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  • 简介:产生免疫原性残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆鼠抗人纤维蛋白抗体链Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基差异,将有差异鼠表面残基换成人。提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体链Fv结构经Profile-3D验证合理,置换表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs结构,应不会影响与纤维蛋白亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。

  • 标签: 单克隆抗体 人源化 表面再塑 分子设计
  • 简介:P100BloodCollectionSystem血液采集系统提供临床蛋白组学和发现生物标记使用采血系统。在采血过程中体内血蛋白很快降解,而P100管中含有专利蛋白稳定剂可以在静脉采血时溶解,保护血蛋白不被降解。

  • 标签: 蛋白组学 采集系统 血液 COLLECTION System 静脉采血
  • 简介:人工合成了芋螺毒素SO3基因片段,通过链延伸方法获得了SO3全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体链抗体基因pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体链抗体和SO3融合基因重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

  • 标签: 转铁蛋白受体 单链抗体 芋螺毒素SO3 血脑屏障 大鼠 融合蛋白
  • 简介:SDS-PAGE将SDS所带大量阴性电荷和聚丙烯酰胺凝胶高分辨率相结合,使蛋白自身电荷被大量阴性电荷所淹没,这样蛋白在电泳时迁移率仅与其分子大小有关。蛋白电泳时凝胶孔径大小和电泳介质对不同大小分子分辨率有不同影响,特别对相对分子量小于10000分子量蛋白,常规电泳方法完全不能分辨,国外报道尿素、缓冲液浓度及聚丙烯酰胺中单体和双体比例对蛋白分辨率有较大影响,但将几种不同因素进行综合研究,未见报道。

  • 标签: 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 分离胶 小分子物质 低分子量 蛋白分子
  • 简介:轮状病毒(rotavirus,RV)在世界范围内造成婴幼儿和幼年动物病毒性腹泻最主要病原.A组RVNSP4蛋白被认为病毒毒素,近年来研究发现,这个非结构蛋白NSP4在RV致病过程中起着重要作用.本文简要综述了多功能肠毒素NSP4研究进展.

  • 标签: 轮状病毒 非结构蛋白 肠毒素 NSP4
  • 简介:神经鞘脂酰胺存在于细胞双层脂肪外膜,多年来人们认为它在此外膜中只是具有结构上功能。但是,现在已知,这类脂肪也能从细胞膜中释放出来,用作重要二级信使,诱发细胞凋亡和生长停滞。

  • 标签: 细胞死亡 细胞凋亡 细胞膜 外膜 脂肪 鞘脂
  • 简介:河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)种毒性很强、相对分子质量非蛋白毒素,最初从豚科鱼中发现,故被命名为河豚毒素。1985年有人提出了河豚鱼TTX体外起源因素,认为所有能产生TTX生物都与其体内能分泌TTX微生物有着密切联系,但有部分研究人员证实东方纯在孵化期间能自行产生TTX。TTX为典型Na^+通道阻断剂,中毒者往往肢体麻木、瘫痪、甚至死亡;但另方面,TTX具有镇痛、镇静、降压等功效,在临床上应用十分广泛。本文简要介绍TTX起源、毒性作用机制、毒性控制、临床及药理学上应用,及其存在问题和应用前景。

  • 标签: 河豚毒素 起源 毒理机制 应用
  • 简介:肉毒毒素目前已知毒性最强细菌蛋白质,极少量便可以致人死亡,我国每年都有散发病例出现,并且它极有可能被用于恐怖行动或被些国家用作生物战剂。肉毒毒素中和抗体肉毒毒素中毒后惟有效药物。与马源毒素血清相比,重组基因工程中和抗体具有很多优势,目前肉毒毒素预防和治疗研究主要方向。简要综述了肉毒毒素基因工程中和抗体研究现状、保护性抗原选择、体内外中和活性检测方法及研发难点、解决方法等。

  • 标签: 肉毒毒素 中和抗体
  • 简介:EPA和DHA人体所需重要不饱和脂肪酸,发挥多种重要生理作用,影响人类生长发育与身体健康.近年来,人们健康保健意识逐渐加强,更为关注EPA和DHA保健营养价值.因此,EPA和DHA生物制品提取开发成为了食物资源开发利用热点问题.作为有较疗效好、安全性高营养品,培养富含EPA、DHA生物制品会有个光明前景.本文介绍了EPA和DHA生物学特性、来源,并着重阐述其在机体脂质代谢中作用.

  • 标签: EPA DHA 脂质代谢
  • 简介:用纯化CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素保护免疫力。

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:利用基因工程表达志贺毒素B亚基纯化产物研究志贺毒素分子组装机理。首先对StxB进行了分离纯化,并将蛋白质纯品溶解在磷酸缓冲液中。利用蛋白质交联方法证实,在磷酸缓冲液体系中StxB可以自发聚合为不同分子结构形式(单体至五聚体),并可以与游离和细胞膜表面的受体结合,对志贺毒素毒素细胞毒性有竞争抑制作用。结果表明,在没有A亚基存在情况下,单独StxB也可以自发组装为多聚体,说明StxB具有自身组装能力。

  • 标签: 志贺毒素 B亚基 分子组装
  • 简介:利用O-超家族芋螺毒素具有保守信号肽编码序列特性,采用RACE方法,对线纹芋螺O-超家族芋螺毒素cDNA进行克隆、序列测定,并经化学合成,获得种新型高活性芋螺多肽毒素SO3。该肽含25个氨基酸残基,其序列为CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC-NH2,有三对二硫键。对其进行了正确折叠及活性筛选。结果表明,该肽折叠主峰对小鼠脑内给药100ng,可明显观察到小鼠颤抖现象,对小鼠有明显镇痛作用,而非正确折叠则无反应。

  • 标签: O-超家族芋螺毒素 线纹芋螺 SO3 折叠 活性
  • 简介:比较了不同偶合方法及裂解条件对ω-芋螺毒素及其衍生物线性肽合成效率影响。结果表明,Boc/Bzl策略、Fmoc/But策略、手工及仪器对总偶合率影响较小,但裂解条件及保护策略对肽-树脂裂解影响很大,氟化氢体系裂解Boc/Bzl法合成树脂副产物较多,且主链易发生断裂,以低高法裂解效率最高。三氟乙酸体系裂解Fmoc法合成树脂效率高,主要副产物含Trt基线性肽,增加1,2-二巯基乙醇可提高肽纯度。

  • 标签: ω-芋螺毒素 线性肽 合成
  • 简介:目的:从中国南海芋螺中克隆新J超家族芋螺毒素,并进行序列和进化分析。方法:以芋螺毒腺管总RNA为模板,采用3′-RACE及巢式PCR方法扩增J超家族芋螺毒素基因,并将得到目的基因与pMD18-T载体连接并转化大肠杆菌DH5α,经测序比对后,获得新J超家族毒素,利用软件BioEdit、ClustalX及Mega5.05进行进化分析。结果:获得12个新J超家族芋螺毒素前体肽序列,其氨基酸组成具有新颖性,在进化树上与已报道J超家族毒素处于不同进化分支。结论:12个新J超家族毒素与已报道毒素序列之间同源性较低,J超家族新成员。

  • 标签: 芋螺毒素 J超家族 基因克隆 进化分析
  • 简介:种小型节肢动物,会通过吸入或动物血传染多种疾病。日本专家最近在蜱体内发现种可以抑制病原体增殖酶这可能有助于开发治疗由蜱引发感染药物。

  • 标签: 日本专家 病原体 增殖 体内 小型节肢动物
  • 简介:皮肤癌种常见恶性肿瘤,大部分基底细胞癌和鳞状细胞癌,85%以上基底细胞癌好发于颜面部[1].皮肤癌好发于暴露部位,尤以头面部居多[2].我院与2012年1月份为例99岁左面部皮肤癌患者行放疗,取得了理想效果.临床上皮肤癌以放射性治疗为治疗首选,皮肤癌位置表浅,边界清楚,直视下照射定位精确,对放射线特别敏感,而且皮肤耐受性较高,但考虑到患者99岁高龄并因骨折行动不便,肿瘤放疗风险,几家医院均未收治.现为病人整个放疗过程护理做如下报道.

  • 标签: 高龄 皮肤癌 放疗 护理
  • 简介:目的:通过对例1例桥小脑角肿瘤患者护理病例讨论,探讨围手术期护理措施.方法:对我科收治1例桥小脑角肿瘤患者进行护理经验总结.结果:通过精心护理和治疗,病人恢复良好.结论:加强桥小脑角占位围手术期护理,患者康复关键.

  • 标签: 桥小脑角 围手术期 护理
  • 简介:本实验将含有人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因cDNA重组真核表达质粒直接注射小鼠骨骼肌,观察了hGM-CSF基因在小鼠体内分泌表达情况。ELISA结果显示注射重组质粒DNA后,第15天左右小鼠血液hGM-CSF表达量最高,约有97ng/ml,第20天次之,第25天和第10天表达量相近,约有49ng/ml。生物学活性检测结果表明,实验组小鼠血液有维持TF-1依赖株细胞生长作用。表明重组质粒DNA直接注射骨骼肌不仅能表达hGM-CSF,而且表达产物有生物学恬性。

  • 标签: 基因治疗 HGM-CSF DNA注射 骨骼肌
  • 简介:探讨种菊科植物抽提物对小鼠血液生化成分影响.利用半自动生化分析仪测定血液生化成分,结果表明该抽提物可降低血清白蛋白和总蛋白含量;降低乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性和丙氨酸氨基转移酶活性;对血清中尿素、尿酸、肌酐都有明显降低作用;可减少血清二价金属离子Ca2+、Mg2+含量,增加Cl-含量;对碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清无机磷影响不明显.

  • 标签: 菊科植物 抽提物 小鼠 血液 生化成分 二价金属离子