摘要
目的探讨周期性依赖性蛋白激酶5（Cdk5）的活性抑制肽（CIP）在老年退行性疾病中的治疗作用及其机制。方法体外培养大鼠E18胚胎大脑皮质神经元细胞（以下简称神经细胞）和Min6小鼠胰岛细胞（以下简称胰岛细胞）。应用基因克隆CIP质粒,转入腺病毒,转染细胞。（1）根据是否导入CIP基因分为空载体组（EV组）和CIP转染组。（2）应用双氧水（H2O2）刺激神经细胞;应用不同浓度的葡萄糖（5mmol/L和25mmol/L）刺激胰岛细胞,分为对照组、H2O2组（或高糖组）、H2O2＋CIP组（或高糖＋CIP组）。用免疫印迹和免疫荧光检测基因的表达和细胞凋亡情况;同位素标记测定酶的活性;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定胰岛素的分泌水平。结果H2O2刺激神经细胞1h后,可诱发p25表达,引起Cdk5过度活性,导致Tau蛋白过度磷酸化从而诱发细胞凋亡增多。CIP转染组较H2O2组Cdk5的活性降低（P〈0.01）;Tau蛋白以及凋亡相关蛋白的表达水平也降低（P均〈0.01）;高糖刺激神经细胞4h,诱发p35表达增多,使Cdk5活性增高而抑制胰岛素的表达和分泌。CIP转染组较高糖组Cdk5的活性降低（P〈0.01）;胰岛素的表达量和胰岛素的分泌水平亦明显增高（P〈0.01）。结论（1）在神经细胞中,CIP可以降低由于p25导致的Cdk5的过度活性,减少Tau蛋白的过度磷酸化,从而保护神经细胞,减少凋亡;（2）在胰岛细胞中,CIP通过抑制高糖引起的Cdk5过度激活状态,增加胰岛素的分泌。这可能是CIP在老年退行性疾病中起到保护性作用的机制之一。因此,CIP可能成为一个非常有前景的治疗老年退行性疾病（如老年痴呆和糖尿病）的新药物。
出版日期
2013年02月12日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
