝癌细胞4、6、8 d，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性；5 μmol/L的EED226或者二甲基亚砜(DMSO)处理肝癌BEL-7402和SMMC7721细胞株48 h，分别采用蛋白质印迹(Western blot)检测EED226对肝癌细胞组蛋白3上的第27位赖氨酸的三甲基化(H3K27me3)的表达水平的影响和定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测EED226对肝癌细胞株的Bcl-2相互作用细胞死亡介导因子(Bim)和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)的表达水平的影响。组间比较采用t检验。结果EED226能强效抑制肝癌细胞株BEL-7402和SMMC7721的增殖，抑制效应呈现明显的时间、浓度依赖作用。处理8 d后，EED226在两个细胞株中的半数细胞活性抑制率(IC50)分别为0.8 μmol/L和0.9 μmol/L。分子机制研究结果显示，2个肝癌细胞株分别经EED226处理与DMSO处理后H3K27me3的表达相比较显著下降。在BEL-7402和SMMC7721细胞中，EED226处理组H3K27me3的下游基因Bim和p21的mRNA相对表达水平高于DMSO组[1.00±0.15比5.67±1.53(t＝-5.266，P<0.01)，1.00±0.05比6.67±1.53(t＝-6.422，P<0.05)和1.00±0.25比6.30±1.50(t＝-5.968，P<0.05)，1.00±0.10比6.00±1.00(t＝-8.617，P<0.05)]，差异有统计学意义；相应的Bim和p21蛋白质水平均显著升高。结论表观遗传调控新型抗癌制剂EED226能够抑制肝癌细胞中组蛋白三价甲基化过度修饰，进而解除对Bim和p21表达的抑制，达到抑制肝癌细胞增殖，表明EED抑制剂具有一定的抗肝癌作用。

简介：摘要目的探讨妊娠早期孕妇血清betatrophin、纤维凝胶蛋白-3（ficolin-3）对妊娠期糖尿病（GDM）的预测价值。方法采用前瞻性的研究方法，选取昆明市延安医院2018年6月至2019年6月行产前检查的孕7 ~ 13周孕妇作为研究对象并预留空腹外周静脉血标本，于孕24~28周行口服75 g葡萄糖耐量试验（OGGT）检查，其中65例诊断为GDM（GDM组），选取年龄和孕周匹配的60例结果正常孕妇作为正常组。另外，再选取同期年龄匹配的非妊娠健康女性体检者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测GDM组、正常组孕7 ~ 13周及对照组血清betatrophin和ficolin-3水平，采用Pearson检验分析血清betatrophin和ficolin-3与孕24 ~ 28周糖脂代谢指标的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析妊娠早期孕妇血清betatrophin和ficolin-3对GDM的预测价值。结果GDM组血清betatrophin和ficolin-3明显高于正常组和对照组[（35.69 ± 6.15） ng/L比（23.90 ± 7.68）和（19.68 ± 6.33） ng/L、（31.75 ± 10.30） μg/L比（22.88 ± 12.71）和（18.47 ± 9.54） μg/L]，正常组血清betatrophin和ficolin-3水平明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。相关性分析结果显示，孕妇血清betatrophin与总胆固醇（TC）、糖化血红蛋白（HbA1c）和稳态模型评估法胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关（r = 0.585、0.440和0.735，P<0.01）；血清ficolin-3与HbA1c呈正相关（r = 0.673，P<0.01），与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）呈负相关（r = - 0.520，P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，betatrophin和ficolin-3预测GDM的曲线下面积为0.829和0.795，95% CI 0.753 ~ 0.905和0.718 ~ 0.872，最佳临界值27.69 ng/L和29.72 μg/L，灵敏度为89.36%和84.58%，特异度为72.14%和79.64%，约登指数为0.62和0.59。两者联合检测预测GDM的AUC为0.923，95% CI 0.868 ~ 0.978，灵敏度为91.25%，特异度为87.24%，约登指数为0.86。结论GDM孕妇在妊娠早期血清betatrophin和ficolin-3已存在表达异常，且与糖脂代谢指标相关，妊娠早期血清betatrophin和ficolin-3对GDM有一定预测价值。

简介：摘要目的探讨妊娠早期孕妇血清betatrophin、纤维凝胶蛋白-3（ficolin-3）对妊娠期糖尿病（GDM）的预测价值。方法采用前瞻性的研究方法，选取昆明市延安医院2018年6月至2019年6月行产前检查的孕7 ~ 13周孕妇作为研究对象并预留空腹外周静脉血标本，于孕24~28周行口服75 g葡萄糖耐量试验（OGGT）检查，其中65例诊断为GDM（GDM组），选取年龄和孕周匹配的60例结果正常孕妇作为正常组。另外，再选取同期年龄匹配的非妊娠健康女性体检者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测GDM组、正常组孕7 ~ 13周及对照组血清betatrophin和ficolin-3水平，采用Pearson检验分析血清betatrophin和ficolin-3与孕24 ~ 28周糖脂代谢指标的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析妊娠早期孕妇血清betatrophin和ficolin-3对GDM的预测价值。结果GDM组血清betatrophin和ficolin-3明显高于正常组和对照组[（35.69 ± 6.15） ng/L比（23.90 ± 7.68）和（19.68 ± 6.33） ng/L、（31.75 ± 10.30） μg/L比（22.88 ± 12.71）和（18.47 ± 9.54） μg/L]，正常组血清betatrophin和ficolin-3水平明显高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。相关性分析结果显示，孕妇血清betatrophin与总胆固醇（TC）、糖化血红蛋白（HbA1c）和稳态模型评估法胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关（r = 0.585、0.440和0.735，P<0.01）；血清ficolin-3与HbA1c呈正相关（r = 0.673，P<0.01），与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）呈负相关（r = - 0.520，P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，betatrophin和ficolin-3预测GDM的曲线下面积为0.829和0.795，95% CI 0.753 ~ 0.905和0.718 ~ 0.872，最佳临界值27.69 ng/L和29.72 μg/L，灵敏度为89.36%和84.58%，特异度为72.14%和79.64%，约登指数为0.62和0.59。两者联合检测预测GDM的AUC为0.923，95% CI 0.868 ~ 0.978，灵敏度为91.25%，特异度为87.24%，约登指数为0.86。结论GDM孕妇在妊娠早期血清betatrophin和ficolin-3已存在表达异常，且与糖脂代谢指标相关，妊娠早期血清betatrophin和ficolin-3对GDM有一定预测价值。