摘要
摘要目的比较腺相关病毒(AAV)不同血清型对小鼠视网膜层的趋向性。方法构建pFastBacDual-inCap衣壳质粒和pFastBacDual-ITR-CMV-EGFP基因组质粒；包装重组腺相关病毒2型(rAAV2)、rAAV6、rAAV8、rAAV9；以感染复数(MOI)2000的比例感染HEK293T细胞，24 h后观察荧光表达；应用随机数字表法将C57BL/6小鼠分为rAAV2、rAAV6、rAAV8、rAAV9组和对照组，每组5只，分别双眼玻璃体腔注射rAAV2、rAAV6、rAAV8、rAAV9和磷酸盐缓冲液(PBS)各1 μl，注射后2周，制作眼球冰冻切片以及视网膜铺片，分别应用倒置荧光显微镜和激光扫描共焦显微镜观察rAAV不同血清型增强型绿色荧光蛋白(EGFP)荧光强度和感染部位。应用倒置荧光显微镜观察玻璃体腔注射rAAV2后2周、1个月、3个月EGFP荧光强度变化。结果重组病毒对HEK293T的感染效率从高到低依次为rAAV2、rAAV6、rAAV8和rAAV9，转导效率分别为39.5%、18.4%、8.7%和4.6%；在小鼠视网膜中，rAAV2和rAAV6在神经节细胞表达水平较高，rAAV8和rAAV9在视网膜色素上皮(RPE)和光感受器细胞中表达水平较高；rAAV2介导EGFP可于注射后2周、1个月、3个月内在视网膜稳定表达。结论rAAV不同血清型对视网膜RPE细胞和神经节细胞具有高趋向性和高效表达，rAAV2玻璃体腔注射后转导效率较高，且在注射后3个月内稳定表达。
出版日期
2020年08月10日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
