简介：摘要目的建立一种基于流式细胞术快速定量分析小鼠角膜组织中嗜中性粒细胞的技术和方法。方法选取6～8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠15只，使用高尔夫样刀机械性刮除小鼠角膜上皮细胞层，生成直径2 mm的创面，在创伤后18 h切除带有完整角膜缘的小鼠角膜，采用胶原酶I和DNA酶联合消化法获得单细胞悬液，采用FACSCanto流式细胞分析仪画门技术分选角膜细胞中嗜中性粒细胞的数量。另取6只小鼠，应用随机数字表法分为创伤组和正常组，每组3只，使用抗CD45、Ly6G和CD11b荧光抗体进行角膜细胞染色，计数并比较未创伤和创伤角膜中嗜中性粒细胞的数量变化。结果建立流式细胞仪检测角膜组织中嗜中性粒细胞的分析流程。CD45＋细胞占角膜组织所有细胞的比例为(20.93±1.72)%，在角膜CD45＋细胞群中可分选出Ly6G＋ CD11b＋双阳性嗜中性粒细胞群，Ly6G＋和CD11b＋细胞在CD45＋细胞中所占比例分别为(75.50±3.25)%和(93.40±4.53)%，Ly6G＋和CD11b＋共阳性细胞占角膜组织CD45＋细胞的比例为(67.33±2.80)%。创伤后18 h，角膜中角膜缘募集嗜中性粒细胞数量为(151.47±10.82)%，多于正常角膜的(15.36±1.02)%，差异有统计学意义(t＝21.689，P<0.01)。结论流式细胞检测方法可快速、准确地定量分析创伤角膜中嗜中性粒细胞群，为进一步评价不同原因造成角膜炎症反应中嗜中性粒细胞的数量变化提供了一种快速定量分析方法。

简介：摘要目的探讨lncRNA HOTTIP通过调控miR-663a表达对4个非小细胞肺癌细胞系放射敏感性影响。方法用0、2、4、6、8 Gy分别照射H838、H157、A549、H1299细胞系，采用克隆形成实验检测细胞存活情况。qRT-PCR检测细胞中HOTTIP和miR-663a表达水平。以A549、H1299细胞为研究对象，沉默HOTTIP表达、过表达miR-663a后用克隆形成实验检测细胞存活情况。流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blot检测Cleaved caspase-3、Cleaved PARP和γ-H2AX表达。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR检测验证HOTTIP和miR-663a的靶向关系。结果HOTTIP在放射耐受的H157、A549、H1299细胞中表达上调，miR-663a表达下调。沉默HOTTIP或过表达miR-663a均可抑制A549、H1299细胞存活(放射增敏比分别为1.562、1.507)，促进Cleaved caspase-3、Cleaved PARP和γ-H2AX表达，促进放射照射诱导细胞凋亡。miR-663a是HOTTIP的靶基因，HOTTIP可负性调控miR-663a的表达。抑制miR-663a表达可逆转沉默HOTTIP对肺癌细胞系放射敏感性的影响。结论沉默HOTTIP通过上调miR-663a表达，抑制肺癌细胞系存活，促进其凋亡，从而提高肺癌细胞系的放射敏感性。

简介：摘要目的探讨新辅助治疗后的食管鳞状细胞癌患者术后6个月内的复发状况及其影响因素。方法回顾性分析2018年1月至2020年4月在上海市胸科医院胸外科接受新辅助治疗联合外科手术且随访资料完整的187食管癌患者资料。男性160例，女性27例，年龄（63.0±7.1）岁（范围：43~76岁）。新辅助治疗方案包括新辅助放化疗（CROSS方案）118例，新辅助放化疗（非CROSS方案）26例，新辅助化疗27例，新辅助免疫加化疗16例。采用t检验、χ²检验和秩和检验对术后6个月内复发相关的因素进行单因素分析，采用Logistic回归进行多因素分析。结果187例患者中，术后6个月内共有30例患者复发（16.0%），复发模式包括局部复发1例，区域性复发11例，血源性复发转移13例，合并复发转移5例。单因素分析结果显示，复发患者与未复发患者的新辅助治疗前肿瘤T分期、新辅助治疗后肿瘤退缩情况、病理环周切缘情况、病理T分期与病理N分期存在差异（P值均<0.05）。多因素分析结果显示，新辅助治疗前肿瘤T3~4期（OR=2.701，95%CI：1.161~6.329，P=0.021），病理N（+）期（OR=1.654，95%CI：1.045~2.591，P=0.032）是术后6个月内复发的独立预后因素。结论对于接受新辅助治疗前肿瘤外侵明显（T3期以上）且经新辅助治疗后仍存在阳性淋巴结的患者，应警惕术后早期复发的可能。

简介：摘要：弓形虫作为一种可以在专性细胞中寄生原虫，在我国人群当中的感染率可以达到10% 到15%之间，且大部分都属于隐性感染。尤其是对免疫力较低的人群而言，很容易在受感染后出现严重的弓形虫病。因此，本文在了解弓形虫研究背景的基础上，在明确研究目标和方法后，分析实际获取的最终结果。

简介：摘要肺癌是全球发病率最高、死亡人数最多的恶性肿瘤，非小细胞肺癌占肺癌发病率80%~85%，内科治疗是非小细胞肺癌综合治疗的重要组成部分。然而，相同类型的非小细胞肺癌患者在接受同种方案治疗时，疗效差异较大。虽然既往研究从肿瘤异质性、分子生物学个体化差异等角度探讨其原因，但目前临床仍缺乏有效的疗效预测标记物。在二代测序广泛应用的背景下，探索新型疗效预测标记物的研究已成为热点。前期多项研究发现，肿瘤突变负荷与非小细胞肺癌免疫治疗疗效呈正相关；近期相关研究发现，其对靶向治疗及化疗的疗效亦有一定的预测价值。现就肿瘤突变负荷对非小细胞肺癌系统性治疗疗效预测的相关研究进行综述，旨在更好地服务于个体化、精准化治疗。

简介：摘要目的探讨miR-1254及其靶基因巨噬细胞集落剌激因子-1(CSF-1)在胶质瘤组织、胶质瘤细胞中的表达，以及miR-1254和CSF-1对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法收集2017年4月至2019年5月在湖北省十堰市太和医院接受手术治疗的30例胶质瘤患者的临床病理标本以及癌旁组织，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胶质瘤组织、癌旁组织以及细胞株U87和人脑正常胶质细胞HEB中miR-1254和CSF-1 mRNA的表达水平。将胶质瘤U87细胞分为空白对照组、mimic NC组、miR-1254 mimic组以及siRNA NC组、CSF-1 siRNA组。采用qRT-PCR检测各组细胞miR-1254及CSF-1的mRNA表达水平；采用Western blotting检测各组细胞CSF-1的蛋白表达水平；采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-1254和CSF-1基因的靶向关系；采用CCK-8法和Transwell侵袭实验检测细胞的增殖和侵袭能力。结果胶质瘤组织中miR-1254 mRNA的相对表达量为0.44±0.16，癌旁组织为1.15±0.28，差异具有统计学意义(t＝12.914，P<0.001)；胶质瘤组织中CSF-1 mRNA的相对表达量为1.96±0.27，癌旁组织为0.98±0.22，差异具有统计学意义(t＝14.970，P<0.001)。胶质瘤细胞U87中miR-1254 mRNA的相对表达量为0.39±0.11，人脑正常胶质细胞HEB中为1.03±0.02，差异具有统计学意义(t＝10.113，P＝0.008)；胶质瘤细胞U87中CSF-1 mRNA相对表达量为1.02±0.03，人脑正常胶质细胞HEB为0.32±0.13，差异具有统计学意义(t＝9.037，P＝0.009)。转染miR-1254后，CSF-1 mRNA、蛋白的表达水平均随miR-1254表达水平的升高而降低。双荧光素酶报告基因实验结果显示，与mimic NC组(1.04±0.12)比较，miR-1254 mimic组(0.31±0.02)CSF-1-WT细胞中荧光活性显著降低(t＝10.430，P<0.001)。转染48 h后，空白对照组(0.71±0.01)、mimic NC组(0.68±0.04)、miR-1254 mimic组(0.35±0.01)细胞增殖能力差异具有统计学意义(F＝252.651，P<0.001)；miR-1254 mimic组与空白对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.001)；miR-1254 mimic组与mimic NC组相比，差异具有统计学意义(P<0.001)。空白对照组(0.71±0.01)、siRNA NC组(0.68±0.04)、CSF-1 siRNA组(0.25±0.01)细胞增殖能力差异具有统计学意义(F＝320.309，P<0.001)；CSF-1 siRNA组与空白对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.001)；CSF-1 siRNA组与siRNA NC组相比，差异具有统计学意义(P<0.001)。侵袭实验结果显示空白对照组(365±27)、mimic NC组(388±24)、miR-1254 mimic组(83±15)细胞穿膜数差异具有统计学意义(F＝173.915，P<0.001)；空白对照组(365±27)、siRNA NC组(404±32)、CSF-1 siRNA组(87±14)细胞穿膜数差异具有统计学意义(F＝141.294，P<0.001)。结论miR-1254在胶质瘤组织和胶质瘤细胞株U87中的表达均显著下降，CSF-1在胶质瘤组织和胶质瘤细胞株U87中的表达均显著升高。过表达miR-1254可能通过靶向降低CSF-1的表达来抑制胶质瘤U87细胞的增殖和侵袭能力。

简介：摘要目的探讨基于18F-脱氧葡萄糖(FDG)PET/CT的影像组学预测神经母细胞瘤(NB)美国儿童肿瘤协作组(COG)危险度分层的价值。方法回顾性分析2018年3月至2019年11月间于北京友谊医院病理证实为NB的125例患儿(男51例、女74例，年龄：0.5～10.5岁)的18F-FDG PET/CT图像。根据COG分层系统将患儿分为高危组和非高危组(包括中危和低危)。分别从PET和CT图像中提取影像组学特征并进行特征筛选。利用logistic回归构建基于影像组学特征的模型(R_model)，计算影像组学评分(Rad_score)；基于Rad_score和人口学特征构建第2个模型(RD_model)；最后基于Rad_score、人口学特征和临床特征构建第3个模型(RDC_model)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各模型的预测性能。结果训练集包含94例NB患儿(高危63例，非高危31例)，验证集包含31例NB患儿(高危21例，非高危10例)。通过筛选得到4个影像组学特征，其中2个特征基于CT图像，另外2个特征基于PET图像。在训练集和验证集中，R_model、RD_model、RDC_model预测NB患儿COG危险度分层的曲线下面积(AUC)分别为0.91和0.86、0.94和0.92、0.98和0.95；准确性分别为86%(81/94)和84%(26/31)、89%(84/94)和84%(26/31)、93%(87/94)和87%(27/31)。结论基于18F-FDG PET/CT的影像组学可准确地预测NB患儿COG危险度分层，联合人口学特征和临床特征，可进一步提高预测COG危险度分层的准确性，为NB个性化精准治疗方案的制定提供帮助。

简介：摘要目的探讨健康者和RA患者血浆来源外泌体对人静脉内皮细胞功能的影响。方法收集健康者和RA患者血浆，用试剂盒分离外泌体后，通过透射电镜观察其形态特征、纳米颗粒分析仪（NTA）测量其大小及免疫印迹实验对表面标志蛋白进行鉴定。通过CCK8、细胞划痕、Transwell小室实验检测外泌体对内皮细胞增殖和迁移侵袭能力的影响；RT-PCR检测细胞分泌缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）含量变化。采用t检验。结果透射电镜观察到双凹圆盘状的囊性小泡，纳米颗粒跟踪分析（NTA）测其直径在50~150 nm，蛋白质印迹法显示出血浆外泌体表面标志蛋白flotillin1和CD81，相对分子质量分别为47 000和26 000。内皮细胞活性随着外泌体浓度增高而降低，但2组差异均无统计学意差义（t=1.86，P>0.05）。与健康者血浆外泌体相比，RA血浆外泌体可显著抑制内皮细胞迁移[（2.24±0.23）和（1.46±0.13），t=6.60，P<0.05]，侵袭能力减弱[（0.673±0.030）和（0.827±0.030），t=8.11，P<0.05]，分泌HIF-1α、VEGF细胞因子的能力也显著降低，差异均有统计学意义[（0.706±0.020）和（0.908±0.040），t=10.10，P<0.05；（0.692±0.010）和（0.841±0.020），t=14.90，P<0.05]。结论血浆来源的外泌体可能在RA并血管损伤中发挥重要的作用。

简介：摘要：目的 分析贝伐珠单抗联合培美曲塞在晚期非鳞非小细胞肺癌维持化疗的疗效。方法 选择2022年4月-2024年3月本院收治的50例晚期非鳞非小细胞肺癌患者为对象。信封法分为对照组（25例）、实验组（25例）。对照组采用培美曲塞单药维持化疗。实验组在对照组基础上联合贝伐珠单抗维持化疗。对比两组肿瘤缓解率、生活质量评分和不良反应。结果 实验组治疗总有效率高于对照组，且治疗后各方面生活质量评分均高于对照组（P<0.05）。实验组、对照组不良反应发生率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 贝伐珠单抗联合培美曲塞应用于晚期非鳞非小细胞肺癌维持化疗的疗效优越，可控制肿瘤发展并改善患者生活质量，安全性可控。