简介:摘要目的研究核转录因子E2相关因子2(Nrf2)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对高糖状态下人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖的影响,并探讨糖代谢相关酶在Nrf2及PI3K/Akt影响K1细胞增殖中的作用。方法根据不同处理因素将K1细胞分为5组:正糖组(正糖5.5 mmol/L培养48 h)、高糖组(正糖5.5 mmol/L培养24 h后,换25 mmol/L高糖继续培养24 h)、Nrf2siRNA组(正糖条件下siRNA转染细胞24 h后,换高糖继续培养24 h)、NcsiRNA组(正糖条件下阴性转染细胞24 h后,换高糖继续培养24 h)、LY294002组(正糖条件下培养24 h后,加50 μmol/L LY294002预孵育0.5 h再换用高糖培养24 h)。K1细胞按照上述分组处理后分别用以下方法检测相关指标:MTT法检测细胞增殖,细胞免疫荧光法检测Nrf2蛋白的分布,Western blot检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、核Nrf2、浆Nrf2、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、丙酮酸激酶M2(PKM2)蛋白的表达水平。两组数据比较采用独立样本t检验,多组数据比较采用单因素方差分析。结果与正糖组比较,高糖组K1细胞增殖率、PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、G6PD、PKM2表达显著升高[分别为(87.31±3.67)%比(126.64±5.41)%、0.272±0.039比0.425±0.019、0.168±0.035比0.446±0.021、0.308±0.026比0.597±0.014、0.421±0.024比0.626±0.026、0.198±0.023比0.314±0.023,t=6.109~16.951,均P<0.05],Nrf2在细胞核分布的比例显著升高[(21.6±4.5)%比(91.2±3.5)%,χ2=98.497,P<0.01];与高糖组比较,Nrf2siRNA组K1细胞增殖率明显下降,G6PD、PKM2的蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(t=8.936、7.056、8.843,均P<0.01),LY294002组也呈现相似的趋势(t=7.228、6.351、7.910;均P<0.01);与高糖组比较,LY294002组K1细胞PI3K、Akt蛋白水平无明显改变,而p-PI3K、p-Akt、核Nrf2、浆Nrf2蛋白水平及Nrf2核浆蛋白比值均被显著抑制(t=5.748~23.572,均P<0.01)。结论高糖可激活PI3K/Akt信号通路,上调Nrf2表达与核转位,上调磷酸戊糖和糖酵解途径相关酶PKM2、G6PD的表达,促进K1细胞增殖。
简介:摘要目的观察2型糖尿病患者罹患新型冠状病毒肺炎后的主要临床特征及转归,并与非糖尿病患者进行比较。方法采取单中心回顾性观察性研究的方法,纳入于2020年1月1日至2月26日在中部战区总医院确诊为新冠肺炎的88例住院患者,分为糖尿病组和非糖尿病组,各44例。收集患者病史、实验室检查、院内治疗方案和疾病转归等相关信息并进行比较。结果糖尿病组患者临床症状多样,主要为发热(75.0%)、咳嗽(75.0%)、乏力(52.3%)等。与非糖尿病组相比较,糖尿病组入院时收缩压偏高[131.50(120.00, 140.75)对125.00(120.00,131.75)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa, P=0.021]、血氧饱和度偏低[96.00%(94.25%,97.00%)对97.00%(95.00%,98.00%),P=0.038];糖尿病组既往多合并高血压及慢性肾病;糖尿病组空腹血糖[7.64(6.12,15.43)对5.62(5.25,6.50)mmol/L,P<0.01]、白细胞介素6(IL-6)[19.85(6.50,43.38)对10.80(3.03,20.90)pg/ml,P=0.046]均显著高于非糖尿病组。病程中糖尿病组更容易出现继发感染(27.3%对9.1%,P=0.027)、ARDS(22.7%对4.5%,P=0.013)和休克(4.5%对0%,P<0.01);治疗上更多给予机械通气治疗(20.5%对4.5%,P=0.024);更易进展为危重型(20.5%对4.5%,P=0.024),进展为重症状态的时间更短[3(1.75, 5.25)对6(3.00, 12.00)天,P=0.019];重症状态的持续时间更长[26.5(15.00, 31.50)对9(8.00, 13.00)天,P=0.026]。结论感染新冠肺炎的2型糖尿病患者临床症状多样;多合并高血压、慢性肾病等疾病;炎症反应更明显;COVID-19并发症多,更容易短时间进展为持续重症状态。