简介：摘要目的研究四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种的传代稳定性，确保毒种适用于疫苗生产。方法将WHO推荐的季节性流感疫苗甲型H1N1和H3N2、乙型BV和BY病毒株(原始种子批)在鸡胚中传代扩增，制备生产用主种子批和工作种子批毒种。按中国药典2015年版三部的要求对毒种进行检定，包括鉴别试验、病毒滴度和血凝滴度测定、外源微生物检查等。将毒种连续传10代，用反转录PCR扩增第2、3、4、5、10代病毒鸡胚尿囊液中的血凝素和神经氨酸酶(neuraminidase，NA)的基因片段，并进行序列测定，分析传代过程中血凝素和NA的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果主种子批和工作种子批毒种的抗原性均与推荐的病毒株一致。各型病毒滴度均>6.5 lg半数鸡胚感染量/ml，血凝滴度均≥1∶160。2个种子批的支原体和无菌检查结果均为阴性，主种子批外源性禽白血病病毒和禽腺病毒检查结果亦为阴性。毒种在鸡胚中连续传代后，各型病毒株血凝素和NA的核苷酸序列同源性均>99%，氨基酸序列同源性均为100%。结论四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种具有良好的传代稳定性，可用于疫苗生产。

简介：摘要目的探索靶向抑制髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell, MDSC)调控神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)肿瘤微环境对增强效应细胞体内杀伤效应、提高NB免疫治疗效果的作用和机制。方法以BALB/c小鼠为实验对象，利用NB细胞注射建立荷瘤小鼠模型。按随机数字表法将小鼠随机分为多柔比星(doxorubicin, DOX)2.5 mg/kg组、DOX 5 mg/kg组、多巴胺(dopamine, DA)50 mg/kg组和对照组进行药物筛选，每组20只。分别于NB细胞接种后第7天和第12天注射DOX、DA，于NB细胞接种后第14、17、23天检测比较各组小鼠瘤体内MDSC数量分布及凋亡率、T细胞周期、Treg水平和TAM分布，MDSC培养上清中Arg-1、iNOS、ROS、IL-10、TGF-β含量，比较各组肿瘤生长曲线。根据抑瘤效果选择抑制MDSC最佳药物及浓度。制备NB抗原特异性CTL。按随机数字表法将荷瘤小鼠随机分为DOX组、CTL组、抗GD2组、DOX＋CTL组、DOX＋抗GD2组和对照组进行免疫治疗对比研究，每组20只。在抑制MDSC基础上实施NB荷瘤小鼠免疫治疗，检测比较各组肿瘤生长曲线，对比各组瘤体中浸润CTL、颗粒酶和穿孔素表达，外周血IL-2和IFN-γ水平。采用SPSS 26.0软件进行统计学处理。结果随时间变化，各药物筛选组和对照组比较，MDSC增长比例显著降低(P＝0.001)，瘤体中T细胞增殖和对照组比较先升(P<0.001)后抑(P>0.05)；TAM由M1型向M2型极化减弱；Treg水平受抑；MDSC培养上清中Arg-1、iNOS、ROS和IL-10含量和对照组比较均降低，且差异均有统计学意义(P均<0.05)；不同药物筛选组肿瘤体积比较，差异有统计学意义(P＝0.018)。以上各指标均以DOX2.5组表现最为显著，肿瘤生长最缓慢，抑制MDSC作用最强。小剂量DOX干扰后荷瘤小鼠实施免疫治疗，和对照组比较，各组瘤体浸润CD4＋、CD8＋淋巴细胞比例上升，颗粒酶、穿孔素浓度上升，外周血IL-2、IFN-γ浓度上升，且差异均有统计学意义(P均＝0)。以上各指标均以DOX2.5＋抗GD2组、DOX2.5＋CTL组和抗GD2组浓度相对较高。各免疫治疗组肿瘤体积两两比较，除抗GD2组和CTL组、DOX＋CTL组和DOX＋GD2组外，其余各组间比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论小剂量DOX可作为免疫调节剂靶向抑制NB肿瘤微环境中MDSC，消除免疫耐受，提高免疫治疗效果；其作用机制与抑制MDSC可双向调节机体天然免疫和T细胞过继性免疫有关。

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简介：摘要结外NK/T细胞淋巴瘤是中国最常见的非霍奇金淋巴瘤之一，其恶性程度高，侵袭性强，目前尚无国际标准治疗方案。本文报道了1例晚期结外NK/T细胞淋巴瘤患者在一线治疗中出现疾病进展后通过使用PD-1单抗联合化疗或联合表观遗传学药物治疗方案而获良好缓解，为自体造血干细胞移植创造了机会。这一治疗策略值得临床进一步探讨。

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简介：摘要目的探讨经腹膜外途径C.R.P.C.四步法腹腔镜根治性前列腺切除术治疗局限性前列腺癌的安全性和疗效。方法回顾性分析2015年4月至2017年12月同济医院收治的102例前列腺癌患者的病例资料。年龄(67±5)岁。术前总PSA值(45.32±18.33)ng/ml。前列腺体积(42±12)cm3。102例均行磁共振检查和前列腺穿刺活检确诊为前列腺癌，临床分期cT1c～cT3b期。102例均在全麻下行经腹膜外途径腹腔镜根治性前列腺切除术。术中采用C.R.P.C.四步法，即控制背深静脉复合体(control dorsal deep venous complex，C)；识别前列腺膀胱交界面、精囊层面、狄氏间隙层面3个解剖层面(recognize three anatomical layers，R)；保留尿道括约肌和膀胱颈(preserve urethral sphincter and bladder neck，P)；连续行尿道吻合(continuous anastomosis between urethra and bladder neck，C)，特别注意3、5、7、9点方向4针。记录手术时间、术中出血量、住院时间和术后并发症。结果本组102例手术均顺利完成。手术时间平均92(55～156) min。出血量平均105(55～185) ml。无中转开放手术。1例(0.98%)术前中度贫血患者(血红蛋白65 g/L)术后予输血治疗。病理检查结果显示15例(14.70%)切缘阳性。术后1周内2例(1.96%)发生尿外渗，经牵拉尿管并延长尿管留置时间后恢复正常。术后随访(26.4±3.5)个月。术后6个月11例(10.78%)出现PSA复发；术后12个月2例发生Ⅰ～Ⅱ度尿失禁，1例发生排尿困难。结论C．R.P.C.四步法腹腔镜根治性前列腺切除术易学易记，能够使初学者掌握根治性前列腺切除术的程序化手术操作步骤。本方法术后并发症少，肿瘤控制效果较好。