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  • 简介:摘要目的观察WNT2B骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨分化影响。方法hMSCs分离自临床髂骨植骨手术中剩余松质骨骨髓,采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组),以空慢病毒载体作为对照(对照组),部分实验将未经处理hMSCs作为空白对照。检测hMSCs增殖和干性特征变化,并将hMSCs进行成骨细胞诱导分化后检测其碱性磷酸酶活性、以茜素红染色定量检测其矿化能力。计量数据组间比较采用t检验、方差分析或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成骨分化早期WNT2B表达水平即发生明显变化,过表达WNT2B可以提高β-catenin表达水平,促进hMSCs增殖、维持其干性。实验组细胞碱性磷酸酶活性和茜素红染色强度均显著低于对照组(0.40±0.01比0.36±0.01,t=4.899,P<0.01;0.92±0.02比0.53±0.01,t=34.249,P<0.01)。结论WNT2B可以体外促进hMSCs增殖、维持其干性、并抑制hMSCs向成骨细胞分化。

  • 标签: WNT信号通路 骨髓间充质干细胞 成骨分化 增殖 基因过表达
  • 简介:摘要目的观察WNT2B骨髓间充质干细胞(hMSCs)向脂肪细胞分化影响。方法采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组),以空慢病毒载体作为对照(对照组),并将hMSCs进行脂肪细胞诱导分化7 d,以实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测脂肪细胞标志基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、脂蛋白脂酶(LPL)和降脂素(Adipsin)表达,在光镜下计数油红O染色阳性细胞数目,并油红O染色强度进行定量检测。计量数据组间比较采用t检验或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成脂肪细胞诱导分化过程中,WNT2B蛋白表达水平在分化早期即发生改变,实验组hMSCsPPARγ2(3.85±0.01比0.70±0.10,t=54.289,P<0.01)、LPL(17.78±1.78比1.29±1.30,t=12.958,P<0.01)、Adipsin基因表达强度(0.88±0.11比0.38±0.05,t=7.167,P<0.01)显著低于对照组,实验组hMSCs单位面积形成脂肪细胞数量显著低于对照组[(30.50±2.07)个比(10.33±1.63)个,t=50.230,P<0.01],油红染色定量分析显示实验组吸光度值显著低于对照组(0.77±0.02比0.49±0.02,t=10.397,P<0.01),差异均有统计学意义。结论过表达WNT2B可以抑制体外hMSCs向脂肪细胞分化。

  • 标签: 人骨髓间充质干细胞 脂肪细胞 分化