摘要
摘要目的评价不同密度低温缺氧复氧大鼠心脏成纤维细胞(RCF)对心肌细胞损伤和细胞间偶联的影响。方法体外培养RCF，采用随机数字表方法分为3组(n＝12)：密度0.5×105个/ml组(T0.5组)、密度为1.0×105个/ml组(T1.0组)和密度为2.0×105个/ml组(T2.0组)。3组置于缺氧装置中，以5 L/min的速度持续吹入95%N2+5%CO2 15 min进行缺氧处理，然后置入4 ℃冰箱培养1 h进行低温处理；培养完成后，置于37 ℃、含95%空气+5%CO2培养箱中复氧4 h。上述处理结束后，3组分别与相同密度(1.0×105个/ml)的心肌细胞采用Transwell小室间接共培养16 h，心肌细胞接种于Transwell小室下层，RCF接种于Transwell小室上层。共培养结束后，收集心肌细胞，采用CCK8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，实时荧光定量PCR法检测缝隙连接蛋白43(Cx43) mRNA的表达，Western blot法检测Cx43及磷酸化Cx43(p-Cx43)的表达。结果与T0.5组相比，T1.0组和T2.0组心肌细胞活力、细胞凋亡率、Cx43、p-Cx43及Cx43 mRNA表达水平降低(P<0.01)；与T1.0组相比，T2.0组心肌细胞活力、细胞凋亡率、Cx43和p-Cx43表达水平降低(P<0.01)，心肌细胞Cx43 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论低温缺氧复氧RCF在一定范围内呈密度依赖性地诱导心肌细胞损伤，其机制可能与下调Cx43的表达，降低Cx43的活性有关。
出版日期
2022年12月13日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
