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B7-1转基因细胞株的表达和检测

作者：刘岩王科亮杨德军
学科：医药卫生 > 整形外科
创建时间：2011-01-11
出处：《中国美容医学》 11年第1期
机构：刘岩王科亮杨德军(哈尔滨医科大学附属第四医院泌尿外科哈尔滨150001)

简介：摘要目的构建B-7.1基因真核表达载体并导入CAK-1肾细胞癌细胞表达，为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用RT-PCR方法，以正常肝脏组织cDNA为模板，扩增B-7.1基因全长读码框架，并构建到真核表达载体pCDNA3.1中，将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞，对转染后的细胞进行RT-PCR和Westernblot分析。结果经过克隆测序结果证实，我们成功将B-7.1读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点，并且，与pCDNA3空载体转染对照细胞相比，pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因无论是mRNA水平还是蛋白水平均有明显升高。结论B-7.1转基因细胞株的成功构建和检测，为深入研究B-7.1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。
标签： B-7.1 转基因表达载体

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