摘要
摘要目的探讨食管鳞状细胞癌患者放疗前后血浆miRNA-210(miR-210)表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法收集2013年12月至2015年3月山东省临沂市人民医院22例初治食管鳞状细胞癌患者(食管癌组)根治性放疗前后及15名健康志愿者(健康对照组)血液标本。以miRNA-21(miR-21)为阳性对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测患者放疗前后血浆miR-210和miR-21的表达水平及常氧和乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中miR-210的表达。采用EdU细胞增殖实验、流式细胞术检测未转染组(空白对照组)、转染miR-210模拟物阴性对照RNA组(阴性对照组)、转染miR-210模拟物RNA组(miR-210组)Eca109细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果食管癌组及健康对照组共采集合格血液样本59份。食管癌组放疗前血浆miR-210、miR-21的相对表达量[中位数(P25,P75)]较健康对照组升高,差异均有统计学意义[4.04×10-4(2.06×10-4,6.68×10-4)比0.54×10-4(0.28×10-4,0.77×10-4),397.07×10-4(181.77×10-4,742.93×10-4)比127.43×10-4(21.97×10-4,184.65×10-4);U值分别为37.0、49.0,均P<0.01]。食管癌组患者治疗前血浆miR-210、miR-21表达水平与肿瘤部位和分化程度均无关(均P>0.05)。根治性放疗1周后,食管癌组血浆miR-210、miR-21的相对表达量分别为65.33×10-4(22.15×10-4,160.87×10-4)、437.23×10- 4(327.18×10-4,749.09×10-4),均较放疗前升高(U值分别为32.0、154.0,均P<0.05),其中miR-210升高更为显著。Eca109细胞乏氧培养12 h后, miR-210的表达水平较常氧组增高,24 h后达峰值,差异有统计学意义(P<0.01)。EdU细胞增殖实验显示,miR-210组转染24、48 h后Eca109细胞增殖活力较阴性对照组和空白对照组均下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。流式细胞术分析显示,转染24 h后,同阴性对照组和空白对照组相比,miR-210组Eca109细胞G2/M期比例增高,差异有统计学意义(P<0.05);转染48 h后,G2/M期比例增高更明显(P<0.01);转染24、48 h后,三组凋亡细胞比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论miR-210在食管鳞状细胞癌患者血浆中高表达,尤其是在根治性放疗后血浆miR-210表达水平明显升高。miR-210在乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中高表达,miR-210过表达可抑制细胞增殖,其机制可能与G2/M期阻滞相关。
出版日期
2020年08月12日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)