简介:摘要目的针对猫对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的高度易感性,筛选猫主要组织相容性复合物I类(major histocompatibility complex class I,MHC I)分子FLA-K*00701呈递SARS-CoV-2来源的多肽,并探索复合物制备方法,为研究猫感染SARS-CoV-2的T细胞免疫特征打下基础。方法对可能与FLA-K*00701具有亲和力的SARS-CoV-2来源多肽进行预测并合成。采用稀释复性法,使猫白细胞抗原(feline leukocyte antigen,FLA)I类多肽复合物在体外合适环境下复性,纯化复合物后,用坐滴蒸汽扩散技术筛选晶体的生长条件,X射线衍射区分收集的蛋白结晶是否为晶体。结果成功筛选到一条与FLA-K*00701具有高度结合能力的SARS-CoV-2来源多肽,并得到高纯度FLA-K*00701蛋白,初步筛选得到FLA多肽复合物晶体,X射线衍射分辨率为2.7Å。结论首次在SARS-CoV-2易感动物猫中筛选到与其FLA I具有高度亲和力的多肽,并得到高分辨率的复合物蛋白晶体,本研究为进一步探索猫抵抗SARS-CoV-2的细胞免疫机制及SARS-CoV-2多肽疫苗的研发提供有价值的参考。
简介:摘要目的比较三焦点与单焦点人工晶状体(IOL)植入术后1年视觉质量。方法采用队列研究设计,纳入2017年5月至2018年6月在南京大学医学院附属鼓楼医院行超声乳化白内障摘出联合IOL植入术的年龄相关性白内障患者41例41眼,根据患者意愿将其分为三焦点IOL组20例20眼和单焦点IOL组21例21眼,分别植入AT LISA tri 839MP三焦点IOL和603P单焦点IOL。术后随访1年,检测2个组患者术后1年裸眼远距离视力(UCDVA)、裸眼中距离视力(UCIVA)、裸眼近距离视力(UCNVA)、最佳矫正远视力(BCDVA)、远视力矫正下的中距离视力(DCIVA)和远视力矫正下的近距离视力(DCNVA);采用OQAS Ⅱ检测患者点扩散函数(PSF)、调制传递函数(MTF)截止频率、斯特尔比率(SR),以及对比度分别为100%、20%、9%时的OQAS Ⅱ值(OV 100%、OV 20%、OV 9%)及客观散射指数(OSI);采用iTrace视功能分析仪评估患者的波前像差,包括全眼总像差(TA)、总高阶像差(tHOAs)、球差、彗差、三叶草像差、总低阶像差(tLOAs)、离焦、散光,所有像差值用均方根表示;采用综合验光仪检测2个组患者术眼不同调节范围内的视力,并以高于0.5 LogMAR视力绘制离焦曲线图;采用裂隙灯显微镜观察并以Sellman法量化分析2个组患者IOL区域内后囊膜混浊(PCO)发生程度;采用视功能指数量表(VF-14)对视功能进行评分。结果术后1年,三焦点IOL组患者UCIVA、UCNVA、DCIVA和DCNVA明显优于单焦点IOL组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。OQAS Ⅱ视觉质量指标显示,三焦点IOL组患者MTF截止频率、SR、OV 100%及OSI值明显高于单焦点IOL组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。2个组患者各波前像差比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。离焦曲线显示,单焦点IOL组组患者在-1.0、-1.5、-2.0、-2.5、-3.0、-3.5 D时(即相当于1 m、66 cm、50 cm、40 cm、33 cm、29 cm)的LogMAR视力明显高于三焦点IOL组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。三焦点IOL组PCO例数多于单焦点IOL组,差异有统计学意义(χ2=41.0,P<0.001)。三焦点IOL组的VF-14评分为87.99±1.09,明显高于单焦点IOL组的81.49±1.67,差异有统计学意义(t=10.301,P<0.001)。结论三焦点IOL植入术后1年患者全程视力及主观视觉质量、客观视觉质量均优于单焦点IOL。
简介:摘要目的利用高通量转录组测序技术研究H1N1流感病毒感染原代人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞后的差异表达基因(differential expressed genes,DEGs)及其参与的相关调控信号通路。方法H1N1流感病毒分别感染原代人RPE细胞2 h或12 h,以H1N1未感染为对照组,提取总RNA,构建文库,进行转录组测序。利用DESeq2软件筛选DEGs,DEGs进行基因本体(gene ontology, GO)功能注释与京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。结果与对照组相比,H1N1流感病毒感染2 h组共鉴定出1 830个DEGs,感染12 h组共鉴定出2 847个DEGs;H1N1流感病毒感染动力学过程中(2 h: 12 h),共鉴定出1 213个DEGs。对H1N1流感病毒感染12 h组的DEGs进行GO功能注释分析,结果表明DEGs广泛存在多种细胞组分中,并参与细胞过程、生物调节、代谢过程等多种生物学过程。KEGG通路富集分析表明,在H1N1流感病毒感染2 h组中,DEGs主要富集在PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、癌症MicroRNAs、细胞因子-细胞因子受体相互作用;在H1N1流感病毒感染12 h组中,DEGs主要富集在PI3K-Akt信号通路、癌症MicroRNAs、AGE-RAGE信号通路以及免疫炎症通路;在H1N1流感病毒感染动力学过程中(2 h: 12 h),DEGs主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、TGF-β信号通路。结论H1N1流感病毒感染导致RPE细胞的转录组发生显著改变,这些数据为阐明流感病毒等呼吸道病毒感染眼部的分子机制提供了科学参考。
简介:【摘要】目的 研究全程营养综合管理对烧伤患者内皮细胞表达6-keto-PGF1α、vWF及sLOX-1的影响。方法 患者100例,分成实验组与对照组各50例,对照组采取常规护理方法,实验组采取全程营养综合管理法。对比内皮细胞上清液中6-keto-PGF1α、vWF及sLOX-1的表达情况。结果 实验组烧伤血清的细胞抑制率、血清vWF浓度、血清sLOX-1浓度均低于对照组。结论 研究全程营养综合管理对烧伤患者内皮细胞表达6-keto-PGF1α、vWF及sLOX-1的表达情况的检测,寻找早期诊断影响为治疗烧伤患者提供新的方法与途径。
简介:摘要目的探讨细胞黏附分子CHL1在高糖高脂诱导的胰岛素抵抗细胞和小鼠模型中的作用及其机制。方法将前脂肪细胞系3T3-L1通过完全随机法分为对照组和CHL1过表达组,分别转染空载体和CHL1过表达载体,随后通过胰岛素诱导分化为成熟脂肪细胞,再通过高糖高脂诱导胰岛素抵抗。葡萄糖消耗实验检测成熟脂肪细胞胰岛素抵抗效应。Western blot法检测两组细胞CHL1和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达水平以及丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)磷酸化水平,实时定量PCR(RT-PCR)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6的 mRNA表达水平。然后,选取6~8周龄的C57BL/6雄性小鼠24只,体重20~25 g,通过完全随机法分为常规饲料组(常规组)、高脂饲料组(高脂组)、过表达对照+高脂组和CHL1过表达+高脂组,每组6只。通过高脂饲料饲喂小鼠构建胰岛素抵抗小鼠模型,通过尾静脉注射慢病毒过表达CHL1。各组小鼠饲养4个月后称重,然后处死收集附睾白色脂肪并称重,苏木素-伊红染色观察小鼠附睾白色脂肪病理情况,免疫组织化学染色观察其CHL1表达情况,RT-PCR法检测小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平。结果(1)细胞实验结果:Western blot结果示CHL1过表达组细胞中CHL1蛋白表达高于对照组(P<0.01);葡萄糖消耗实验结果示,CHL1过表达组细胞葡萄糖剩余量低于对照组(P<0.05);RT-qPCR结果示,CHL1过表达组细胞TNF-α和IL-6 mRNA表达水平均低于对照组(P均<0.01);Western blot结果示,CHL1过表达组细胞GLUT4和p-AKT/AKT蛋白表达均高于对照组(P均<0.01)。(2)动物实验结果:饲养4个月后高脂组和过表达对照+高脂组小鼠体重和附睾白色脂肪质量均高于常规组(P均<0.01),CHL1过表达+高脂组则均低于过表达对照+高脂组(P均<0.01);苏木素-伊红染色结果示,高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪细胞体积大于常规组,CHL1过表达+高脂组则小于过表达对照+高脂组(P均<0.01);RT-qPCR结果示,高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中IL-6和TNF-α mRNA表达水平均高于常规组(P均<0.01),CHL1过表达+高脂组则均低于过表达对照+高脂组(P均<0.05);免疫组织化学染色半定量结果示,高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1蛋白表达水平均低于常规组(以常规组的表达量为1,高脂组、过表达对照+高脂组的表达量分别为0.344、0.427),CHL1过表达+高脂组(表达量1.465)则高于过表达对照+高脂组;RT-qPCR结果示,高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1 mRNA表达水平均低于常规组(P均<0.01),CHL1过表达+高脂组则高于过表达对照+高脂组(P<0.01)。结论CHL1可改善高糖高脂诱导的细胞和小鼠模型的胰岛素抵抗,其机制可能与抑制AKT激活和相关炎症反应有关。
简介:摘要目的探讨T1WI增强纹理参数联合临床病理学特征对脑胶质瘤患者术后1年内复发的预测价值。方法回顾性队列研究。纳入2018年1月—2021年2月川北医学院附属医院及重庆市人民医院经术后病理确诊的脑胶质瘤患者90例。其中男60例、女30例,年龄17~76(47±14)岁,术后1年内复发46例、未复发44例。按照2∶1比例将患者随机分为训练集与验证集。采用MaZda软件于术前MR T1WI增强图像上提取胶质瘤纹理参数。在训练集中对纹理参数进行降维筛选并利用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)算法分析建立预后纹理积分模型。同时在训练集中对术后1年内复发与未复发患者的临床病理学特征及纹理积分进行影响因素分析,构建可视化联合预测模型。观察项目:(1)分析影响脑胶质瘤术后1年内复发的危险因素,并建立联合预测模型。(2)在验证集中,对纹理积分模型及联合预测模型进行验证。采用受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线及决策曲线分析法评价模型的诊断效能与临床净获益。结果单因素分析显示,肿瘤WHO分级、异柠檬酸脱氢酶-1突变、术后放化疗、纹理积分是脑胶质瘤术后1年内复发的影响因素。多因素分析结果显示,WHO分级、异柠檬酸脱氢酶-1突变、术后放化疗及纹理积分均为脑胶质瘤术后1年内复发的独立危险因素[风险比(OR)=6.527、0.160、0.052、6.300,95%可信区间(CI)=1.201~35.485、0.031~0.827、0.004~0.708、1.905~20.841,P=0.030、0.029、0.026、0.003]。联合预测模型预测脑胶质瘤术后1年内复发的效能高于纹理积分模型,其训练集与验证集的曲线下面积(AUC)分别为0.92(95%CI 0.86~0.99)和0.86(95%CI 0.74~0.99),灵敏度分别为0.90、0.88,特异度分别为0.83、0.79;纹理积分模型在训练集与验证集中的预测AUC分别为0.85(95%CI 0.75~0.95)和0.82(95%CI 0.67~0.97),灵敏度分别为0.73、0.63,特异度分别为0.90、0.99。在两种模型中,预测概率与实际概率间的一致性及临床净获益均较高。结论基于术前T1WI增强图像的纹理参数联合临床病理学特征建立的联合预测模型对脑胶质瘤全切术后1年内的复发具有一定的预测价值。
简介:《义务教育思想品德课程标准(2011版)》法律部分内容在“心中有法”部分更加强调了法治思想的渗透和法律意识的培养;“权利与义务”部分关于民事权利的表述更加规范严谨;“法律与秩序”部分把依法治国与公民的参与、责任联系起来,旨在强化学生的公民意识。基于新版课标的修改,在进行法律内容教学时要以社会主义法治思想为指导,以法律知识教学为基础,以培养学生法律意识为目标,将法律部分内容与道德、心理健康、国情等内容进行有机整合,以落实思想品德课的综合性要求。