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  • 简介:目的:了解北京地区Merkel细胞多瘤病毒(MCPyV)在呼吸道感染住院儿童中流行情况和临床特点。方法:采集北京友谊医院儿科呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物样本200份,并收集相应患儿临床资料,采用Taq.Manreal—timePCR方法检测MCPyVLTAg基因,并经测序确认;MCPyV阳性样本同时检测常见的人呼吸道病毒混合感染情况。结果:200份标本中共检出MCPyV阳性6例,检出率3%;感染儿童年龄从6月到5岁,其中年龄≤3占83.3%(5/6)。诊断包括支气管肺炎和急性支气管炎,临床表现包括发热、咳嗽、喘息。6例阳性样本均与其他呼吸道病毒混合感染,A型流感病毒和呼吸道合胞病毒混合感染最常见,6例阳性样本MCPyV载量均低于10拷贝/μL。结论:real—timePCR方法检测呼吸道感染住院患儿中MCPyV感染率为3%,6例MCPyV阳性样本均与其他呼吸道病毒混合感染且MCPyV载量较低,不能认为MCPyV是儿童呼吸道感染病因。

  • 标签: Merkel细胞多瘤病毒 TaqMan探针实时荧光定量PCR 呼吸道感染
  • 简介:目的:分析阿奇霉素联合糖皮质激素治疗重症支原体肺炎患儿临床效果安全性。方法:选择112例重症支原体肺炎患儿并通过抽签法分为对照与观察,每组各56例。对照予以阿奇霉素治疗,观察在对照基础上加用糖皮质激素治疗。观察并比较患儿治疗前后血沉(ESR)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、同工酶MB(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(AST)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、CD4^+CD8^+,临床疗效不良反应发生情况。结果:观察有效率为96.4%,显著高于对照(82.1%),差异有统计学意义(P〈0.05)。治疗后,ESR、血清LDH、CK-MB、CK、AST、CRP、IL-6、TNF-α水平CD8^+均较治疗显著降低,且观察以上指标均明显低于对照;CD4^+均较治疗前明显上升,且观察显著高于对照,差异均有统计学意义(P〈0.05)。观察退热、咳嗽缓解、肺部湿啰音消失时间均明显短于对照(P〈0.05)。不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:阿奇霉素联合糖皮质激素治疗小儿重症支原体肺炎临床效果明显优于单用阿奇霉素治疗,可有效减轻心肌损伤和炎症反应,并提高患儿免疫功能,且安全性高。

  • 标签: 重症支原体肺炎 阿奇霉素 糖皮质激素
  • 简介:目的:探讨炎症因子在大叶性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液血清中表达水平及其临床意义.方法:收集2014年6月至2016年6月我院儿科收治79例大叶性肺炎患儿为病例,按照临床肺部感染评分(CPIS)分为重度(n=46)和轻度(n=33),于同期随机选取30例健康儿童为对照,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组支气管肺泡灌洗液血清炎症因子如白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF-αrα)以及高迁移率族蛋白B1(HMGBl)表达水平.结果:重度、轻度血清IL-6、IL-8、IL-17、TN下-ααHMGB1水平高于对照,重度血清IL-6、IL-8、IL-17、TNF-ααHMGB1水平高于轻度,差异有统计学意义(P<0.05).病例患儿支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-8、IL-17、TNF-αHMGB1水平高于血清,差异有统计学意义(P<0.05).重度、轻度支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-8、IL-17、TNF-oαHMGB1水平高于血清,差异有统计学意义(P<0.05),重度支气管肺泡灌洗液、血清IL-6、IL-8、IL-17、TNF-αHMGB1水平分别高于轻度,差异有统计学意义(P<0.05).经Spearman积矩相关分析,支气管肺泡灌洗液与血清中IL-6、IL-8、IL-17、TNF-αHMGB1水平分别呈正相关关系(r=0.711、0.695、0.752、0.793、0.728,P<0.05).结论:炎症因子在大叶性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液血清中呈高表达,并与大叶性肺炎病情严重程度密切相关,联合检测有助于早期评估病情.

  • 标签: 大叶性肺炎 患儿 支气管肺泡灌洗液 血清 炎症因子
  • 简介:目的:构建带Myc标签LC3B—PLA2基因真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B切割作用。方法:以本实验室保存乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染方法检测Atg4B对LC3B切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中作用奠定了基础。

  • 标签: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
  • 简介:目的:探究涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中COX-2、Survivinlivin表达临床意义.方法:收集2013年1月~2016年11月我院肿瘤外科收治63例SACC患者癌变病理组织标本与30例SACC患者癌旁正常组织标本为研究对象;应用免疫化法(SP法)检测COX-2、Survivinlivin蛋白在SACC组织和正常组织中表达情况,分析SACC组织COX-2、Survivinlivin表达与临床病理特征关系,采用Spearman秩相关分析COX-2、Survivinlivin之间关系.结果:Survivin、livinCOX-2在SACC组织中阳性率依次为66.67%(42/63)、57.14%(36/63)73.02%(46/63),其阳性主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜上,而正常组织细胞中未发现阳性表达;Survivin、livinCOX-2在不同性别、年龄、肿瘤部位阳性率无统计学差异(P>0.05);实体型、淋巴转移、中低分化Ⅲ+Ⅳ期患者Survivin、livinCOX-2阳性率高于筛孔型+管状型、淋巴未转移、高分化、Ⅰ+Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman秩相关显示,Survivin与COX-2呈正相关(r=0.632,P<0.05);livin与COX-2呈正相关(r=0.453,P<0.05);Survivin与livin无相关(r=0.143,P>0.05).结论:Survivin、livinCOX-2在SACC患者中呈高表达,可能对SACC发生、发展具有促进作用;Survivin、livinCOX-2可作为临床早期筛查SACC并预测疾病转归指标.

  • 标签: 涎腺腺样囊性癌 COX-2 SURVIVIN LIVIN 相关性
  • 简介:目的:探讨冠心病患者血清中趋化因子CX3CL1表达在冠心病中临床意义。方法:采用病例-对照研究方法,依据临床症状收集经冠脉造影显示确诊为冠心病患者250例,其中临床症状诊断为稳定性心绞痛患者75例,不稳定型心绞痛患者75例,急性心肌梗死患者100例(其中包含ST段抬高型急性心肌梗死和非ST段抬高型急性心肌梗死患者各50例)。同期收集对照200例,对照为冠状动脉造影显示为正常。ELISA方法检测上述不同人群血清中趋化因子CX3CL1表达变化,利用流式细胞仪检测上述不同人群血清中CD4^+CD28~-CX3CR1+T细胞表达含量变化。结果:冠心病患者血清趋化因子CX3CL1表达明显高于对照(P〈0.05);与稳定型冠心病患者相比较,不稳定型冠心病和急性心肌梗死患者血清中趋化因子CX3CL1水平明显高于稳定型冠心病患者(P〈0.05);ST段抬高型急性心肌梗死患者血清CX3CL1表达水平高于非ST段抬高型急性心肌梗死患者(P〈0.05)。不稳定型心绞痛患者冠状动脉介入手术后即刻抽取患者静脉血,血清中CX3CL1表达含量明显高于冠状动脉介入手术前血清中表达含量。冠心病患者CD4^+CD28~-CX3CR1+T细胞受体表达含量明显增高,在急性ST段抬高型心肌梗死患者血清中表达最高(P〈0.05)。结论:趋化因子CX3CL1可能参与冠心病动脉粥样硬化不稳定斑块形成,并且可能成为外周血中预测不稳定型斑块血清生物学标志物。

  • 标签: 冠心病 CX3CL1 动脉粥样硬化
  • 简介:甘蓝型油菜是一种重要油料作物,为了改良其种子脂肪酸组分,提升其经济价值,本研究分析了油菜种子发育时期脂肪酸合成积累模式BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因表达规律,认为这3个基因在种子发育中后期(授粉后25d起)高效表达对油酸合成积累有着重要影响。通过Napin启动子诱导对油菜植株中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因进行RNAi共干扰抑制,以达到提升油酸含量目的。试验结果表明,转基因油菜种子中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因表达受到强烈抑制,种子中油酸含量由66.76%提升至82.98%,且油脂合成相关基因同步出现表达上调。

  • 标签: 油菜种子 油酸 BnFAD2 BnFAD3 BnFATB
  • 简介:目的:研究Sprouty2(SPRY2)基因在胃癌肿瘤细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭转移影响。方法:体外培养人胃癌细胞(BGC-823),采用慢病毒介导shRNA沉默SPRY2基因,并用实时定量PCR与Westernblot检测其SPRY2、E-钙黏蛋白(E—cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达,采用细胞划痕实验、Transwell实验检测SPRY2基因沉默后胃癌细胞侵袭转移能力变化。结果:在慢病毒介导shRNA沉默SPRY2基因的人胃癌BGC-823细胞中,SPRY2mRNA和蛋白表达明显降低(P〈0.05),SPRY2沉默后人胃癌细胞E—cadherin蛋白表达增多(P〈0.05),vimentin蛋白表达减少(P〈0.05)。此外,SPRY2沉默后,胃癌细胞迁移能力和侵袭能力明显减弱(P值均P〈0.05)。结论:Sprouty-2基因通过调节E-cadherin与vimentin表达参与胃癌细胞上皮一间质转化,进而促进胃癌细胞迁移与侵袭。

  • 标签: 胃癌 Sprouty-2 上皮-间质转化 侵袭 转移
  • 简介:水稻在抽穗开花期对高温胁迫非常敏感,通过挖掘耐热资源,培育耐热水稻品种是应对高温热害最有效方式。前期研究发现,地方稻资源D43在花期连续高温条件下能保持较高结实率。本研究在大田和人工气候室不同高温处理下,分析了D43开花时间与耐热性之间相互关系。结果表明,高温能够使水稻开花时间提前,D43表现出稳定早花时特性,高温胁迫下开花时间集中在8∶30~10∶00;在开花时间段恒定高温胁迫下,D43结实率较低;但在大田高温和人工气候室模拟高温胁迫下,D43开花时间避开了日高温段,从而表现出较高结实率;花器官形态性状包括花药开裂率、柱头上花粉附着数、花粉萌发数与结实率之间呈显著正相关,因此可用于评价水稻花期耐热性。

  • 标签: 水稻 耐热性 开花时间
  • 简介:目的:从真核细胞中获得骨形态发生蛋白2(BMP2)编码基因,构建其真核表达载体并进行鉴定。方法:提取人HeLa细胞总RNA,经反转录后用特异性引物扩增BMP2编码区,连接至pcDNA3.1载体,筛选阳性克隆并进行功能学鉴定。结果:反转录PCR获得1100bp片段,经分子克隆后鉴定序列与BMP2一致,并且在真核细胞中能够诱导Smad1/5/8磷酸化。结论:构建了真核表达载体pcDNA3.1-BMP2并验证了其体内功能,为后续探讨BMP2在骨发育中作用机制打下基础。

  • 标签: 骨形态发生蛋白2 真核表达载体 Smad1/5/8
  • 简介:目的应用转录技术,对UVA照射后白念珠菌菌丝生物膜进行基因表达分析.方法体外构建白念珠菌(ATCC90028)生物膜,采用UVA-LED抗菌设备(复旦大学光电所制,波长365nm,强度13mW/cm2,频率100Hz),照射白念珠菌生物膜5min、10min、15min,对照不光照.用转录技术分析UVA实验和对照之间差异表达基因,进行GO、KEGG遗传差异富集分析.结果UVA光照相对于对照有大量差异表达基因,核糖体合成RIO2基因、氨基糖和核苷糖代谢相关基因MCR1、CBR1、内质网蛋白加工途径相关基因SHP1显著上调;RNA降解途径相关基因MPP6和细胞内吞作用相关基因CHMP6显著下调.结论UVA直接或间接调节白念珠菌菌丝生物膜相关生理代谢途径,参与诱发细胞凋亡过程.

  • 标签: 白念珠菌 UVA RNA-seq测序 差异表达基因
  • 简介:水稻白叶枯病是世界性水稻病害,严重威胁水稻高产和稳产。为了挖掘水稻抗白叶枯病新基因,本研究对一个野生稻基因导入系W6023进行了白叶枯病多菌系接种鉴定抗谱分析,发现W6023具有广谱抗病性。用强致病菌PXO99诱导W6023及其感病轮回亲本IR24后进行转录测序,分别获得105644962和91022599条序列,通过GO注释KEGG富集分析,发现差异表达基因主要富集在次生代谢产物生物合成、植物激素信号转导糖代谢途径等方面。在这些差异表达基因中,发现203个基因表达有显著差异,其中在W6023中上调表达基因有114个(56.2%),下调表达有89个(43.8%),而且35.9%分布在第11染色体上。生物信息学分析发现在203个差异表达基因中有16个属于类抗病基因,如NBS-LRR等;14个直接或间接与水稻体内过氧化物代谢相关,如编码过氧化物酶和金属硫蛋白等;6个编码抗病相关转录因子,如WRKY和NAC等;18个为信号传导相关基因,编码钙调素结合蛋白和萜类合成酶等。随机选择6个W6023中上调表达和3个IR24中上调表达基因进行RT-PCRqRT-PCR分析,结果与转录测序结果一致,表明本研究获得转录测序数据结果是可靠,为以后更深入挖掘W6023抗病基因分子机理研究提供了基础。

  • 标签: 水稻 抗病基因 白叶枯病 转录组测序 差异表达基因
  • 简介:在真菌感染时,宿主免疫细胞通过模式识别受体(PRR)识别β-葡聚糖等多种病原体相关分子模式(PAMP)引发抗真菌天然免疫。NLR家族中NLRP3与ASC和caspase-1共同组成NLRP3炎症小体,参与或调控真菌感染。该文就近年来关于NLRP3炎症小体在真菌感染中作用作一综述。

  • 标签: 白念珠菌 NLRP3炎症小体 天然免疫 模式识别受体 病原体相关分子模式
  • 简介:目的:探讨经椎旁肌间隙入路治疗胸腰椎骨折临床疗效对Cobb’S角与椎体功能影响。方法:选择2013年8月至2015年8月我院接诊94例胸腰椎骨折患者,通过随机数表法分为观察(n=47)和对照(n=47),观察使用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术,对照使用传统开放式置入椎弓根螺钉内固定术。比较围术期情况术前术后视觉模拟评分法(VAS)、下腰痛功能障碍指数(ODD、Cobb’S角和椎体前缘高度变化。结果:观察切口长度、手术时间、住院时间、卧床时间均明显短于对照,术中出血量明显少于对照(P〈0.05);手术前VAS评分、ODI评分、Cobb’S角、椎体前缘高度比较差异均无统计学意义(P〉0.05),手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均较治疗显著降低(P〈0.05),手术后1个月、1年时Cobb’S角、椎体前缘高度均显著改善(P〈0.05),且观察手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均明显低于对照(P〈O.05),手术后1个月时Cobb’s角、椎体前缘高度均优于对照(P〈0.05),但手术后1年时Cobb’S角、椎体前缘高度比较无显著差异(P〉O.05)。结论:在胸腰椎骨折患者中应用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术效果显著,其具有创伤小、手术时间短、出血量少、术后椎体功能恢复快等优点。

  • 标签: 胸腰椎骨折 椎旁肌间隙入路 Cobb’S角 椎体功能
  • 简介:目的探讨适合RVVC患者治疗方案。方法对45例RVVC患者进行阴道分泌物悬滴法检查和真菌培养法检查,根据药敏结果氟康唑(对氟康唑耐药改用伊曲康唑)口服联合性霉素B阴道用药强化治疗3个月,再用克霉唑阴道片巩固治疗6个月,停药后定期随访1a,记录研究对象主诉,并取阴道分泌物进行悬滴法和培养法检查是否存在念珠菌。结果45例研究对象阴道分泌物中,白念珠菌39例(86.67%),光滑念珠菌4例(8.89%),克柔念珠菌1例(2.22%),热带念珠菌1例(2.22%)。念珠菌对伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶和性霉素B耐药率分别为28.89%、22.22%、17.78%、8.89%和0.00%。随访1a中共有4例复发,治疗有效率为91.11%,无效率为8.89%。结论RVVC主要致病菌是白念珠菌。念珠菌对性霉素B敏感性高、耐药性低。氟康唑或伊曲康唑口服联合性霉素B阴道局部用药作强化治疗加克霉唑阴道片巩固治疗,有较高RVVC治疗有效率。

  • 标签: 复发性外阴阴道念珠菌病 真菌培养 药敏 两性霉素B 氟康唑
  • 简介:目的:探讨经腹次全子宫切除术治疗子宫肌瘤临床效果对血清血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平影响。方法:选择我院2014年2月~2016年2月收治106例子宫肌瘤患者,参照抽签法分作对照与研究。对照采用经腹全子宫切除术治疗,研究采用经腹次全子宫切除术治疗。比较手术时间,出血量,肛门排气时间,住院时间,手术前后VEGF、IL-6、IL-8、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)水平变化并发症发生情况。结果:研究手术时间、出血量、肛门排气时间、住院时间均明显短于对照(P〈0.05)。手术前,血清VEGF、IL-6、IL-8、FSH、E2、AMH水平比较差异无统计学意义(P〉0.05);手术后,研究血清IL-6、IL-8、E2、AMH水平明显低于对照(P〈0.05),血清FSH水平明显高于对照,差异具有统计学意义(P〈0.05),血清VEGF水平比较差异无统计学意义(P〉0.05)。研究并发症发生率显著低于对照(P〈0.05)。结论:采用经腹次全子宫切除术治疗子宫肌瘤患者可起到与经腹全子宫切除术相似的应用效果,但经腹次全子宫切除术对机体形成创伤较小,利于术后卵巢功能恢复,可能与其降低患者术后血清IL-6、IL-8、VEGF水平有关。

  • 标签: 子宫肌瘤 经腹次全子宫切除术 血管内皮生长因子 白细胞介素-6 白细胞介素-8
  • 简介:目的:研究雷公藤多苷片联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎(RA)临床疗效对血清炎症因子影响。方法:选取2014年1月-2015年8月我院收治RA患者60例,按治疗方法不同分为观察和对照各30例,观察应用雷公藤多苷片联合甲氨蝶呤治疗,对照单纯应用甲氨蝶呤治疗,对比临床疗效治疗前后临床症状、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)类风湿因子(RF)水平。结果:观察总有效率为93.33%,明显高于对照73.33%(P〈0.05);治疗后观察临床症状(晨僵时间、关节压痛肿胀数、关节疼痛度肿胀指数)均较对照明显改善(P〈0.05);治疗血清ESR、CRP、RF水平均降低,且观察明显低于对照(P〈0.05);观察不良反应率为13.33%,低于对照10.00%,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:雷公藤多苷片联合甲氨蝶呤治疗RA能够有效控制炎症反应,改善临床症状,临床疗效显著,且不增加副反应,是一种安全可靠联合治疗方案,值得推广应用。

  • 标签: 类风湿关节炎 雷公藤多苷片 甲氨蝶呤 炎症因子
  • 简介:植物替代控制是利用一种或多种植物生长优势控制入侵杂草方法,它是控制外来杂草危害有效途径之一;因其既可控制入侵杂草危害又能取得一定经济效益生态效益而被人们广泛接受。本文简要介绍了我国3种入侵杂草植物替代控制技术研究与应用现状,系统总结了植物替代控制技术阻截和修复豚草、紫茎泽兰黄顶菊扩散危害技术模式和效果,提出了植物替代控制技术未来研究方向和重点。

  • 标签: 替代控制 入侵杂草 筛选评价 豚草 紫茎泽兰 黄顶菊
  • 简介:目的Tg2576转基因小鼠与阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)患者病理改变相近,本文动态研究了Tg2576小鼠在AD发病不同阶段血清代谢物特征,为临床AD早期诊断提供代谢依据。方法收集Tg2576小鼠在AD发病初期(6个月)和末期(12个月)时血清样本,采集样本1HNMR谱并运用多变量分析方法进行代谢特征分析。结果结果显示Tg2576与C57小鼠分别在6和12个月时血清代谢特征有明显差异,且不同AD发病阶段Tg2576小鼠具有明显代谢差异。与C57小鼠相比,在AD出现初期阶段,Tg2576小鼠血清中乳酸、肌醇和氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸)含量升高,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱、甘氨酸和葡萄糖含量降低;在AD发病末期,血清中乳酸、肌醇和丙氨酸含量继续上升,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱和甘氨酸含量持续降低,同时谷氨酸和肌酸含量初步显示出下降趋势。通过比较AD初期和末期血清代谢物,我们能够发现疾病末期血清中乳酸、肌醇和丙氨酸含量升高,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱、甘油磷脂酰胆碱含量降低。在这些代谢物中,乳酸、脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱在AD发生初期已具有显著性变化,且与AD发生严重程度密切相关。结论结果表明Tg2576小鼠中乳酸与阿尔茨海默病程度加重呈正相关变化,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱呈负相关改变,且这些代谢物随着疾病发展呈动态进行性变化,可能是AD早期诊断重要代谢标志物。

  • 标签: 阿尔茨海默病 Tg2576小鼠 核磁共振氢谱 代谢组学